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公开(公告)号：CN101948798A
公开(公告)日：2011-01-19
申请号：CN201010273878.4
申请日：2010-09-07
Applicant: 浙江大学
IPC: C12N5/0735
Abstract: 本发明提供了一种源于产前诊断羊水培养物废弃上清的羊水间充质干细胞的分离纯化方法。所述细胞经过特定培养基下经过极低密度种植而成的成纤维样羊水间充质干细胞，该细胞具有多向分化能力，与成体细胞相比还具有良好的扩增能力，可传代至15以上而保持原来的特性。本发明的有益效果主要体现在：(1)本发明的原料获取方便、不存在伦理问题，具备极强的使用价值；(2)本发明所获得细胞具有良好的扩增能力，可传至15代而保持特性，并具有多向分化能力；(3)本发明所获得细胞获得方法简单、效率高、无需流式，磁珠等分离纯化方法，大大降低了获得高纯度人羊水干细胞的成本；(4)本发明细胞适合于胎儿组织工程、细胞治疗、药物筛选和作为组织工程的种子细胞。
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公开(公告)号：CN101948798B
公开(公告)日：2012-10-03
申请号：CN201010273878.4
申请日：2010-09-07
Applicant: 浙江大学
IPC: C12N5/0775
Abstract: 本发明提供了一种源于产前诊断羊水培养物废弃上清的羊水间充质干细胞的分离纯化方法。所述细胞经过特定培养基下经过极低密度种植而成的成纤维样羊水间充质干细胞，该细胞具有多向分化能力，与成体细胞相比还具有良好的扩增能力，可传代至15以上而保持原来的特性。本发明的有益效果主要体现在：(1)本发明的原料获取方便、不存在伦理问题，具备极强的使用价值；(2)本发明所获得细胞具有良好的扩增能力，可传至15代而保持特性，并具有多向分化能力；(3)本发明所获得细胞获得方法简单、效率高、无需流式，磁珠等分离纯化方法，大大降低了获得高纯度人羊水干细胞的成本；(4)本发明细胞适合于胎儿组织工程、细胞治疗、药物筛选和作为组织工程的种子细胞。
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公开(公告)号：CN100457902C
公开(公告)日：2009-02-04
申请号：CN200610052319.4
申请日：2006-07-05
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明提供了一种制备单个卵裂球染色体的方法，所述的方法如下：将正常的原核期受精卵去除卵丘、进行去核操作，获取胞质体，另选取经活检的单个人卵裂球，将所述卵裂球与胞质体进行电融合，得到异核体，将所得异核体诱导早熟染色体凝集形成，再将诱导后的异核体进行低渗，然后对异核体进行固定和染色，即可得到所述的单个卵裂球染色体。本发明方法通过对电融合掖、染色体诱导液、低渗液，以及固定步骤的进一步改进和完善，获得了效率高、质量好的单个卵裂球染色体的制备方法，制得染色体形态清晰、质量高，结合G-显带或全染色体涂抹探针的FISH技术，可克服现有间期核FISH技术存在的不足，使PGD的诊断范围扩大至整个染色体组。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN1803100A
公开(公告)日：2006-07-19
申请号：CN200510061871.5
申请日：2005-12-07
Applicant: 浙江大学
IPC: A61B17/425 , A61B19/00 , A01N1/02 , A61K35/12
Abstract: 本发明提供睾丸精子的冻存与复苏方法，以胞浆抽空的透明带为载体，将活检的睾丸精子装入封闭的透明带内，进行精子冷冻保护剂的添加和洗脱，冻存复苏过程中精子封闭保存于透明带内，极少造成精子的丢失，其精子回收率可高达70％，远高于常规冻存法。采用本发明透明带精子复苏不必经过繁锁的不连续密度梯度分离及洗涤离心过程，可直接在显微操作仪下吸出精子，直接用于ICSI，效率明显提高。本发明设计合理，解决了目前精子冻存技术中出现严重少弱精子，睾丸精子冻存后精子回收容易失败的难题，使无精子症患者接受辅助生育治疗的灵活性大大提高。
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公开(公告)号：CN1800371A
