公开(公告)号：CN105969798A

公开(公告)日：2016-09-28

申请号：CN201610290979.X

申请日：2016-05-04

Applicant: 浙江大学

Inventor： 殷学仁 ,  陈昆松 ,  谢秀兰 ,  刘晓芬

IPC: C12N15/84

CPC classification number: C12N15/8261

Abstract: 本发明提供一种柑橘果皮的基因瞬时表达方法，通过柑橘不同组织器官RNA的提取和cDNA的合成；通过将外源目的基因搭载到pGreen II 002962‑SK载体上电转到农杆菌GV3101::pSoup中，结合渗透液配方，以及独特的注射手法和严格的对照，分析柑橘果皮瞬时表达。本发明方法设计合理，操作方便简单，能快速将多年生果树柑橘的基因进行同源功能验证，可以为多年生果树的基因同源功能验证提供新思路和方法。本方法同样适用于其他果实的瞬时表达研究。

公开(公告)号：CN103931744A

公开(公告)日：2014-07-23

申请号：CN201410071101.8

申请日：2014-02-28

Applicant: 浙江大学

Inventor： 殷学仁 ,  谢秀兰 ,  陈明 ,  孙崇德 ,  徐昌杰 ,  陈昆松

IPC: A23B7/005

Abstract: 本发明提供一种降低采后柑橘果实有机酸含量的方法，先进行果实热空气处理，再进行果实品质指标测定，对热处理组和对比组果实的可滴定酸、有机酸、可溶性固形物、果实色泽、果实呼吸强度和失重率等指标进行跟踪检测。与对照相比，经热空气处理的椪柑果实，其CCI无显著变化，TSS含量升高，而有机酸含量及TA值降低，从而拥有更好的果实风味及商品性。本发明方法在保持果实原有品质的基础上、安全有效降低其有机酸含量，同时未影响果实的色泽、可溶性固形物等品质指标。本发明是降低柑橘果实有机酸含量的一整套完善体系，具有重要的应用价值。

公开(公告)号：CN106047890A

公开(公告)日：2016-10-26

申请号：CN201610410029.6

申请日：2016-06-12

Applicant: 浙江大学

Inventor： 陈昆松 ,  谢秀兰 ,  刘晓芬 ,  殷学仁

IPC: C12N15/29 ,  C12N15/84 ,  A01H5/08

CPC classification number: C07K14/415 ,  C12N15/8249

Abstract: 本发明提供一个调控柑橘果皮脱绿的关键乙烯响应因子CitERF6(SEQ：NO.1)，该基因含有一个保守的AP2/ERF结构域和Pat4(RKRK)核定位信号。在柑橘果实采后乙烯处理过程中，CitERF6的表达受外源乙烯诱导增强。CitERF6在柑橘果皮中瞬时过量表达时，可促进叶绿素的降解，加快果皮脱绿。本发明利用PCR、实时定量PCR、柑橘果实瞬时表达技术，克隆并鉴定出柑橘乙烯响应因子CitERF6可参与调控叶绿素降解，可应用到植物颜色修饰的基因工程育种中，尤其在调控柑橘果皮脱绿中的应用。为进一步研究其作用机制和果皮着色技术提供理论依据。

公开(公告)号：CN104774849A

公开(公告)日：2015-07-15

申请号：CN201510157171.X

申请日：2015-04-06

Applicant: 浙江大学

Inventor： 陈昆松 ,  谢秀兰 ,  殷学仁 ,  刘晓芬 ,  孙崇德 ,  徐昌杰

IPC: C12N15/29 ,  C12N15/10 ,  C12N15/82 ,  A01H5/08

Abstract: 本发明提供一个调控柑橘果皮脱绿的关键乙烯响应因子（ERF）CitERF13，该基因含有一个保守的AP2/ERF结构域和Pat4（RKRK）核定位信号。在柑橘果实发育过程中，CitERF13的表达高峰先于果皮叶绿素的降解，且受到外源乙烯的增强。CitERF13在柑橘果皮中瞬时过量表达时，可促进叶绿素的降解，加快果皮脱绿。本发明利用PCR、实时定量PCR、柑橘果实瞬时表达技术，克隆并鉴定出柑橘乙烯响应因子CitERF13可调控叶绿素降解，可应用到植物颜色修饰的基因工程育种中，尤其在调控柑橘果皮脱绿中的应用。