公开(公告)号：CN103146669A

公开(公告)日：2013-06-12

申请号：CN201310074573.4

申请日：2013-03-08

Applicant: 浙江普洛得邦制药有限公司 ,  杭州师范大学

Inventor： 陈振明 ,  周硕 ,  赖敦岳 ,  李兰杰 ,  陈亮

IPC: C12N9/84 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种自诱导培养基及其应用。所述自诱导培养基的配方为：阿拉伯糖2～10g/L，葡萄糖0.5～2.5g/L，甘油5～25g/L，蛋白胨8～12g/L，磷酸盐6.5～7.4g/L，硫酸盐1.1～1.3g/L，NH4Cl2.6～2.7g/L，痕量元素溶液适量。所述应用为该自诱导培养基在生产青霉素酰胺酶中的应用。与现有技术相比，本发明的自诱导培养基利用阿拉伯糖作为底物诱导目的蛋白表达，可调控性强，蛋白表达量高；在一个具体实施方式中，青霉素酰胺酶酶活达6U/mL，远远高于使用乳糖诱导的蛋白表达量，对开发生产青霉素酰胺酶的新工艺具有重要的指导意义。

公开(公告)号：CN103834631B

公开(公告)日：2015-12-30

申请号：CN201410058390.8

申请日：2014-02-20

Applicant: 浙江普洛得邦制药有限公司 ,  杭州师范大学

Inventor： 陈亮 ,  陈振明 ,  付玲燕 ,  周硕 ,  赖敦岳 ,  任红阳 ,  陈治 ,  李兰杰

IPC: C12N9/84 ,  C12N15/55 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P35/04

Abstract: 本发明公开了一种青霉素G酰化酶突变体及其编码基因和应用，所述青霉素G酰化酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明还提供了所述的青霉素G酰化酶突变体在合成头孢类抗生素中的应用。本发明提供了一种新的青霉素G酰化酶突变体，与野生型相比，青霉素G酰化酶突变体在合成头孢类抗生素如头孢丙烯、头孢克洛或头孢羟氨苄时具有更高的活性，尤其是在催化7-APRA与侧链2-羟基乙基对羟基苯甘氨酸酯合成头孢丙烯时，酶活力极大提高，比活力由原先1.5U/mg提升到35U/mg，且合成水解活力比没有下降，合成水解比可达1.8。

公开(公告)号：CN103834631A

公开(公告)日：2014-06-04

申请号：CN201410058390.8

申请日：2014-02-20

Applicant: 浙江普洛得邦制药有限公司 ,  杭州师范大学

Inventor： 陈亮 ,  陈振明 ,  付玲燕 ,  周硕 ,  赖敦岳 ,  任红阳 ,  陈治 ,  李兰杰

IPC: C12N9/84 ,  C12N15/55 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P35/04

CPC classification number: C12N9/84 ,  C12P35/04 ,  C12Y305/01011

Abstract: 本发明公开了一种青霉素G酰化酶突变体及其编码基因和应用，所述青霉素G酰化酶突变体的氨基酸序列如SEQ？ID？NO.1所示，所述编码基因的核苷酸序列如SEQ？ID？NO.2所示。本发明还提供了所述的青霉素G酰化酶突变体在合成头孢类抗生素中的应用。本发明提供了一种新的青霉素G酰化酶突变体，与野生型相比，青霉素G酰化酶突变体在合成头孢类抗生素如头孢丙烯、头孢克洛或头孢羟氨苄时具有更高的活性，尤其是在催化7-APRA与侧链2-羟基乙基对羟基苯甘氨酸酯合成头孢丙烯时，酶活力极大提高，比活力由原先1.5U/mg提升到35U/mg，且合成水解活力比没有下降，合成水解比可达1.8。

公开(公告)号：CN103865911B

公开(公告)日：2015-10-21

申请号：CN201410057240.5

申请日：2014-02-20

Applicant: 浙江普洛得邦制药有限公司

Inventor： 任红阳 ,  李兰杰 ,  陈振明 ,  周硕 ,  陈治 ,  黄艳芳 ,  赖敦岳 ,  陈亮 ,  厉昆

IPC: C12N9/84 ,  C12N15/55 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P35/04

Abstract: 本发明公开了一种青霉素G酰化酶突变体及其在合成头孢类抗生素中的应用。所述青霉素G酰化酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明还提供了所述的青霉素G酰化酶突变体在合成头孢克洛中的应用。本发明提供了一种新的青霉素酰化酶突变体，与野生型相比，青霉素G酰化酶突变体在合成头孢类抗生素如头孢丙烯、头孢克洛或头孢羟氨苄时具有更高的活性，尤其是催化7-ACCA和苯甘氨酸甲酯合成头孢克洛，比活力由原先1.2U/mg提升到29.8U/mg，且合成水解活力与野生型几乎一致，合成水解比可达1.7，头孢克洛的产率可达71.5%。

公开(公告)号：CN103865911A

公开(公告)日：2014-06-18

申请号：CN201410057240.5

申请日：2014-02-20

Applicant: 浙江普洛得邦制药有限公司

Inventor： 任红阳 ,  李兰杰 ,  陈振明 ,  周硕 ,  陈治 ,  黄艳芳 ,  赖敦岳 ,  陈亮 ,  厉昆

IPC: C12N9/84 ,  C12N15/55 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P35/04

CPC classification number: C12N9/84 ,  C12P35/04 ,  C12Y305/01011

Abstract: 本发明公开了一种青霉素G酰化酶突变体及其在合成头孢类抗生素中的应用。所述青霉素G酰化酶突变体的氨基酸序列如SEQ？ID？NO.1所示，所述编码基因的核苷酸序列如SEQ？ID？NO.2所示。本发明还提供了所述的青霉素G酰化酶突变体在合成头孢克洛中的应用。本发明提供了一种新的青霉素酰化酶突变体，与野生型相比，青霉素G酰化酶突变体在合成头孢类抗生素如头孢丙烯、头孢克洛或头孢羟氨苄时具有更高的活性，尤其是催化7-ACCA和苯甘氨酸甲酯合成头孢克洛，比活力由原先1.2U/mg提升到29.8U/mg，且合成水解活力与野生型几乎一致，合成水解比可达1.7，头孢克洛的产率可达71.5%。