运用CRISPR-Cas9系统敲除水稻MIRNA393b茎环序列的基因编辑方法

    公开(公告)号:CN105647962A

    公开(公告)日:2016-06-08

    申请号:CN201610085619.6

    申请日:2016-02-15

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明涉及水稻转基因材料的构建,旨在提供一种运用CRISPR-Cas9系统敲除水稻MIRNA393b茎环序列的基因编辑方法。包括:选择gRNA靶位点进行克隆和GG连接,扩增后酶切,再与pGREB32载体连接;然后转化大肠杆菌感受态细胞;将测序结果正确的质粒转化农杆菌,并介导转化水稻愈伤组织获得转基因植株,获得转基因阳性株系;收取T0代突变体植株种子,发苗,对T1代植株进行纯合体筛选;经miR393b表达检测为阴性的纯合株系,即为完全丧失miR393b茎环序列及其表达的水稻突变体。本发明能有效敲除小RNA的茎环序列,且可以制备同一小RNA家族不同成员的功能丧失突变体。该突变体植株进行扩繁大量种子,是成功获得研究水稻MIRNA393b基因功能的理想材料。

    农杆菌介导转基因培养大岩桐植株的方法

    公开(公告)号:CN102994544A

    公开(公告)日:2013-03-27

    申请号:CN201210511218.4

    申请日:2012-12-04

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明涉及大岩桐植株再生方法,尤其涉及农杆菌介导转基因培养大岩桐植株的方法。农杆菌介导转基因培养大岩桐植株的方法,该方法采用大岩桐幼嫩叶片作为外植体,外植体预培后与去除培养物中残存的抗生素和细菌代谢物的农杆菌菌株EHA105菌液共培,脱菌,再经过抗性筛选后,直接分化获得转基因植株。本发明由于采用了上述的技术方案,借助农杆菌介导法,可以快速高效转化大岩桐,获得转化植株首次成功获得大岩桐转基因植株,取得了较好的成果。

    大麦胚乳特异性表达启动子pHvHGGT及其应用

    公开(公告)号:CN113151266B

    公开(公告)日:2022-08-09

    申请号:CN202110337174.7

    申请日:2021-03-30

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明涉及生物技术和植物基因工程技术领域。具体而言,本发明涉及一种大麦基因表达启动子及其应用,该启动子能够在大麦转基因调控体系中驱动目的基因在胚乳中特异性表达。本发明的大麦胚乳特异表达的启动子能在谷物胚乳中特异驱动目的基因的表达,可以避免该目的基因在植物其它组织中持续表达所带来的不利影响,实现外源基因在植物营养器官中表达的精准控制,尤其是驱动目的基因在作物籽粒胚乳中进行特异性的高效表达,这对大麦、水稻等粮食作物籽粒的品质改良和产量提高具有实践意义。

    一种青稞粉的储藏方法
    4.
    发明公开

    公开(公告)号:CN112790312A

    公开(公告)日:2021-05-14

    申请号:CN202110007877.3

    申请日:2021-01-05

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种青稞粉的储藏方法,包括如下步骤:S1:将负载了百里香精油的多孔淀粉微球置于无纺布袋中,封口后得到吸湿杀菌包;S2:将青稞粉和所述吸湿杀菌包置于包装袋中,封口后储藏。本发明将百里香精油负载在多孔淀粉微球中制成吸湿杀菌包置于青稞粉储藏时的包装袋内,多孔淀粉微球具有良好的吸湿和保水性能,可以在储藏过程中吸收包装袋内的水分,避免青稞粉受潮结块;同时,用多孔淀粉微球对百里香精油进行吸附和负载后,可以实现百里香精油的缓释,使吸湿杀菌包可以缓慢、长效的释放出百里香精油,从而利用百里香精油良好的杀菌性能防止微生物在青稞粉内的滋生,有效提高了青稞粉的储藏稳定性,延长了青稞粉的储藏时间。

    运用CRISPR‑Cas9系统敲除大麦VE合成通路中的关键基因HPT的方法

    公开(公告)号:CN106906240A

    公开(公告)日:2017-06-30

    申请号:CN201710194580.6

    申请日:2017-03-29

    Applicant: 浙江大学

    CPC classification number: C12N15/8213 A01H4/00 C12N9/1085 C12Y205/01

    Abstract: 本发明涉及大麦转基因材料的构建,旨在提供一种运用CRISPR‑Cas9系统敲除大麦VE合成通路中的关键基因HPT的方法。该方法包括下述步骤:gRNA靶位点的选择、gRNA片段的克隆、GG(gRNA‑gRNA)片段的连接、连接产物的PCR扩增、纯化产物和目标载体的酶切、纯化产物和目标载体的连接反应、连接产物转化大肠杆菌感受态、农杆菌介导的大麦转基因、阳性转基因植株的筛选、突变体测序。本发明利用先进的基因编辑技术‑CRISPR‑Cas9系统对大麦VE合成通路中的关键基因(HPT)进行靶向基因编辑,获得有效的功能缺失突变体,为大麦中生物活性物质的研究创造条件。

    大麦胚乳特异性表达启动子pHvHGGT及其应用

    公开(公告)号:CN113151266A

    公开(公告)日:2021-07-23

    申请号:CN202110337174.7

    申请日:2021-03-30

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明涉及生物技术和植物基因工程技术领域。具体而言,本发明涉及一种大麦基因表达启动子及其应用,该启动子能够在大麦转基因调控体系中驱动目的基因在胚乳中特异性表达。本发明的大麦胚乳特异表达的启动子能在谷物胚乳中特异驱动目的基因的表达,可以避免该目的基因在植物其它组织中持续表达所带来的不利影响,实现外源基因在植物营养器官中表达的精准控制,尤其是驱动目的基因在作物籽粒胚乳中进行特异性的高效表达,这对大麦、水稻等粮食作物籽粒的品质改良和产量提高具有实践意义。

    一种青稞纳豆加工方法
    7.
    发明公开

    公开(公告)号:CN109221926A

    公开(公告)日:2019-01-18

    申请号:CN201811324650.6

    申请日:2018-11-08

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明提供一种青稞纳豆加工方法,利用液体菌种接入大豆固体种,再接入青稞发酵体系,有效保留纳豆激酶活性,形成后的产品呈现出风味比较重,拉丝明显的现象,更加符合喜欢风味重的人群享用。本发明为固体发酵方法,可以大批量的生产,发酵工艺简便,更符合生产流程,具有良好的应用前景。

    大麦原生质体制备及PEG介导转化方法

    公开(公告)号:CN103352023A

    公开(公告)日:2013-10-16

    申请号:CN201310285210.5

    申请日:2013-07-08

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明涉及原生质体的培养技术,旨在提供一种大麦原生质体制备及PEG介导转化方法。该方法包括:大麦幼苗的培养、原生质体的制备,以及大麦原生质体的PEG介导转化过程,涉及酶液、W5试剂、PEG–Ca2+试剂、WI试剂的使用。与悬浮细胞体系相比,本发明以大麦幼苗为材料更加省时,省力。通过选取大麦幼苗的茎及叶片为材料,进行原生质体的的提取与转化,均能得到理想的转化效率,转化效率为70%-80 %。

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