公开(公告)号：CN119685295A

公开(公告)日：2025-03-25

申请号：CN202411761345.9

申请日：2024-12-03

Applicant: 江苏大学

Inventor： 陈华友 ,  阎铭晨 ,  许毓丹 ,  陈颖 ,  冯勇 ,  周慧敏 ,  王振 ,  穆罕默德·赛义德 ,  倪忠 ,  方真

IPC: C12N9/56 ,  C12N15/75 ,  C12N15/70 ,  C12N15/66 ,  C12N15/10 ,  C12N1/21 ,  A23K10/26 ,  A23K10/37 ,  A23K10/12 ,  A23K10/14 ,  A23K20/142 ,  C12R1/125 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明属于酶工程和农业废弃物转化领域，具体涉及一种耐酸性高活力角蛋白酶制剂的制备方法及其在羽毛粉发酵饲料中的应用。本发明基于cotG‑KERQ7进行了耐酸性的设计，通过催化中心碱催化残基替换、表面不稳定正电荷氨基酸替换、柔性区域引入这三轮的组合突变策略，兼顾提高了角蛋白酶突变体的酸稳定性与活性。通过使丝氨酸角蛋白酶的酶蛋白表面更适应酸性的环境，增大酸性环境中蛋白酶的底物结合空腔体积，使其可以更好接纳和催化底物，从而有效提升酸稳定性和活性；最终得到一种耐酸性高活力的角蛋白酶制剂B.subtilis cotG‑KERQ7‑M2，为后续羽毛废物绿色转化成酸溶蛋白的产业化、发酵饲料的制备提供了参考。