公开(公告)号：CN106226137B

公开(公告)日：2019-04-23

申请号：CN201610648697.2

申请日：2016-08-10

Applicant: 浙江大学

Inventor： 杨素 ,  周伟军 ,  张康妮 ,  许玲 ,  王尖 ,  葛常青 ,  徐建祥

IPC: G01N1/28 ,  G01N15/14

Abstract: 本发明公开了一种快速检测芸薹属六倍体新种质倍性的方法，包括：(1)从芸薹属新种质上取从心叶往外的第三片叶，装入含有钢珠的离心管中，向离心管中加入提取缓冲液，在‑20～‑10℃下静置5～20min后放入磨样机中进行磨样；(2)将磨碎后的叶片用滤网过滤得滤液，在滤液中加入RNAse溶液，在37℃中孵化20～30min；(3)在孵化后的滤液中加入染色液避光染色得单细胞悬浮液样品；(4)用流式细胞仪对单细胞悬浮液样品进行检测。本发明采用磨样机对叶片组织进行研磨，产生的单细胞悬浮液中单细胞数量较多，很少产生破碎细胞，同时检测效率高，适合大批量检测。

公开(公告)号：CN104059971B

公开(公告)日：2015-09-16

申请号：CN201410258363.5

申请日：2014-06-11

Applicant: 浙江大学

Inventor： 杨素 ,  周伟军 ,  耿鑫鑫 ,  李兰 ,  崔鹏 ,  臧丽丽

IPC: C12Q1/68 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种芸薹属异源六倍体的SSR分子标记方法及其引物。芸薹属异源六倍体的SSR分子标记方法包括：取芸薹属异源六倍体亲本进行杂交，对获得的子代进行小孢子培养，获得DH群体；提取芸薹属异源六倍体亲本及DH群体的基因组DNA，以各基因组DNA为模板，利用引物进行PCR扩增；根据PCR扩增结果构建芸薹属异源六倍体的遗传图谱；所述引物包括217对，其碱基序列分别如SEQ ID No.1/2～433/434所示本发明构建了第一个芸薹属异源六倍体的遗传图谱，为进一步进行QTL定位以及分子标记辅助育种提供依据。

公开(公告)号：CN104059971A

公开(公告)日：2014-09-24

申请号：CN201410258363.5

申请日：2014-06-11

Applicant: 浙江大学

Inventor： 杨素 ,  周伟军 ,  耿鑫鑫 ,  李兰 ,  崔鹏 ,  臧丽丽

IPC: C12Q1/68 ,  C12N15/11

CPC classification number: C12Q1/6858 ,  C12Q2531/113 ,  C12Q2565/125

Abstract: 本发明公开了一种芸薹属异源六倍体的SSR分子标记方法及其引物。芸薹属异源六倍体的SSR分子标记方法包括：取芸薹属异源六倍体亲本进行杂交，对获得的子代进行小孢子培养，获得DH群体；提取芸薹属异源六倍体亲本及DH群体的基因组DNA，以各基因组DNA为模板，利用引物进行PCR扩增；根据PCR扩增结果构建芸薹属异源六倍体的遗传图谱；所述引物包括217对，其碱基序列分别如SEQ ID No.1/2～433/434所示本发明构建了第一个芸薹属异源六倍体的遗传图谱，为进一步进行QTL定位以及分子标记辅助育种提供依据。

公开(公告)号：CN106226137A

公开(公告)日：2016-12-14

申请号：CN201610648697.2

申请日：2016-08-10

Applicant: 浙江大学

Inventor： 杨素 ,  周伟军 ,  张康妮 ,  许玲 ,  王尖 ,  葛常青 ,  徐建祥

IPC: G01N1/28 ,  G01N15/14

CPC classification number: G01N1/28 ,  G01N15/14

Abstract: 本发明公开了一种快速检测芸薹属六倍体新种质倍性的方法，包括：(1)从芸薹属新种质上取从心叶往外的第三片叶，装入含有钢珠的离心管中，向离心管中加入提取缓冲液，在-20～-10℃下静置5～20min后放入磨样机中进行磨样；中加入RNAse溶液，在37℃中孵化20～30min；(3)在孵化后的滤液中加入染色液避光染色得单细胞悬浮液样品；(4)用流式细胞仪对单细胞悬浮液样品进行检测。本发明采用磨样机对叶片组织进行研磨，产生的单细胞悬浮液中单细胞数量较多，很少产生破碎细胞，同时检测效率高，适合大批量检测。(2)将磨碎后的叶片用滤网过滤得滤液，在滤液