公开(公告)日：2006-07-12
申请号：CN200510062111.6
申请日：2005-12-19
Applicant: 浙江大学
IPC: C12N5/08
Abstract: 本发明公开了一种人体未成熟卵体外成熟培养方法，未成熟卵是指卵巢刺激周期卵丘冠颗粒细胞剥除的未成熟卵，该方法包括配置和预温标准的人类体外成熟培养液，在所述人类体外成熟培养液中按照9∶1的体积比加入自体成熟卵泡液制成培养液A，将第一次减数分裂中期的未成熟卵置于所述培养液A的微滴中进行培养；在所述培养液A中加入分离、纯化的自体卵丘冠颗粒细胞沉淀，悬浮成自体卵丘冠颗粒细胞密度在1～5×105/ml的培养液B，将第一次减数分裂前期的未成熟卵置于所述培养液B的微滴中进行培养。本发明的人体未成熟卵体外成熟培养方法，培养成熟率、且能提高成熟卵其后发育能力。
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公开(公告)号：CN1884522A
公开(公告)日：2006-12-27
申请号：CN200610052319.4
申请日：2006-07-05
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明提供了一种制备单个卵裂球染色体的方法，所述的方法如下：将正常的原核期受精卵去除卵丘、进行去核操作，获取胞质体，另选取经活检的单个人卵裂球，将所述卵裂球与胞质体进行电融合，得到异核体，将所得异核体诱导早熟染色体凝集形成，再将诱导后的异核体进行低渗，然后对异核体进行固定和染色，即可得到所述的单个卵裂球染色体。本发明方法通过对电融合掖、染色体诱导液、低渗液，以及固定步骤的进一步改进和完善，获得了效率高、质量好的单个卵裂球染色体的制备方法，制得染色体形态清晰、质量高，结合G－显带或全染色体涂抹探针的FISH技术，可克服现有间期核FISH技术存在的不足，使PGD的诊断范围扩大至整个染色体组。
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公开(公告)号：CN104593414B
公开(公告)日：2017-05-17
申请号：CN201510006204.0
申请日：2015-01-06
Applicant: 浙江大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/89 , A01K67/027
Abstract: 本发明公开了一种人表皮松解性掌跖角化症小鼠模型的构建方法，将小鼠Krt9基因第434位核苷酸的A突变为GGCT，构建SEQ ID NO:1所示含有重组Krt9基因的打靶质粒载体，筛选携带有重组Krt9基因的小鼠，即为所述人表皮松解性掌跖角化症小鼠模型；本发明利用基因打靶技术产生，筛选到了国际上首个Krt9基因敲入突变的小鼠品系，即Krt9‑indel小鼠，发现模型小鼠的表型与人EPPK完全一致，从而得到一个从基因到表型完全模仿人EPPK的特异动物模型，可进一步广泛用于人EPPK的致病病因、病理机制等研究，以及对EPPK治疗药物的筛选和基因治疗试验等。
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公开(公告)号：CN104593414A
公开(公告)日：2015-05-06
申请号：CN201510006204.0
申请日：2015-01-06
Applicant: 浙江大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/89 , A01K67/027
Abstract: 本发明公开了一种人表皮松解性掌跖角化症小鼠模型的构建方法，将小鼠Krt9基因第434位核苷酸的A突变为GGCT，构建SEQ ID NO:1所示含有重组Krt9基因的打靶质粒载体，筛选携带有重组Krt9基因的小鼠，即为所述人表皮松解性掌跖角化症小鼠模型；本发明利用基因打靶技术产生，筛选到了国际上首个Krt9基因敲入突变的小鼠品系，即Krt9-indel小鼠，发现模型小鼠的表型与人EPPK完全一致，从而得到一个从基因到表型完全模仿人EPPK的特异动物模型，可进一步广泛用于人EPPK的致病病因、病理机制等研究，以及对EPPK治疗药物的筛选和基因治疗试验等。
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