一种利用雾培和固相萃取技术高效收集纯化向日葵列当萌发刺激物的方法

    公开(公告)号:CN110583657B

    公开(公告)日:2020-07-24

    申请号:CN201910863755.7

    申请日:2019-09-12

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种利用雾培和固相萃取技术高效收集纯化向日葵列当萌发刺激物的方法,该方法包括:取向日葵种子,萌发后,将向日葵幼苗定植于雾培装置中,利用雾培体系培育向日葵幼苗;在雾培阶段,先采用含磷的雾培营养液培育向日葵幼苗,培育20~25天后,再更换为无磷的雾培营养液进行饥饿培养处理,饥饿培养处理的时间为5~7天;将雾培装置中的所有营养液通过固相萃取小柱,进行固相萃取,得到向日葵列当萌发刺激物。本发明先利用雾培体系技术快速培育化向日葵,再结合固相萃取技术分离、纯化向日葵根系分泌物中的向日葵列当萌发刺激物,得到的向日葵列当萌发刺激物不仅种类多,而且浓度和纯度高。

    一种快速检测芸薹属六倍体新种质倍性的方法

    公开(公告)号:CN106226137B

    公开(公告)日:2019-04-23

    申请号:CN201610648697.2

    申请日:2016-08-10

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种快速检测芸薹属六倍体新种质倍性的方法,包括:(1)从芸薹属新种质上取从心叶往外的第三片叶,装入含有钢珠的离心管中,向离心管中加入提取缓冲液,在‑20~‑10℃下静置5~20min后放入磨样机中进行磨样;(2)将磨碎后的叶片用滤网过滤得滤液,在滤液中加入RNAse溶液,在37℃中孵化20~30min;(3)在孵化后的滤液中加入染色液避光染色得单细胞悬浮液样品;(4)用流式细胞仪对单细胞悬浮液样品进行检测。本发明采用磨样机对叶片组织进行研磨,产生的单细胞悬浮液中单细胞数量较多,很少产生破碎细胞,同时检测效率高,适合大批量检测。

    一种发根农杆菌介导的向日葵瞬时转化体系及其构建方法

    公开(公告)号:CN119592616A

    公开(公告)日:2025-03-11

    申请号:CN202411836197.2

    申请日:2024-12-13

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明涉及植物基因工程技术领域,提供了一种发根农杆菌介导的向日葵瞬时转化体系及其构建方法,无需无菌条件和组织培养,通过将待转基因载体转入发根农杆菌,培养并筛选阳性菌株,制备浸染液;剪取向日葵的茎段,在切口附近进行扎孔处理;将茎段浸入浸染液中一段时间;取出后插入拌有列当的灭菌蛭石土中生根,即可获得瞬时转化的向日葵植株;该方法操作简便,周期短,能有效提高HaCERK1基因的表达水平,增强向日葵对列当侵染的抗性,缩短基因功能研究周期。

    一种快速筛选寄生杂草敏感性除草剂的方法

    公开(公告)号:CN104285535B

    公开(公告)日:2016-02-24

    申请号:CN201410446915.5

    申请日:2014-09-04

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种快速筛选寄生杂草敏感性除草剂的方法,包括:取寄生杂草的种子,经表面消毒后漂洗、晾干;将种子接种至含有待筛选除草剂的吸湿基质上,于密闭、黑暗条件下进行预培养;将种子转移至含有种子萌发刺激物的吸湿基质上,于密闭、黑暗条件下进行发芽试验;计算种子发芽率,筛选出所述寄生杂草敏感性除草剂。将除草剂直接使用于寄生杂草种子的预培养阶段,模拟了除草剂的田间施用和作用过程;用种子萌发刺激物GR24代替寄主根系分泌物,既消除了因萌发刺激物种类和含量差异而导致的假阳性结果,也使种子能在实验室条件下萌发。仅需2周便可快速地明确除草剂对种子萌发的控制效果;数据确实可靠,为除草剂的田间使用提供参考。

