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公开(公告)号:CN102534034A
公开(公告)日:2012-07-04
申请号:CN201210038646.X
申请日:2012-02-20
Applicant: 浙江大学 , 武汉凯迪工程技术研究总院有限公司
Abstract: 本发明涉及微生物技术,旨在提供用于鉴定ACC脱氨酶结构基因的引物及方法。该引物包括正向引物acdSf3、反向引物acdSr3和acdSr4。鉴定和筛选微生物是否具有ACC脱氨酶结构基因和ACC脱氨酶的方法,是将acdSf3/acdSr3或acdSf3/acdSr4中的至少一个引物对用于聚合酶链式反应,从微生物或其核酸样品中扩增ACC脱氨酶结构基因的部分序列,并根据扩增结果进行判断。本发明能从大量属于α-变形杆菌纲的根瘤菌中快速筛选出有acdS的菌株,比已有的其它研究设计的引物在广谱性和特异性上都要强,扩增效率也更高。也能用于筛选有ACC脱氨酶的细菌,能快速从大量根瘤菌中筛选出能高效结瘤的菌株。
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公开(公告)号:CN102323259A
公开(公告)日:2012-01-18
申请号:CN201110164931.1
申请日:2011-06-19
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明属于分析化学领域,旨在提供一种将烟囱顶96孔PCR板用于批量测定氨基酸含量的方法。该方法是通过茚三酮比色法测定样品溶液中的氨基酸含量,在测定过程中使用聚丙烯材质的烟囱顶96孔PCR板上的各小管作为盛装样品溶液和茚三酮试剂的容器,用镂空的乙烯乙酸乙烯酯塑料垫架着PCR板浮在沸水中加热进行茚三酮反应。本发明比常规茚三酮比色法操作更简便,节省了人力、时间及试剂的用量,可广泛应用于批量检测食品、饮品、调味品和保健品中氨基酸的含量。同时,本发明将分子生物学研究和诊断中用来批量扩增核酸的烟囱顶PCR板用于分析化学的茚三酮比色测定,为烟囱顶PCR板提供了一种全新的用途。
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公开(公告)号:CN113151524B
公开(公告)日:2022-04-26
申请号:CN202110544981.6
申请日:2021-05-19
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种用于检测西瓜细菌性果斑病菌(Acidovorax citrulli)的引物对及其应用,属于生物技术领域。所述引物对包括上游引物和下游引物,其核苷酸序列分别为:5’‑TTCACCGACTACACCAGTGC‑3’;5’‑CATCAGTTCGTAGTGGCGGT‑3’。本发明提供的引物对特异性好且灵敏度高,能够特异性扩增出西瓜细菌性果斑病菌特有的基因片段,利用该引物对实现对西瓜细菌性果斑病菌的准确鉴定,对西瓜细菌性果斑病菌DNA的最低检测浓度达到40pg/μL。利用本发明提供的检测方法可以快速准确鉴定西瓜样品中的西瓜细菌性果斑病菌,具有重要的应用价值。
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公开(公告)号:CN108588250A
公开(公告)日:2018-09-28
申请号:CN201810668421.X
申请日:2018-06-26
Applicant: 浙江大学
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种用于检测西瓜细菌性果斑病菌的LAMP引物及其检测方法,属于生物技术领域。所述的LAMP引物,包括2条外引物、2条内引物和1条环化引物,其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1-5所示。本发明提供的LAMP引物对西瓜细菌性果斑病菌的检出具有特异性,检测灵敏度达到1.72×102fg/μL;利用本发明提供的检测方法,能够简单快速地对西瓜细菌性果斑病菌进行检测,结果肉眼可判断,且在LAMP反应前加入显色剂,大大降低了污染的可能性,适用于基层农业部门及相关检测部门的田间现场检测。
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公开(公告)号:CN104541668A
公开(公告)日:2015-04-29
申请号:CN201410728768.0
申请日:2014-12-04
Applicant: 浙江大学 , 贵州省烟草公司毕节市公司
Abstract: 本发明涉及烟草漂浮育苗领域,旨在提供一种提高烟草漂浮育苗种子发芽率和壮苗的方法。该方法是将用液体培养基培养的植物根内生真菌印度梨形孢的菌体和培养滤液与烟草育苗基质混匀,利用印度梨形孢的菌体及其释放在培养滤液中的物质提高烟草漂浮育苗的种子发芽率并促进烟苗生长和抗逆。本发明简便易行,用常规方法培养印度梨形孢,用标准规程混合基质、装盘、播种、漂浮育苗、炼苗和移栽,接种印度梨形孢的方式与漂浮育苗规程相配套。本发明能够使烟草种子发芽率提高;帮助烟苗根系耐受低氧胁迫,使烟苗根系发达、根干重增加;帮助根吸收营养,促进烟苗生长,使烟苗茎杆增粗、茎直径增加,使株高增加;使烟苗移栽后存活率提高。
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公开(公告)号:CN102323259B
