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公开(公告)号：CN113637633A
公开(公告)日：2021-11-12
申请号：CN202110935409.2
申请日：2021-08-16
Applicant: 浙江大学 , 海南迪森生物科技有限责任公司
IPC: C12N5/077 , C12N5/10 , C12N15/867
Abstract: 本发明提供一种促进间充质干细胞向成骨细胞分化的方法，所述方法为：构建ALX1基因的表达载体，并将所述ALX1基因的表达载体转入所述间充质干细胞中，得到高效表达外源ALX1的间充质干细胞；取所述的高效表达外源ALX1的间充质干细胞用成骨细胞诱导液进行定向诱导培养，得到所述成骨细胞。本发明技术构建的外源性表达ALX1的间充质干细胞在成骨细胞诱导分化体系中，省去了培养体系中对外加细胞因子或特殊设备的需要，降低了间充质干细胞定向诱导分化成骨细胞的培养成本。
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公开(公告)号：CN101948798B
公开(公告)日：2012-10-03
申请号：CN201010273878.4
申请日：2010-09-07
Applicant: 浙江大学
IPC: C12N5/0775
Abstract: 本发明提供了一种源于产前诊断羊水培养物废弃上清的羊水间充质干细胞的分离纯化方法。所述细胞经过特定培养基下经过极低密度种植而成的成纤维样羊水间充质干细胞，该细胞具有多向分化能力，与成体细胞相比还具有良好的扩增能力，可传代至15以上而保持原来的特性。本发明的有益效果主要体现在：(1)本发明的原料获取方便、不存在伦理问题，具备极强的使用价值；(2)本发明所获得细胞具有良好的扩增能力，可传至15代而保持特性，并具有多向分化能力；(3)本发明所获得细胞获得方法简单、效率高、无需流式，磁珠等分离纯化方法，大大降低了获得高纯度人羊水干细胞的成本；(4)本发明细胞适合于胎儿组织工程、细胞治疗、药物筛选和作为组织工程的种子细胞。
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公开(公告)号：CN101531996B
公开(公告)日：2011-06-29
申请号：CN200910097099.0
申请日：2009-04-01
Applicant: 浙江大学
IPC: C12N5/0775
Abstract: 本发明提供了一种源于成形组织的间充质干细胞的分离和纯化方法，本方法依据成形组织中不同种类细胞的贴附能力差异，进行分时间段贴壁筛选，通过不同时间段贴附细胞的间充质干细胞特异表面抗原检定后，筛选最佳贴壁时间段的贴附细胞，并收集和悬浮细胞后，进行细胞集落形成的克隆培养，获得纯化的成形组织间充质干细胞。本发明的有益效果是：(1)本发明方法可达到比较好的分选效果；(2)对最佳贴壁时间段分选的细胞采用单个细胞克隆方法进一步提高了成形组织间充质干细胞的纯化效率；(3)经最佳贴壁时间段分选的成形组织间充质干细胞具有较高的增殖潜能；(4)经最佳贴壁时间段分选的成形组织间充质干细胞具有显著的多分化潜能。
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公开(公告)号：CN101069747A
公开(公告)日：2007-11-14
申请号：CN200710068261.7
申请日：2007-04-28
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明提供一种建立大鼠乙酸胃溃疡疾病复发模型的方法，建立大鼠乙酸胃溃疡及溃疡自然愈合模型，并用阿司匹林诱导已自然愈合的溃疡复发，通过测定大鼠溃疡复发过程中的生理生化指标变化，证实胃溃疡的复发模型的建立。本发明用阿司匹林及其灌胃方法进行诱导，更真实地模拟了临床口服非甾体抗炎性药物引起的胃溃疡复发过程，由此建立的胃溃疡复发动物模型不但可应用于临床消化性溃疡复发机理的研究，还可针对性地用于筛选临床治疗消化性溃疡药物和抗溃疡复发药物。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN1243094C
公开(公告)日：2006-02-22
申请号：CN200310108256.6
申请日：2003-10-28
Applicant: 浙江大学 , 杭州大力神医疗器械有限公司
Inventor： 王金福
Abstract: 本发明提供一种脐血间充质干细胞支持造血干/祖细胞体外扩增方法，是从脐血中培养出脐血间充质干细胞，并作为培养体系中的支持细胞，在结合外源生长因子的培养体系中体外扩增造血干/祖细胞，达到进一步提高造血干/祖细胞体外扩增效率的目的。采用脐血间充质干细胞共培养的方法有效地提高造血干/祖细胞体外扩增倍数，并保持了其扩增后的质量，扩增出的细胞具有更多的GEMM-CFC形成潜能。本发明的扩增方法具有明显的扩增优势。
