公开(公告)号：CN117004541A

公开(公告)日：2023-11-07

申请号：CN202310829179.0

申请日：2023-07-07

Applicant: 浙江工业大学

Inventor： 柳志强 ,  随兰多 ,  黄良刚 ,  姚远 ,  周俊平 ,  张博 ,  郑裕国

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/54 ,  C12N15/31 ,  C12N15/70 ,  C12P13/02 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及微生物代谢工程技术领域，尤其涉及一种高产D‑泛酸的基因工程菌及其构建方法与应用，通过敲除控制菌株胁迫应激响应途径的压力响应调节因子(rssB)、阻遏碳储存调控因子(csrB)以及过表达细胞碳储存调控因子(csrA)；过表达影响电子传递链途径的σS(或σ38)因子(rpoS)和低氧诱导因子(arcA)的基因降低菌株体内活性氧(ROS)的含量；过表达RNA分子伴侣(hfQ)促进并调节RNA(sRNA)和mRNA之间的相互作用以及RNA的稳定性，有效的提升菌株的CellGrowth(OD600)，DPA产量从底盘菌株的3.83g/L提升至4.35g/L，D‑泛酸产量提升了13.58％，具有很大的应用潜力。

公开(公告)号：CN117551595A

公开(公告)日：2024-02-13

申请号：CN202311509415.7

申请日：2023-11-14

Applicant: 浙江工业大学

Inventor： 柳志强 ,  黄良刚 ,  随兰多 ,  姚远 ,  逄爱萍 ,  周俊平 ,  张博 ,  郑裕国

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12N15/31 ,  C12P13/02 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及生物工程技术领域，尤其涉及一种高产D‑泛酸的基因工程菌、构建方法及应用。本发明通过质粒表达全局转录调控因子筛选出发酵效果较好的IhfAB和cra；对IhfAB和cra第二密码子进行优化，并使用质粒表达进一步的验证优化结果，分解代谢阻遏剂/活化剂(cra)改造后的发酵菌株在摇瓶发酵中生产D‑泛酸的水平相比于出发菌Dpan16S携带未改造质粒摇瓶发酵水平从2.49g/L提高到3.17g/L，整合宿主因子(ihfAB)经过优化的质粒摇瓶发酵较于未经过改造的质粒摇瓶发酵水平从3.46g/L提高至3.78g/L；随后将优化后cra和IhfAB导入到Dpan16S基因组中，经过摇瓶发酵验证后进一步的将D‑泛酸产量由3.82g/L提升至4.13g/L和4.05g/L，证明本发明提供的重组大肠杆菌具有重要的工业应用价值。