表达大肠杆菌毒素蛋白mazF基因的表达盒mazF-cassette及其构建法和用途

    公开(公告)号:CN102311970A

    公开(公告)日:2012-01-11

    申请号:CN201110223046.6

    申请日:2011-08-05

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了表达大肠杆菌毒素蛋白mazF基因的表达盒mazF-cassette,其核苷酸序列为SEQ ID NO:1。本发明还公开了该表达盒mazF-cassette的构建方法,包括以下步骤:1)扩增大肠杆菌毒素蛋白mazF基因;2)扩增木糖诱导的启动子PxylA基因;3)扩增抗性基因zeocin;4)将上述三个PCR片段融合成重组PCR片段;5)将重组PCR片段,用限制性内切酶Sal I/Xba I进行酶切,与同样酶切的整合载体pSG1729相连,转化枯草芽孢杆菌1A751,所得转化子为含有该表达盒的宿主菌。该表达盒mazF-cassette能用于构建枯草杆菌通用无标记同源重组系统。

    表达大肠杆菌毒素蛋白mazF基因的表达盒mazF-cassette及其构建法和用途

    公开(公告)号:CN102311970B

    公开(公告)日:2014-06-18

    申请号:CN201110223046.6

    申请日:2011-08-05

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了表达大肠杆菌毒素蛋白mazF基因的表达盒mazF-cassette,其核苷酸序列为SEQ?ID?NO:1。本发明还公开了该表达盒mazF-cassette的构建方法,包括以下步骤:1)扩增大肠杆菌毒素蛋白mazF基因;2)扩增木糖诱导的启动子PxylA基因;3)扩增抗性基因zeocin;4)将上述三个PCR片段融合成重组PCR片段;5)将重组PCR片段,用限制性内切酶Sal?I/Xba?I进行酶切,与同样酶切的整合载体pSG1729相连,转化枯草芽孢杆菌1A751,所得转化子为含有该表达盒的宿主菌。该表达盒mazF-cassette能用于构建枯草杆菌通用无标记同源重组系统。

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