公开(公告)号：CN105928921B

公开(公告)日：2018-07-27

申请号：CN201610396527.X

申请日：2016-06-07

Applicant: 河南科技大学

Inventor： 赵燕 ,  郑轶琦 ,  王辉 ,  刘晶 ,  何春霞 ,  张亚峰

IPC: G01N21/64 ,  G01N21/84 ,  G01N1/28 ,  G01N1/30

Abstract: 本发明涉及一种通过荧光染色图片数字化进行细胞pH值计算的方法，首先对细胞进行BCECF‑AM染色，分别获取458nm和488nm下的荧光染色图片；配制pH值位于5.0‑7.0的至少五种不同的荧光液泡处理液，分别对不同pH的荧光液泡处理液直接进行荧光拍照，选取同一pH值的两种激发波长下的两张照片中相同的点，计算488nm/458nm的荧光比值；结合不同的pH值，做成荧光标准曲线；在matlab软件程序界面执行程序操作，得到488nm/458nm数字化图片，图片上的每一个点的颜色都指示一个pH值，根据颜色标尺，读出相对应的细胞pH值。通过此种方法，获得488nm/458nm数字化图片，可快速、直观、全面系统地分析胞内pH值，而且，大大节约了成本，可以方便广大生物学研究人员使用，具有较大的实用性。

公开(公告)号：CN105928921A

公开(公告)日：2016-09-07

申请号：CN201610396527.X

申请日：2016-06-07

Applicant: 河南科技大学

Inventor： 赵燕 ,  郑轶琦 ,  王辉 ,  刘晶 ,  何春霞 ,  张亚峰

IPC: G01N21/64 ,  G01N21/84 ,  G01N1/28 ,  G01N1/30

Abstract: 本发明涉及一种通过荧光染色图片数字化进行细胞pH值计算的方法，首先对细胞进行BCECF‑AM染色，分别获取458nm和488nm下的荧光染色图片；配制pH值位于5.0‑7.0的至少五种不同的荧光液泡处理液，分别对不同pH的荧光液泡处理液直接进行荧光拍照，选取同一pH值的两种激发波长下的两张照片中相同的点，计算488nm/458nm的荧光比值；结合不同的pH值，做成荧光标准曲线；在matlab软件程序界面执行程序操作，得到488nm/458nm数字化图片，图片上的每一个点的颜色都指示一个pH值，根据颜色标尺，读出相对应的细胞pH值。通过此种方法，获得488nm/458nm数字化图片，可快速、直观、全面系统地分析胞内pH值，而且，大大节约了成本，可以方便广大生物学研究人员使用，具有较大的实用性。