公开(公告)号：CN103013898B

公开(公告)日：2014-07-16

申请号：CN201210440849.1

申请日：2012-11-07

Applicant: 宁波美诺华药业股份有限公司 ,  浙江大学宁波理工学院

Inventor： 金志华 ,  胡升 ,  杨岳微 ,  姚成志 ,  王爱珂 ,  金庆超 ,  杨郁 ,  梅乐和 ,  高然

IPC: C12N1/21 ,  C12P17/00 ,  C12P7/62 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种表达羰基还原酶的重组工程菌及其应用，该工程菌包括宿主细胞和转入宿主细胞的重组载体，所述重组载体由原始载体及接入原始载体的目的基因构成，所述宿主细胞为大肠杆菌(Escherichiacoli)Rosetta(DE3)，所述的目的基因为羰基还原酶基因，碱基序列如SEQ IDNO.1所示。本发明重组工程菌羰基还原酶表达水平较高，利用诱导培养的菌体细胞将氮，氮-二甲基-3-氧基-3-(2-噻吩)-l-丙胺盐酸盐转化为(S)-氮，氮-二甲基-3-羟基-3-(2-噻吩)-l-丙胺；或将4-氯乙酰乙酸乙酯转化为(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯，两种产物的光学纯度及转化率均较高。

公开(公告)号：CN102925368B

公开(公告)日：2014-01-01

申请号：CN201210441085.8

申请日：2012-11-07

Applicant: 浙江大学宁波理工学院 ,  宁波美诺华药业股份有限公司

Inventor： 金志华 ,  胡升 ,  姚成志 ,  王爱珂 ,  金庆超 ,  杨郁 ,  张丽靖 ,  曹倩 ,  梅乐和

IPC: C12N1/14 ,  C12P7/62 ,  C12P17/00 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明公开了一种可催化不对称还原反应的球孢白僵菌(Beauveriabassiana)，该菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物保藏中心，保存号为：CGMCC NO.6345，保藏时间2012年7月12日。本发明的菌株可以表达高立体选择性的羰基还原酶，利用该菌株进行4-氯乙酰乙酸乙酯的全细胞催化时，产物中S-4-氯-3-羟基丁酸乙酯的对映体过量值达到100％e.e.；利用该菌株进行N，N-二甲基-3-氧代-3-(2-噻吩)-1-丙胺盐酸盐的全细胞催化时，产物中(S)-N，N-二甲基-3-羟基-3-(2-噻吩)-1-丙胺盐酸盐的对映体过量值达到100％e.e.。

公开(公告)号：CN103013898A

公开(公告)日：2013-04-03

申请号：CN201210440849.1

申请日：2012-11-07

Applicant: 宁波美诺华药业股份有限公司 ,  浙江大学宁波理工学院

Inventor： 金志华 ,  胡升 ,  杨岳微 ,  姚成志 ,  王爱珂 ,  金庆超 ,  杨郁 ,  梅乐和 ,  高然

IPC: C12N1/21 ,  C12P17/00 ,  C12P7/62 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种表达羰基还原酶的重组工程菌及其应用，该工程菌包括宿主细胞和转入宿主细胞的重组载体，所述重组载体由原始载体及接入原始载体的目的基因构成，所述宿主细胞为大肠杆菌(Escherichiacoli)Rosetta(DE3)，所述的目的基因为羰基还原酶基因，碱基序列如SEQ ID NO.1所示。本发明重组工程菌羰基还原酶表达水平较高，利用诱导培养的菌体细胞将氮，氮-二甲基-3-氧基-3-(2-噻吩)-l-丙胺盐酸盐转化为(S)-氮，氮-二甲基-3-羟基-3-(2-噻吩)-l-丙胺；或将4-氯乙酰乙酸乙酯转化为(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯，两种产物的光学纯度及转化率均较高。

公开(公告)号：CN102925368A

公开(公告)日：2013-02-13

申请号：CN201210441085.8

申请日：2012-11-07

Applicant: 浙江大学宁波理工学院 ,  宁波美诺华药业股份有限公司

Inventor： 金志华 ,  胡升 ,  姚成志 ,  王爱珂 ,  金庆超 ,  杨郁 ,  张丽靖 ,  曹倩 ,  梅乐和

IPC: C12N1/14 ,  C12P7/62 ,  C12P17/00 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明公开了一种可催化不对称还原反应的球孢白僵菌(Beauveriabassiana)，该菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物保藏中心，保存号为：CGMCC NO.6345，保藏时间2012年7月12日。本发明的菌株可以表达高立体选择性的羰基还原酶，利用该菌株进行4-氯乙酰乙酸乙酯的全细胞催化时，产物中S-4-氯-3-羟基丁酸乙酯的对映体过量值达到100％e.e.；利用该菌株进行N，N-二甲基-3-氧代-3-(2-噻吩)-1-丙胺盐酸盐的全细胞催化时，产物中(S)-N，N-二甲基-3-羟基-3-(2-噻吩)-1-丙胺盐酸盐的对映体过量值达到100％e.e.。

公开(公告)号：CN104371935B

公开(公告)日：2017-05-10

申请号：CN201410570517.4

申请日：2014-10-23

Applicant: 浙江大学宁波理工学院

Inventor： 金志华 ,  金庆超 ,  吴志革 ,  杨郁 ,  王爱珂 ,  庄庆察 ,  黄俊淇 ,  蔡伟 ,  戎凯

IPC: C12N1/16 ,  C12P13/00 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明提供一种博伊丁假丝酵母，它的保藏编号为CGMCC9446，完整命名为博伊丁假丝酵母T1。本发明还进一步提供该博伊丁假丝酵母T1在催化合成阿托伐他汀中间体中的应用，具体为以6‑氰基‑(5R)‑羟基‑3‑羰基已酸叔丁酯为底物、催化合成6‑氰基‑(3R,5R)‑二羟基己酸叔丁酯，该博伊丁假丝酵母可以表达高立体选择性的羰基还原酶，使6‑氰基‑(5R)‑羟基‑3‑羰基已酸叔丁酯的转化率达到99％，产物6‑氰基‑(3R,5R)‑二羟基己酸叔丁酯的d.e.值达到100％。

公开(公告)号：CN104371935A

公开(公告)日：2015-02-25

申请号：CN201410570517.4

申请日：2014-10-23

Applicant: 浙江大学宁波理工学院

Inventor： 金志华 ,  金庆超 ,  吴志革 ,  杨郁 ,  王爱珂 ,  庄庆察 ,  黄俊淇 ,  蔡伟 ,  戎凯

IPC: C12N1/16 ,  C12P13/00 ,  C12R1/645

CPC classification number: C12N1/16 ,  C12P13/002 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明提供一种博伊丁假丝酵母，它的保藏编号为CGMCC9446，完整命名为博伊丁假丝酵母T1。本发明还进一步提供该博伊丁假丝酵母T1在催化合成阿托伐他汀中间体中的应用，具体为以6-氰基-(5R)-羟基-3-羰基已酸叔丁酯为底物、催化合成6-氰基-(3R,5R)-二羟基己酸叔丁酯，该博伊丁假丝酵母可以表达高立体选择性的羰基还原酶，使6-氰基-(5R)-羟基-3-羰基已酸叔丁酯的转化率达到99％，产物6-氰基-(3R,5R)-二羟基己酸叔丁酯的d.e.值达到100％。