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公开(公告)号：CN102838655B
公开(公告)日：2015-01-14
申请号：CN201210322338.X
申请日：2012-09-04
Applicant: 浙江海正药业股份有限公司
IPC: C07K1/30 , C07K14/765 , C07K19/00
Abstract: 本发明公开了一种毕赤酵母发酵液的固液分离方法，其包括将壳聚糖溶液与毕赤酵母发酵液混合均匀，调节pH并搅拌，使壳聚糖在毕赤酵母发酵液中发生絮凝，最终通过离心或过滤方法去除菌体及高分子杂质，获得含有重组蛋白质的溶液。采用本发明公开的方法，使得毕赤酵母菌体去除率和重组蛋白回收率都有了显著提高，分离时间短，分离成本低，所得溶液澄清度高，更适合工业化生产。
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公开(公告)号：CN105566445B
公开(公告)日：2021-11-02
申请号：CN201610020638.0
申请日：2016-01-13
Applicant: 浙江海正药业股份有限公司
Abstract: 本发明提供了一种从含有谷胱甘肽的溶液中分离纯化还原型谷胱甘肽的方法，包括步骤：1)向谷胱甘肽溶液中加入氧化剂，使其氧化至氧化型谷胱甘肽；2)向溶液中加入酸，调节pH至1.0‑4.0，离心或过滤；3)将步骤2)得到的离心或过滤后的溶液分别经过离子交换树脂、吸附树脂处理，得到氧化型谷胱甘肽洗脱液。4)将步骤3)得到的洗脱液使用还原剂进行还原得到谷胱甘肽溶液，将还原得到的谷胱甘肽溶液用吸附树脂脱盐，之后浓缩、结晶、干燥，得到谷胱甘肽。本发明操作简便、低污染、无需低温和氮气保护，能耗低，反应条件温和，适于工业化生产，得到的固体还原型谷胱甘肽的纯度＞99％。
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公开(公告)号：CN108753808B
公开(公告)日：2021-02-23
申请号：CN201810540239.6
申请日：2018-05-30
Applicant: 浙江海正药业股份有限公司
Abstract: 本发明属于生物工程领域，涉及腺苷三磷酸的制备。本发明提供了一种重组表达载体以及包含所述载体的重组表达宿主，所述重组表达载体包含编码腺苷激酶、腺苷酸激酶和乙酸激酶的多核苷酸；本发明还提供了使用所述重组表达宿主合成腺苷三磷酸的方法。本发明通过使用所述重组表达宿主全细胞催化合成腺苷三磷酸，提高了腺苷转化率、ATP产率和反应效率，同时反应体系组分简单、成本低。
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公开(公告)号：CN102838655A
公开(公告)日：2012-12-26
申请号：CN201210322338.X
申请日：2012-09-04
Applicant: 浙江海正药业股份有限公司
IPC: C07K1/30 , C07K14/765 , C07K19/00
Abstract: 本发明公开了一种毕赤酵母发酵液的固液分离方法，其包括将壳聚糖溶液与毕赤酵母发酵液混合均匀，调节pH并搅拌，使壳聚糖在毕赤酵母发酵液中发生絮凝，最终通过离心或过滤方法去除菌体及高分子杂质，获得含有重组蛋白质的溶液。采用本发明公开的方法，使得毕赤酵母菌体去除率和重组蛋白回收率都有了显著提高，分离时间短，分离成本低，所得溶液澄清度高，更适合工业化生产。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN108753808A
公开(公告)日：2018-11-06
申请号：CN201810540239.6
申请日：2018-05-30
Applicant: 浙江海正药业股份有限公司
Abstract: 本发明属于生物工程领域，涉及腺苷三磷酸的制备。本发明提供了一种重组表达载体以及包含所述载体的重组表达宿主，所述重组表达载体包含编码腺苷激酶、腺苷酸激酶和乙酸激酶的多核苷酸；本发明还提供了使用所述重组表达宿主合成腺苷三磷酸的方法。本发明通过使用所述重组表达宿主全细胞催化合成腺苷三磷酸，提高了腺苷转化率、ATP产率和反应效率，同时反应体系组分简单、成本低。