    一种快速筛选寄生杂草敏感性除草剂的方法

    公开(公告)号:CN104285535A

    公开(公告)日:2015-01-21

    申请号:CN201410446915.5

    申请日:2014-09-04

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种快速筛选寄生杂草敏感性除草剂的方法,包括:取寄生杂草的种子,经表面消毒后漂洗、晾干;将种子接种至含有待筛选除草剂的吸湿基质上,于密闭、黑暗条件下进行预培养;将种子转移至含有种子萌发刺激物的吸湿基质上,于密闭、黑暗条件下进行发芽试验;计算种子发芽率,筛选出所述寄生杂草敏感性除草剂。将除草剂直接使用于寄生杂草种子的预培养阶段,模拟了除草剂的田间施用和作用过程;用种子萌发刺激物GR24代替寄主根系分泌物,既消除了因萌发刺激物种类和含量差异而导致的假阳性结果,也使种子能在实验室条件下萌发。仅需2周便可快速地明确除草剂对种子萌发的控制效果;数据确实可靠,为除草剂的田间使用提供参考。

    一种蔺草的离体组织培养方法

    公开(公告)号:CN101569288A

    公开(公告)日:2009-11-04

    申请号:CN200910099340.3

    申请日:2009-06-08

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种蔺草的离体组织培养方法,包括:取无菌外植体,接种在愈伤培养基中诱导出愈伤组织,在于愈伤扩繁培养基中扩繁,先将扩繁得到的愈伤组织接种在分化培养基I的培养基中,然后转移到分化培养基II中再生,将再生植株转移到再生扩繁培养基中扩繁,扩繁后转移到1/2MS生根培养基诱导生根。本发明蔺草的离体组织培养方法,采用二步法对培养基进行更新,以及合适剂量的激素,如合适剂量的BA、生长素(IAA)和细胞分裂素(BA+KT),实现了蔺草离体组织培养中植株的高效再生,该方法操作简单、易于控制植株再生成功率高,为蔺草品种改良和生物技术育种奠定了良好的基础。

    一种蔺草种子的消毒方法

    公开(公告)号:CN101569256A

    公开(公告)日:2009-11-04

    申请号:CN200910099339.0

    申请日:2009-06-08

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种蔺草种子的消毒方法,包括以下步骤:(1)将蔺草种子用0.6~0.65g/L的高锰酸钾水溶液处理70~75小时,用无菌水冲洗干净;(2)用重量百分比浓度为70~75%的酒精处理55~65分钟,用无菌水冲洗干净;(3)用19~21g/L的漂白粉精片水溶液或重量百分比浓度1~2%的次氯酸钠水溶液处理3~5分钟,用无菌水冲洗干净;(4)用重量百分比浓度为0.1~0.15%的升汞水溶液处理7~9分钟,用无菌水冲洗干净。本发明消毒方法操作简单、消毒彻底,去污力最高可达90%,而且经消毒后的种子萌发率高达80%以上,有力地保证了后续组织培养的成功率,且成本低,适于工业化生产。

    雪菜单倍体育种方法
    10.
    发明公开

    公开(公告)号:CN101473789A

    公开(公告)日:2009-07-08

    申请号:CN200910095622.6

    申请日:2009-01-13

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种雪菜单倍体育种方法,包括以下步骤:取雪菜主茎或大分枝上的花序,低温诱导后取花序上单核晚期至双核早期的花蕾进行灭菌;将灭菌后的花蕾放入NLN-13培养液中,捣碎、过滤,离心后得到小孢子悬浮液;将小孢子悬浮液热击处理后再进行常温黑暗培养得到子叶期胚状体;收集子叶期胚状体,转移至固体分化培养基后进行分化培养,生根、炼苗后移栽到营养土中,得到单倍体植株;将单倍体植株的根系用秋水仙碱加倍处理,得到双单倍体植株。本发明方法在胚状体诱导过程当中,对花蕾进行了低温诱导,对小孢子进行热击处理,提高了胚状体发生频率和胚成活率,其胚成活率高达95%以上。

Patent Agency Ranking