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公开(公告)号:CN118256543B
公开(公告)日:2024-11-29
申请号:CN202410248059.6
申请日:2024-03-05
Applicant: 江苏创健医疗科技股份有限公司
IPC: C12N15/81 , C12N15/69 , C12N1/19 , C12N15/12 , C07K14/79 , A61K38/40 , A61P31/04 , A61P31/10 , A61K8/64 , A61Q19/00 , A61Q19/02 , A23L33/18 , C12R1/84
Abstract: 本发明提供了乳铁蛋白肽高表达菌株及其构建方法和制备重组人乳铁蛋白肽的应用,属于基因工程和生物技术领域;本发明先通过空间结构模拟和Average RMSF计算选择4段人乳铁蛋白肽,然后构建含3个拷贝数的载体并将3个拷贝数的载体转化进高表达菌株中,得到高表达、高拷贝工程菌株;本发明还通过特殊设计将PDI、Aft1和Sec9表达框整合到一个载体上,转化至高表达、高拷贝工程菌株得到乳铁蛋白肽高表达菌株,所述乳铁蛋白肽高表达菌株让工程菌株产能得到最大释放;所述乳铁蛋白肽高表达菌株能够高产重组人乳铁蛋白肽的同时降低生产升成本,具有很好的实用价值。
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公开(公告)号:CN118256543A
公开(公告)日:2024-06-28
申请号:CN202410248059.6
申请日:2024-03-05
Applicant: 江苏创健医疗科技股份有限公司
IPC: C12N15/81 , C12N15/69 , C12N1/19 , C12N15/12 , C07K14/79 , A61K38/40 , A61P31/04 , A61P31/10 , A61K8/64 , A61Q19/00 , A61Q19/02 , A23L33/18 , C12R1/84
Abstract: 本发明提供了乳铁蛋白肽高表达菌株及其构建方法和制备重组人乳铁蛋白肽的应用,属于基因工程和生物技术领域;本发明先通过空间结构模拟和Average RMSF计算选择4段人乳铁蛋白肽,然后构建含3个拷贝数的载体并将3个拷贝数的载体转化进高表达菌株中,得到高表达、高拷贝工程菌株;本发明还通过特殊设计将PDI、Aft1和Sec9表达框整合到一个载体上,转化至高表达、高拷贝工程菌株得到乳铁蛋白肽高表达菌株,所述乳铁蛋白肽高表达菌株让工程菌株产能得到最大释放;所述乳铁蛋白肽高表达菌株能够高产重组人乳铁蛋白肽的同时降低生产升成本,具有很好的实用价值。
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公开(公告)号:CN117778299A
公开(公告)日:2024-03-29
申请号:CN202311821340.6
申请日:2023-12-26
Applicant: 江苏创健医疗科技股份有限公司
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种用于CHO细胞高效表达重组胶原蛋白的无血清培养。所述培养基包括氨基酸、维生素、无机盐、微量元素及碳水化合物和补充因子组分:本发明首先结合控制甘氨酸、脯氨酸和羟脯氨酸含量促进胶原蛋白合成;进而引入维生素C和Fe2+的结合,维持Fe2+不被氧化成有毒性的Fe3+;同时结合优化维生素、微量元素和补充因子,引入了重组小分子胶原蛋白,进一步促进胶原蛋白的高效表达。最后,为了使整个培养过程更有效表达重组胶原蛋白,本发明还提供了一种补料培养基,所述无血清培养基和补料培养基不含任何血清组分,安全环保,对提高大规模CHO细胞表达重组胶原蛋白技术有重要意义,应用前景广阔。
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公开(公告)号:CN115960211A
公开(公告)日:2023-04-14
申请号:CN202211660923.0
申请日:2022-12-23
Applicant: 江苏创健医疗科技股份有限公司
IPC: C07K14/78 , A61K8/65 , A61Q19/00 , C07K19/00 , C12N15/12 , C12N15/62 , C12N15/81 , C12N1/19 , C12P21/02 , C12R1/84
Abstract: 本发明提供了一种重组人源Ⅵ型胶原蛋白及其制备方法和应用,属于生物工程技术领域。本发明的重组人源Ⅵ型胶原蛋白,是从人Ⅵ型胶原蛋白氨基酸序列中优化筛选后选取的序列,并基于此提供了重组表达载体和重组工程菌以及该胶原蛋白的制备方法,本发明中已经证实该胶原蛋白不但能够实现人Ⅵ型胶原蛋白于毕赤酵母的高效分泌表达,而且还具有更为优异的细胞粘附活性,并且可工业化应用。
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公开(公告)号:CN119570859A
公开(公告)日:2025-03-07
申请号:CN202411821135.4
申请日:2024-12-11
Applicant: 江苏创健医疗科技股份有限公司
Abstract: 本发明公开了一种CHO细胞表达三螺旋结构III型重组人胶原蛋白的制备方法及其应用,涉及生物技术领域。该制备方法包括利用重组工程细胞发酵纯化得到该三螺旋结构III型重组人胶原蛋白的步骤;该重组工程细胞的构建方法包括将表达α1(Ⅲ)的重组质粒与表达hP4Hα1和hP4HB的重组质粒转化宿主细胞,构建得到该重组工程细胞的步骤。利用该制备方法可以制备得到脯氨酸羟基化率高的具有三螺旋结构的Ⅲ型重组人胶原蛋白,可以广泛应用于化妆品、医学美容、医疗器械、生物医学材料等领域,具有重要的市场应用价值。
