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公开(公告)号：CN116949084A
公开(公告)日：2023-10-27
申请号：CN202310824267.1
申请日：2023-07-06
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种asperpyridone A的高效生物合成方法，利用农杆菌介导的转染构建大团囊虫草中的转化体系，该生物合成方法高效，方便，包括：将途径特异性调控因子topC基因片段，得到过表达质粒，将表达质粒利用电转化转入根癌农杆菌EHA105；接种于相应液体培养基避光振荡培养，取培养液，然后再避光振荡培养，得到重组农杆菌EHA105菌液；取重组农杆菌EHA105菌液和大团囊虫草菌分生孢子悬浮液混合，避光共培养，得到共培养混合菌体；得到OE::topC大团囊虫草转化子，液体发酵培养，发酵液经分离得到化合物asperpyridone A。
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公开(公告)号：CN109943545B
公开(公告)日：2021-08-03
申请号：CN201910250807.3
申请日：2019-03-29
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明提供一种酰基转移酶结构域定向改造合成化合物的方法，该方法通过催化合成链霉菌次级代谢产物主链的I型聚酮合酶中专一转移相同底物的酰基转移酶结构域的氨基酸序列比对，从而得到其转移底物的关键氨基酸位点。利用AT结构域与底物的对接模型和分子动力学模拟、AT结构域的点突变和体外生化反应分析验证上述转移底物的关键氨基酸位点。通过替换其他AT结构域转移底物的关键位点，改变其转移的底物，从而发酵产生新型化合物。本发明确定AT结构域中关键氨基酸步骤简单，筛选突变株相对快速，为链霉菌合成新型I型聚酮化合物提供了普遍通用的技术，为链霉菌产生更多的药物提供依据，为产生链霉菌次级代谢新型天然产物提供了一种新的途径。
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公开(公告)号：CN107723308A
公开(公告)日：2018-02-23
申请号：CN201710827974.0
申请日：2017-09-14
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种化合物balanol的生物合成方法及基因簇，该生物合成方法高效，方便，包括：将blnR基因片段连入载体中，得到表达质粒；将表达质粒利用电转化转入根癌农杆菌EHA105，筛选培养，得到带有表达质粒的农杆菌；接种于液体培养基避光振荡培养，取培养液，然后再避光振荡培养，得到重组农杆菌EHA105菌液；收集大团囊虫草分生孢子，得到大团囊虫草菌分生孢子悬浮液；取重组农杆菌EHA105菌液和大团囊虫草菌分生孢子悬浮液混合，避光共培养，得到共培养混合菌体；得到OE::blnR大团囊虫草转化子，发酵培养，发酵液经分离得到化合物balanol。
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公开(公告)号：CN101864372A
公开(公告)日：2010-10-20
申请号：CN201010176169.4
申请日：2010-05-18
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种抗菌肽基因工程菌株的制备方法。本发明首先根据抗菌肽Cecropin A氨基酸序列的特点，设计了新的抗菌肽基因，在序列的5’端加入了组氨酸标记序列，两端分别加入了Xho I和Not I酶切位点序列，合成其序列；其次将获得产物克隆至T载体；第三是将目的基因构建于酵母表达载体pPIC9k，构建成含目的基因的重组载体pPIC-CEC；第四是将其转化于毕赤酵母GS115中表达，形成了抗菌肽基因转化毕赤酵母工程菌GS115(pPIC-CEC)。该菌株可以表达产生基因工程抗菌肽Cecropin A，该菌成本低，大规模发酵生产方便，易于实现产业化，本发明操作方法简单，易于观察，重复性好，表达产物将来可应用于水果采后生物防治，可以带来一定的经济效益。
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公开(公告)号：CN108265074B
公开(公告)日：2020-10-27
申请号：CN201810129024.5
申请日：2018-02-08
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明提供一种内生真菌高效遗传体系的构建方法，包括(1)适用于齿梗孢霉的农杆菌转化法；(2)齿梗孢霉体内高表达系统；(3)齿梗孢霉体内荧光表达系统；(4)齿梗孢霉基因定向敲除系统。所述内生菌为齿梗孢霉(Calcarisporium arbuscula)。本发明所提供的内生真菌齿梗孢霉遗传体系，首次建立了齿梗孢霉体内高表达系统，筛选出四个与齿梗孢霉适配的强启动子。本发明可在激活隐性基因簇、化合物生物合成机制以及酶功能研究中的应用。本发明方法设计合理，与现有原生质体转化法相比，其成本低廉、操作简单、实验周期短、转化效率高，为齿梗孢霉的基因工程研究和遗传改造提供材料。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110343638B
