一种用于检测西瓜细菌性果斑病菌的引物对及其应用

    公开(公告)号:CN113151524B

    公开(公告)日:2022-04-26

    申请号:CN202110544981.6

    申请日:2021-05-19

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种用于检测西瓜细菌性果斑病菌(Acidovorax citrulli)的引物对及其应用,属于生物技术领域。所述引物对包括上游引物和下游引物,其核苷酸序列分别为:5’‑TTCACCGACTACACCAGTGC‑3’;5’‑CATCAGTTCGTAGTGGCGGT‑3’。本发明提供的引物对特异性好且灵敏度高,能够特异性扩增出西瓜细菌性果斑病菌特有的基因片段,利用该引物对实现对西瓜细菌性果斑病菌的准确鉴定,对西瓜细菌性果斑病菌DNA的最低检测浓度达到40pg/μL。利用本发明提供的检测方法可以快速准确鉴定西瓜样品中的西瓜细菌性果斑病菌,具有重要的应用价值。

    一种伯克氏菌重组菌株及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN110846265A

    公开(公告)日:2020-02-28

    申请号:CN201910912291.4

    申请日:2019-09-25

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种伯克氏菌重组菌株,将伯克氏菌CCTCC NO:M2010207中序列如SEQ ID No:1所示的目的基因片段敲除或失活得到。本发明还公开了上述伯克氏菌重组菌株的构建方法,包括:将pJP5603质粒与目的基因片段进行双酶切,得到的酶切产物用DNA连接酶连接,得到重组质粒,再将重组质粒转入伯克氏菌中,得到伯克氏菌重组菌株。本发明构建菌株的方法较简单,制得的菌株生命力强、繁殖迅速、适应性强,且能高产杀菌活性物质cFP的。本发明还公开了上述伯克氏菌重组菌株在在生产抗小麦赤霉病菌活性化合物cFP和防治小麦赤霉病中的应用,其在农业、药品生产领域和生物工程领域中具有很好的推广前景。

    一种用于检测水稻细菌性穗枯病菌的引物探针组合及应用

    公开(公告)号:CN113186314A

    公开(公告)日:2021-07-30

    申请号:CN202110544983.5

    申请日:2021-05-19

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种用于检测水稻细菌性穗枯病菌的引物探针组合及应用,属于分子生物学检测技术领域。所述引物包括上游引物和下游引物,其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2所示;所述探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示,所述探针修饰有荧光标记。本发明设计和筛选针对水稻细菌性穗枯病菌特异性的引物和探针,具有良好的特异性,灵敏度高。本发明通过对引物和探针以及反应体系和反应条件的优化,建立了可对水稻细菌性穗枯病菌实现准确定量的数字PCR检测方法,可应用于市售田间水稻种子的检测,尤其是针对带菌量低的水稻种子样品,该方法可以实现高效的绝对定量检测,具有重要的应用价值。

    一种用于检测西瓜细菌性果斑病菌的引物对及其应用

    公开(公告)号:CN113151524A

    公开(公告)日:2021-07-23

    申请号:CN202110544981.6

    申请日:2021-05-19

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种用于检测西瓜细菌性果斑病菌(Acidovorax citrulli)的引物对及其应用,属于生物技术领域。所述引物对包括上游引物和下游引物,其核苷酸序列分别为:5’‑TTCACCGACTACACCAGTGC‑3’;5’‑CATCAGTTCGTAGTGGCGGT‑3’。本发明提供的引物对特异性好且灵敏度高,能够特异性扩增出西瓜细菌性果斑病菌特有的基因片段,利用该引物对实现对西瓜细菌性果斑病菌的准确鉴定,对西瓜细菌性果斑病菌DNA的最低检测浓度达到40pg/μL。利用本发明提供的检测方法可以快速准确鉴定西瓜样品中的西瓜细菌性果斑病菌,具有重要的应用价值。

    一种伯克氏菌重组菌株及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN110846265B

    公开(公告)日:2021-01-26

    申请号:CN201910912291.4

    申请日:2019-09-25

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种伯克氏菌重组菌株,将伯克氏菌CCTCC NO:M2010207中序列如SEQ ID No:1所示的目的基因片段敲除或失活得到。本发明还公开了上述伯克氏菌重组菌株的构建方法,包括:将pJP5603质粒与目的基因片段进行双酶切,得到的酶切产物用DNA连接酶连接,得到重组质粒,再将重组质粒转入伯克氏菌中,得到伯克氏菌重组菌株。本发明构建菌株的方法较简单,制得的菌株生命力强、繁殖迅速、适应性强,且能高产杀菌活性物质cFP的。本发明还公开了上述伯克氏菌重组菌株在在生产抗小麦赤霉病菌活性化合物cFP和防治小麦赤霉病中的应用,其在农业、药品生产领域和生物工程领域中具有很好的推广前景。

    一种从伯克氏菌无细胞上清液中提取天然化合物的方法以及在防治小麦赤霉病中的应用

    公开(公告)号:CN110283176A

    公开(公告)日:2019-09-27

    申请号:CN201910486777.6

    申请日:2019-06-05

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种从伯克氏菌无细胞上清液中提取天然化合物的方法,包括:1)于LB液体培养基中培养伯克氏菌R456,收集细菌悬浮液,离心收集上清液,得到无细胞上清液;2)用乙酸乙酯溶液萃取无细胞上清液,得到乙酸乙酯提取液,再经过处理得到固体物质;3)用乙酸乙酯溶液溶解固体物质,得到的溶液经过处理后,利用制备型液相色谱仪分离得到如下式所示的活性天然化合物。本发明还公开了上述伯克氏菌R456和天然化合物在防治小麦赤霉病中的应用。本发明制得的天然活性化合物结构稳定、纯度较高、具有良好的杀菌活性,可作为一种新的防治药剂用于防治小麦赤霉病,在农业生产领域中具有良好的推广前景。

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