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公开(公告)号：CN105566445A
公开(公告)日：2016-05-11
申请号：CN201610020638.0
申请日：2016-01-13
Applicant: 浙江海正药业股份有限公司
CPC classification number: C07K5/0215
Abstract: 本发明提供了一种从含有谷胱甘肽的溶液中分离纯化还原型谷胱甘肽的方法，包括步骤：1)向谷胱甘肽溶液中加入氧化剂，使其氧化至氧化型谷胱甘肽；2)向溶液中加入酸，调节pH至1.0-4.0，离心或过滤；3)将步骤2)得到的离心或过滤后的溶液分别经过离子交换树脂、吸附树脂处理，得到氧化型谷胱甘肽洗脱液。4)将步骤3)得到的洗脱液使用还原剂进行还原得到谷胱甘肽溶液，将还原得到的谷胱甘肽溶液用吸附树脂脱盐，之后浓缩、结晶、干燥，得到谷胱甘肽。本发明操作简便、低污染、无需低温和氮气保护，能耗低，反应条件温和，适于工业化生产，得到的固体还原型谷胱甘肽的纯度＞99％。
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公开(公告)号：CN101993867B
公开(公告)日：2012-07-11
申请号：CN200910169247.5
申请日：2009-08-24
Applicant: 浙江海正药业股份有限公司
Abstract: 本发明公开了一种以壳聚糖为载体的固定化方法，将壳聚糖溶液与酶、细胞、菌体、发酵液或蛋白质等待固定物质的溶液或悬浮液直接混合，交联，再在碱性条件下固化，分散得到颗粒状的交联壳聚糖。本发明形成的固定化颗粒具有多孔结构，机械强度好，过滤性能强，不需要复杂的设备。本发明可用于大规模的细胞固定化、酶固定化、不经固液分离的发酵液的直接固定化，例如瓜氨酸生产中2000L规模的发酵液直接固定化，以及制备S-2，2-二甲基环丙甲酰胺、R-氟比洛芬、N-乙酰神经氨酸或R-3-羟基-戊二酸乙酯的转化反应。本发明还可用于溶液的除菌或澄清处理。
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公开(公告)号：CN102250934A
公开(公告)日：2011-11-23
申请号：CN201010173735.6
申请日：2010-05-17
Applicant: 浙江海正药业股份有限公司
Abstract: 酰胺水解酶基因的克隆、工程菌的构建与酶蛋白表达以及工业化的应用，该发明属于生物工程技术，主要解决自然菌产生酰胺水解酶酶活低、菌浓低、生产应用困难等问题。在代尔伏特菌属(Delftia)的Delftiatsuruhatensis菌发酵产生水解酶的基础上，克隆出酰胺水解酶基因，建立了一整套大肠杆菌基因工程菌发酵、诱导表达、应用于工业化生产的工艺。通过上述基因工程改造，酰胺酶活性达到3000u/l以上，远远高于原始菌株的300u/l；通过实际应用表明，该酶用途广泛，可以应用于他汀类药物侧链的生产，大大降低了生产成本，有助于实现绿色化工。
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公开(公告)号：CN101993867A
公开(公告)日：2011-03-30
申请号：CN200910169247.5
申请日：2009-08-24
Applicant: 浙江海正药业股份有限公司
Abstract: 本发明公开了一种以壳聚糖为载体的固定化方法，将壳聚糖溶液与酶、细胞、菌体、发酵液或蛋白质等待固定物质的溶液或悬浮液直接混合，交联，再在碱性条件下固化，分散得到颗粒状的交联壳聚糖。本发明形成的固定化颗粒具有多孔结构，机械强度好，过滤性能强，不需要复杂的设备。本发明可用于大规模的细胞固定化、酶固定化、不经固液分离的发酵液的直接固定化，例如瓜氨酸生产中2000L规模的发酵液直接固定化，以及制备S-2，2-二甲基环丙甲酰胺、R-氟比洛芬、N-乙酰神经氨酸或R-3-羟基-戊二酸乙酯的转化反应。本发明还可用于溶液的除菌或澄清处理。
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