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公开(公告)号:CN117535164B
公开(公告)日:2024-08-23
申请号:CN202311495228.8
申请日:2023-11-10
Applicant: 江苏创健医疗科技股份有限公司
Abstract: 本发明涉及一种适用于重组胶原蛋白生产的毕赤酵母发酵培养基及发酵工艺,属于生物发酵技术领域。本发明替换常用BSM培养中H3PO4、KOH,用更安全的无机盐取代,尽可能减少钾盐用量,用更安全的钠盐替代;采用本发明的培养基,并对种子液的OD值、接种量进行调整,采用优化后的甲醇流加工艺,发酵生产重组胶原蛋白,最终发酵液经钾离子检测仪测定钾离子浓度明显降低,使得产品更安全;本发明的发酵方法提高了蛋白表达量,同时减少了发酵过程中蛋白的降解;诱导周期由最初120h,缩短至52h,降低了发酵能耗成本,降低了发酵过程染菌风险;为企业创造了巨大经济价值。
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公开(公告)号:CN118440975A
公开(公告)日:2024-08-06
申请号:CN202410685458.9
申请日:2024-05-30
Applicant: 江苏创健医疗科技股份有限公司
Abstract: 本发明公开了一种酵母表达三螺旋结构的重组人源化胶原蛋白的制备方法,属于遗传工程技术领域。本发明通过构建可同时用于体外多拷贝以及体内多拷贝的质粒,然后基于该质粒构建了胶原蛋白表达载体并通过表达量筛选得到高表达菌株,最后向高表达菌株中导入P4H表达质粒获得共表达菌株,经发酵纯化后能够获得酵母表达三螺旋结构的重组人源化胶原蛋白,该重组人源化胶原蛋白含羟脯氨酸,羟脯氨酸占总脯氨酸的30%以上。本发明制备的重组人源化胶原蛋白可广泛应用于化妆品、医学美容、医疗器械、生物医学材料等领域。
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公开(公告)号:CN117801095A
公开(公告)日:2024-04-02
申请号:CN202311859408.X
申请日:2023-12-30
Applicant: 江苏创健医疗科技股份有限公司
IPC: C07K14/78 , A61K38/39 , A61K8/65 , A61Q19/00 , A61L27/24 , A61L31/04 , C12N15/81 , C12N1/19 , A23L33/17 , C12R1/84
Abstract: 本发明涉及一种重组人IV型胶原蛋白及其制备方法,属于生物工程技术领域;本发明以人IV型胶原蛋白α2链中的部分序列为基础设计重组人IV型胶原蛋白,将蛋白编码DNA连接入表达载体中,构建重组表达载体;然后将其转化感受态大肠杆菌细胞,提取重组表达质粒;质粒线性化后转化工程菌株HCPB‑PPKEX2得到重组工程菌;培养,诱导表达目的蛋白并纯化、鉴定;进一步通过实验证明了本发明的胶原蛋白能够被Kex2、Ste13和CPB酶完全切割并高效分泌表达于胞外,并与理论序列完全一致;还通过实验验证了重组胶原蛋白的细胞黏附活性和促进细胞迁移活性;本发明的方案避免了外源蛋白残留的风险,同时也可以缩短后续纯化工艺流程的时间及成本,具有较高的安全性和应用价值。
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公开(公告)号:CN115919751B
公开(公告)日:2024-03-19
申请号:CN202211621549.3
申请日:2022-12-16
Applicant: 江苏创健医疗科技股份有限公司
IPC: A61K9/06 , C08J3/075 , C08J3/24 , C08L89/00 , C08K5/3415 , C08K5/29 , A61K38/39 , A61K47/42 , A61P15/00
Abstract: 本发明属于生物医药技术领域,具体涉及一种重组胶原蛋白水凝胶的制备方法及其应用;所述重组胶原蛋白水凝胶包括EDC、NHS、重组人Ⅲ型胶原蛋白、水和/或抗菌剂;本发明创造性的引入水溶性EDC和NHS,可促使胶原间发生交联,令重组胶原蛋白长期作用于病灶部位,减少重组胶原蛋白的在递送中的损失、提升了重组胶原蛋白的疗效;有效解决了重组胶原蛋白直接局部应用在宫腔黏连部位重组胶原蛋白流失严重、在病灶作用时间短、治疗效果不理想的问题。并且,所制备的重组胶原蛋白水凝胶生物相容性好,不会对患者病患部位以及衣物造成污染、舒适度高,不仅可以治疗宫腔黏连,同时能够促进子宫内膜快速恢复,具有很高的临床价值。
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公开(公告)号:CN117535164A
公开(公告)日:2024-02-09
申请号:CN202311495228.8
申请日:2023-11-10
Applicant: 江苏创健医疗科技股份有限公司
Abstract: 本发明涉及一种适用于重组胶原蛋白生产的毕赤酵母发酵培养基及发酵工艺,属于生物发酵技术领域。本发明替换常用BSM培养中H3PO4、KOH,用更安全的无机盐取代,尽可能减少钾盐用量,用更安全的钠盐替代;采用本发明的培养基,并对种子液的OD值、接种量进行调整,采用优化后的甲醇流加工艺,发酵生产重组胶原蛋白,最终发酵液经钾离子检测仪测定钾离子浓度明显降低,使得产品更安全;本发明的发酵方法提高了蛋白表达量,同时减少了发酵过程中蛋白的降解;诱导周期由最初120h,缩短至52h,降低了发酵能耗成本,降低了发酵过程染菌风险;为企业创造了巨大经济价值。
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