公开(公告)日：2020-08-11
申请号：CN201910585448.7
申请日：2019-07-01
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明提供了一株新的产达托霉素的链霉菌及其应用，为灰色链霉菌的一个亚种，将其命名为灰色链霉菌L340(Streptomyces griseus)，保藏号：CGMCC17921。本发明提供的菌株遗传性状和发酵单位较稳定，培养和发酵条件适合于工业化生产达托霉素，并消除了后期分离纯化的色素干扰。本发明提供的链霉菌通过发酵得到次级代谢产物达托霉素，优点在于没有色素积累的干扰，代谢谱更加干净，在后期分离纯化中优势明显。
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公开(公告)号：CN107723308B
公开(公告)日：2020-04-24
申请号：CN201710827974.0
申请日：2017-09-14
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种化合物balanol的生物合成方法及基因簇，该生物合成方法高效，方便，包括：将blnR基因片段连入载体中，得到表达质粒；将表达质粒利用电转化转入根癌农杆菌EHA105，筛选培养，得到带有表达质粒的农杆菌；接种于液体培养基避光振荡培养，取培养液，然后再避光振荡培养，得到重组农杆菌EHA105菌液；收集大团囊虫草分生孢子，得到大团囊虫草菌分生孢子悬浮液；取重组农杆菌EHA105菌液和大团囊虫草菌分生孢子悬浮液混合，避光共培养，得到共培养混合菌体；得到OE::blnR大团囊虫草转化子，发酵培养，发酵液经分离得到化合物balanol。
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公开(公告)号：CN103014021A
公开(公告)日：2013-04-03
申请号：CN201210544537.5
申请日：2012-12-13
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种控制水稻叶片叶绿体早期发育的基因OsMCP-UF；该基因OsMCP-UF具有如SEQ ID NO：1和/或SEQ ID NO：4所示的DNA序列。本发明还同时公开了一种杂交育种去除假杂种的方法，包括用具有SEQ ID No：4所示的核苷酸序列的基因通过杂交、回交导入水稻保持系、不育系品种；当叶片表型为黄化时，说明该植株为假杂种；应作去除处理，从而实现去除假杂种的目的。
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公开(公告)号：CN108265074A
公开(公告)日：2018-07-10
申请号：CN201810129024.5
申请日：2018-02-08
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明提供一种内生真菌高效遗传体系的构建方法，包括(1)适用于齿梗孢霉的农杆菌转化法；(2)齿梗孢霉体内高表达系统；(3)齿梗孢霉体内荧光表达系统；(4)齿梗孢霉基因定向敲除系统。所述内生菌为齿梗孢霉(Calcarisporium arbuscula)。本发明所提供的内生真菌齿梗孢霉遗传体系，首次建立了齿梗孢霉体内高表达系统，筛选出四个与齿梗孢霉适配的强启动子。本发明可在激活隐性基因簇、化合物生物合成机制以及酶功能研究中的应用。本发明方法设计合理，与现有原生质体转化法相比，其成本低廉、操作简单、实验周期短、转化效率高，为齿梗孢霉的基因工程研究和遗传改造提供材料。
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公开(公告)号：CN102584970A
公开(公告)日：2012-07-18
申请号：CN201210031458.4
申请日：2012-02-13
Applicant: 浙江大学
IPC: C07K14/415 , C12N15/29 , C12N15/84 , A01H5/00 , C12N5/10
Abstract: 本发明涉及植物基因工程领域，旨在提供一种水稻侧根发生调控基因OsLRD1及其编码的蛋白质。该基因的核苷酸序列与SEQ ID NO：1所示的序列一致；该蛋白质的氨基酸序列与SEQ ID NO：2所示的序列一致。本发明还提供了所述的基因、或在该基因的核苷酸序列中添加、取代、插入和缺失一个或多个核苷酸生成的等位基因或衍生物在构建转基因水稻中的用途；以及包含所述的基因、或在该基因的核苷酸序列中添加、取代、插入和缺失一个或多个核苷酸生成的等位基因或衍生物的转基因植物细胞。本发明提供了新的控制根系发育的基因，提供了新的用于从遗传学角度来改良根系结构的方法和技术。
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