公开(公告)日:2013-02-27
申请号:CN201110164931.1
申请日:2011-06-19
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明属于分析化学领域,旨在提供一种将烟囱顶96孔PCR板用于批量测定氨基酸含量的方法。该方法是通过茚三酮比色法测定样品溶液中的氨基酸含量,在测定过程中使用聚丙烯材质的烟囱顶96孔PCR板上的各小管作为盛装样品溶液和茚三酮试剂的容器,用镂空的乙烯乙酸乙烯酯塑料垫架着PCR板浮在沸水中加热进行茚三酮反应。本发明比常规茚三酮比色法操作更简便,节省了人力、时间及试剂的用量,可广泛应用于批量检测食品、饮品、调味品和保健品中氨基酸的含量。同时,本发明将分子生物学研究和诊断中用来批量扩增核酸的烟囱顶PCR板用于分析化学的茚三酮比色测定,为烟囱顶PCR板提供了一种全新的用途。
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公开(公告)号:CN116004863A
公开(公告)日:2023-04-25
申请号:CN202210858199.6
申请日:2022-07-20
Applicant: 浙江大学
IPC: C12Q1/689 , C12N15/11 , C12Q1/6851 , C12R1/64
Abstract: 本发明公开了一种用于检测鉴定水稻白叶枯病菌(Xanthomonasoryzae pv.oryzae,Xoo)的靶标,所述的靶标为如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列。本发明还公开了一种用于检测鉴定水稻白叶枯病菌的引物对,包括正向引物5’‑CCTTCTGCAATCTATGGCACC‑3’和反向引物5’‑TAAATAACACGGTGAAGCCGAC‑3’。所述引物对用于PCR能且只能从包含Xoo DNA的样品中扩增出138bp的核酸片段,具有检测鉴定Xoo的特异性和通用性,实现准确检测鉴定Xoo。所述引物对适用于实时荧光定量PCR,检测灵敏度达到2.7×102fg/μL。
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公开(公告)号:CN113430289B
公开(公告)日:2022-05-27
申请号:CN202110923299.8
申请日:2021-08-12
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种用于检测鉴定狄克氏属细菌的引物对、试剂盒及方法。所述引物对包括正向引物和反向引物,正向引物为DicCSP‑F1或DicCSP‑F2,反向引物为DicCSP‑R1或DicCSP‑R2,其中,DicCSP‑F2和DicCSP‑R2为简并引物。使用本发明引物对进行PCR,能且只能从含有Dickeya属细菌基因组DNA的样品中扩增出123~124bp的基因片段,用于鉴定和检疫Dickeya属细菌。此引物对也适用于荧光定量PCR,检测灵敏度比常规PCR高100倍,能准确灵敏地检验检疫Dickeya属细菌。
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公开(公告)号:CN112626241A
公开(公告)日:2021-04-09
申请号:CN202011414082.6
申请日:2020-12-04
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一对用于检测和鉴别果胶杆菌属(Pectobacterium)细菌的引物及其使用方法。引物包括正向引物23SPecF和反向引物23SPecR。一种检测和鉴别Pectobacterium属细菌的方法,用引物对23SPecF和23SPecR进行PCR,能且只能从含有Pectobacterium属细菌基因组DNA的样品中扩增出266bp的核酸片段。因Pectobacterium属细菌有7个拷贝的23SrRNA基因,用引物对23SPecF和23SPecR进行PCR的检测灵敏度是用针对单拷贝基因引物的7倍,能更灵敏地检测Pectobacterium属细菌。
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公开(公告)号:CN108588249A
公开(公告)日:2018-09-28
申请号:CN201810667966.9
申请日:2018-06-26
Applicant: 浙江大学
CPC classification number: C12Q1/689
Abstract: 本发明公开了一种用于检测甘薯茎腐病菌的引物对及其检测方法,属于生物技术领域。所述的引物对包括上游引物和下游引物,上游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示,下游引物的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示。本发明通过生物信息学手段获取达旦提狄克氏菌的特异性基因片段,并设计用于PCR扩增该基因片段的特异性引物对,利用该引物对实现对达旦提狄克氏菌的准确鉴定,对甘薯茎腐病菌DNA的最低检测浓度达到0.5ng/μL。利用本发明提供的检测方法可以快速准确鉴定甘薯样品中的甘薯茎腐病菌,无需病原菌培养、性状分析等复杂操作。
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