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公开(公告)号：CN110951717B
公开(公告)日：2023-08-18
申请号：CN201911384932.X
申请日：2019-12-28
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明涉及一种L‑阿拉伯糖差向异构酶突变体，及其在微生物催化D‑半乳糖异构化制备D‑塔格糖中的应用。所述L‑阿拉伯糖差向异构酶突变体，由所示氨基酸经定点突变而得，所述点突变位点为下列中的一个或多个：(1)第304位、(2)第75位、(3)第274位、(4)第167位。本发明有益效果主要体现在：本发明提供了一种全新的L‑阿拉伯糖差向异构酶及其突变体，该突变体具有高最适反应温度75℃，其酶活与原始酶相比提高280％。使用本突变体生产D‑tagatose，产物得率最高可达73.3％。将重组酶进行固定化并连续催化30批次，转化率均大于73％。该突变体的转化水平展示了优良的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN110904088B
公开(公告)日：2023-03-28
申请号：CN201911384895.2
申请日：2019-12-28
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明涉及一种新型耐高温D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶及突变体，及其在微生物催化D‑果糖异构化制备D‑阿洛酮糖(D‑psicose)中的应用。所属异构酶氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示；所述异构酶突变体由SEQ ID NO.3所示氨基酸经定点突变而得，所述点突变位点为下列中的一个或多个：(1)第106位、(2)第183位、(3)第211位、(4)第276位。本发明有益效果主要体现在：本发明提供了一种全新的耐高温D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶突变体，该突变体具有超高酶活和底物转化率，最适反应温度可达90℃。当底物浓度为700g/L，反应温度为85℃时，产物得率最高达67.14％。将重组酶进行固定化并连续催化300批次，转化率均大于67％。本发明解决了现有酶催化制备D‑psicose效率低下的难题，获得的优于文献报道的连续转化效果对提升D‑psicose工业化水平具有重要意义。
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公开(公告)号：CN111690629B
公开(公告)日：2022-04-19
申请号：CN202010471544.1
申请日：2020-05-29
Applicant: 浙江工业大学 , 浙江华康药业股份有限公司
Abstract: 本发明公开一种内切葡聚糖苷酶突变体、基因工程菌及其在降解纤维素中的应用。所述内切葡聚糖苷酶突变体是将SEQ ID No.3所示氨基酸序列第202位的赖氨酸突变为精氨酸。本发明内切葡聚糖苷酶突变体的比活力比野生酶显著提高1.4倍左右。以微晶纤维素为底物时，纤维素酶与突变酶的共同反应，反应催化效率较以纤维素酶单独降解底物显著提高了23.5％，可以看出突变酶显著提高了酶活力，可以降低工业应用的经济成本，为其在食品生物乙醇等工业生产领域提供了应用基础。
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公开(公告)号：CN110862980B
公开(公告)日：2021-05-04
申请号：CN201911204720.9
申请日：2019-11-29
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明涉及一种D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶突变体，及其在微生物催化D‑果糖异构化制备D‑阿洛酮糖中的应用。所述D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶突变体，由所示氨基酸经定点突变而得，所述点突变位点为下列中的一个或多个：(1)第242位、(2)第105位、(3)第210位、(4)第147位、(5)第184位。本发明有益效果主要体现在：本发明提供了一种全新的D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶及其突变体，该突变体具有高最适反应温度85℃，解决了现有酶无法在高温生产D‑psicose的技术难题。使用本突变体生产D‑psicose，产物得率最高可达40.1％，优于原始酶和其他突变酶的转化效果，具有较好工业应用前景。
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公开(公告)号：CN111057697A
公开(公告)日：2020-04-24
申请号：CN201911378513.5
申请日：2019-12-27
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明涉及一种具备D-阿洛酮糖3-差向异构酶功能的耐高温TIM barrel蛋白突变体，及其在催化D-果糖异构化制备D-阿洛酮糖中的应用。所述TIM Barrel蛋白突变体，由序列如SEQ ID NO.1所示氨基酸经定点突变而得，所述点突变位点为下列中的一个或多个：(1)第241位、(2)第182位、(3)第201位、(4)第105位、(5)第30位。本发明有益效果主要体现在：本发明提供了一种全新的TIM Barrel蛋白酶突变体，该突变体具有超高酶活、较高最适反应温度和底物转化率，解决了现有酶催化制备D-psicose效率低下的技术难题。使用本突变体生产D-psicose，产物得率最高可达53.68％，优于原始酶和其他突变酶的转化效果，具有较好工业应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104745563A