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公开(公告)号：CN101063150B
公开(公告)日：2010-05-26
申请号：CN200710068218.0
申请日：2007-04-24
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明提供一种人端粒酶基因转导骨髓间充质干细胞的方法：将pGRN 145质粒用Hpa I和Not I限制性内切酶酶切，得到hTERT cDNA片段，并与采用相同限制性内切酶酶切的pLXSN载体相连，构建pLXSN-hTERT重组表达载体；用LipofectAMINE脂质体转导试剂盒通过兼噬性包装细胞系PA317制备pLXSN-hTERT重组表达载体悬浮液后，对人骨髓间充质干细胞进行转导，构建高效表达外源hTERT基因的人骨髓间充质干细胞；用低浓度的潮霉素进行双重筛选人骨髓间充质干细胞。本发明对人骨髓间充质干细胞转导人端粒酶基因，提高细胞中这种蛋白的表达水平，达到提高骨髓间充质干细胞的生命周期的目的。
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公开(公告)号：CN100400666C
公开(公告)日：2008-07-09
申请号：CN200510050552.4
申请日：2005-07-04
Applicant: 浙江大学 , 杭州大力神医疗器械有限公司
Abstract: 本发明提供TPO/FL基因转导骨髓间充质干细胞的方法：(1)从人胎肝分离TPO和FL的mRNA，通过RT-PCR技术合成两种cDNA并克隆到pBluescript载体上，构建FL-IRES-TPO重组片段，再将重组片段转移到反转录病毒载体pLXIN上，构建成pfl30表达载体；(2)对人骨髓间充质干细胞进行pfl30表达载体转导，构建高效表达外源TPO和FL的人骨髓间充质干细胞。本发明达到了一次性基因转导而获得人骨髓间充质干细胞同时高效表达TPO和FL两种外源性基因的效果；本发明方法构建的外源性表达TPO和FL的人骨髓间充质干细胞在组成造血干/祖细胞体外扩增培养体系中，降低了造血干/祖细胞体外扩增培养的成本，并同时有效提高了造血干细胞的体外自我更新、扩增和分化能力。
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公开(公告)号：CN104293926B
公开(公告)日：2016-02-24
申请号：CN201410495359.0
申请日：2014-09-24
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种检测小鼠内耳祖细胞的标记分子，所述的标记分子为Npr3、Ucma和Ogn；本发明提供的细胞标记分子在小鼠内耳祖细胞中是特异性表达的，来自小鼠耳蜗基底膜，通过Phalanx小鼠基因表达谱的检测，表明Npr3、Ucma和Ogn三种基因具有显著的高水平表达，所述细胞标记分子可应用于小鼠内耳祖细胞的鉴定及小鼠内耳祖细胞的分选和纯化依据，可应用于内耳干细胞诱导产生的内耳祖细胞分选以及纯化研究。
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公开(公告)号：CN101892195A
公开(公告)日：2010-11-24
申请号：CN200910154617.8
申请日：2009-11-19
Applicant: 浙江大学
IPC: C12N5/077
Abstract: 本发明提供了一种提高模拟微重力环境下骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化能力的培养方法，所述方法包括：将稳定传代的骨髓间充质干细胞接种至直径90～150μm的塑料微载体上，血清饥饿10～15小时后，用预处理培养液预处理1～3小时，然后在模拟微重力环境下用成骨诱导液进行诱导培养14～28天；本发明预处理培养液和成骨诱导液中添加20μmol/L去甲基化药物5-氮-2-脱氧胞苷，并将调节预处理培养液和成骨诱导液中的BMP-2浓度提高到250ng/mL，有效地达到了在模拟微重力环境下增强骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化能力和降低向脂肪细胞分化能力的双重目的。
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