公开(公告)日：2015-07-01
申请号：CN201510098439.7
申请日：2015-03-05
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明公开了一种葡萄糖异构酶、编码基因、重组载体、基因工程菌及其突变体，以及葡萄糖异构酶及其突变体在催化D-葡萄糖异构化制备D-果糖中的应用，本发明提供的高效表达耐高温葡萄糖异构酶的重组大肠杆菌，解决了一般的葡萄糖异构酶最适反应温度低的问题；应用该菌种生产葡萄糖异构酶具有产量高、工艺简单、便于工业化应用等优点，该菌株可以直接用于高果糖浆的生产，而不需细胞破碎；发酵结束后在90℃条件下对D-葡萄糖的总酶活达到414.3U/g，D-葡萄糖的转化率达到55.4％，90℃下保温24h残余酶活为68％，反应平衡缩短至1.5h，这为高果糖浆的大规模生产以及其作为重要的食品添加剂提供了良好的技术支持。
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公开(公告)号：CN111057697B
公开(公告)日：2023-03-31
申请号：CN201911378513.5
申请日：2019-12-27
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明涉及一种具备D‑阿洛酮糖3‑差向异构酶功能的耐高温TIM barrel蛋白突变体，及其在催化D‑果糖异构化制备D‑阿洛酮糖中的应用。所述TIM Barrel蛋白突变体，由序列如SEQ ID NO.1所示氨基酸经定点突变而得，所述点突变位点为下列中的一个或多个：(1)第241位、(2)第182位、(3)第201位、(4)第105位、(5)第30位。本发明有益效果主要体现在：本发明提供了一种全新的TIM Barrel蛋白酶突变体，该突变体具有超高酶活、较高最适反应温度和底物转化率，解决了现有酶催化制备D‑psicose效率低下的技术难题。使用本突变体生产D‑psicose，产物得率最高可达53.68％，优于原始酶和其他突变酶的转化效果，具有较好工业应用前景。
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公开(公告)号：CN115232802A
公开(公告)日：2022-10-25
申请号：CN202210757202.5
申请日：2022-06-29
Applicant: 浙江工业大学 , 浙江华康药业股份有限公司
IPC: C12N9/42 , C12N1/19 , C12N15/55 , C12N15/53 , C12P19/02 , C12P19/12 , C12P19/14 , C12P19/20 , C12N15/81 , C12R1/84
Abstract: 本发明公开了一种β‑葡萄糖苷酶突变体、工程菌及其在降解纤维素中的应用，所述β‑葡萄糖苷酶突变体是将SEQ ID No.2所示氨基酸序列第20位或第240位进行定点突变获得的。本发明突变酶的比活力比野生酶显著提高1.5倍及以上。以内切葡聚糖苷酶、外切葡聚糖苷酶、裂解多糖单加氧酶与突变酶的混合液为催化剂时，葡萄糖产率较野生酶提高了15％‑25％。
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公开(公告)号：CN110452899B
公开(公告)日：2021-04-30
申请号：CN201910594155.5
申请日：2019-07-03
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明涉及一种耐高温葡萄糖异构酶、突变体及其在制备D‑果糖中的应用。所述葡萄糖异构酶氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示，所述突变体由序列如SEQ ID NO：3所示的氨基酸经定点突变而来。本发明提供了一种未被鉴定的全新耐高温葡萄糖异构酶及其突变体，该突变体具有超级最适反应温度120℃，比原始酶GtAI提高了60℃，属于文献报道的最高水平，解决了现有酶无法在高温生产高果糖浆的技术难题。使用本突变酶生产高果糖浆转化率最高可达75.7％，高于原始酶和其他突变酶的转化效果，同时也是文献报道的最高水平，具有较好应用前景。
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公开(公告)号：CN112264111A
公开(公告)日：2021-01-26
申请号：CN202011336829.0
申请日：2020-11-25
Applicant: 浙江华康药业股份有限公司 , 浙江工业大学
Abstract: 本发明涉及一种恢复葡萄糖氢化催化剂活性的系统，包括葡萄糖氢化反应釜、冷凝水罐、一次沉降罐、催化剂清洗槽和催化剂储槽，在催化剂清洗槽上分别设置催化剂入口、冷凝水进口、催化剂出口和清洗液出口，催化剂入口通过催化剂进料管路与一次沉降罐的底部连通，冷凝水进口通过冷凝水进料管路与冷凝水罐连通，催化剂出口通过催化剂出料管路与催化剂储槽连通，清洗液出口通过清洗液出液管路与污水池连通，在一次沉降罐和催化剂清洗槽上分别设置热纯化水进水口与热纯化水连通。本发明还公开恢复葡萄糖氢化催化剂活性的方法。本发明利用蒸汽冷凝水清洗催化剂，恢复催化剂活性，延长催化剂使用周期；而且该系统简单，投资少，有效降低生产成本。
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