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公开(公告)号：CN117778299A
公开(公告)日：2024-03-29
申请号：CN202311821340.6
申请日：2023-12-26
Applicant: 江苏创健医疗科技股份有限公司
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种用于CHO细胞高效表达重组胶原蛋白的无血清培养。所述培养基包括氨基酸、维生素、无机盐、微量元素及碳水化合物和补充因子组分：本发明首先结合控制甘氨酸、脯氨酸和羟脯氨酸含量促进胶原蛋白合成；进而引入维生素C和Fe2+的结合，维持Fe2+不被氧化成有毒性的Fe3+；同时结合优化维生素、微量元素和补充因子，引入了重组小分子胶原蛋白，进一步促进胶原蛋白的高效表达。最后，为了使整个培养过程更有效表达重组胶原蛋白，本发明还提供了一种补料培养基，所述无血清培养基和补料培养基不含任何血清组分，安全环保，对提高大规模CHO细胞表达重组胶原蛋白技术有重要意义，应用前景广阔。
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公开(公告)号：CN118652924B
公开(公告)日：2025-02-07
申请号：CN202410689911.3
申请日：2024-05-30
Applicant: 江苏创健医疗科技股份有限公司
IPC: C12N15/81 , C12N15/12 , C12N1/19 , C07K14/78 , A61K8/65 , A61Q19/00 , A61L27/24 , A61L27/54 , A61L27/60 , A61L15/32 , A61L15/44 , C12R1/84
Abstract: 本发明公开了一种酵母表达三螺旋结构Ⅲ型重组人胶原蛋白的制备方法及其应用，涉及生物技术领域。该制备方法包括利用工程菌发酵纯化得到所述三螺旋结构Ⅲ型重组人胶原蛋白的步骤；所述工程菌的构建方法包括使用改造后的质粒，构建胶原蛋白表达载体，先进行胶原表达量筛选获得高表达菌株，再向高表达菌株中导入P4H酶表达质粒，获得共表达菌株，经发酵纯化获得成熟的三螺旋结构Ⅲ型重组人胶原蛋白，利用本发明制备方法获得的三螺旋结构的Ⅲ型重组人胶原蛋白含有羟脯氨酸，羟脯氨酸占总脯氨酸的40％以上，可应广泛应用于化妆品、医学美容、医疗器械、生物医学材料等领域。
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公开(公告)号：CN117534746B
公开(公告)日：2024-11-29
申请号：CN202311495233.9
申请日：2023-11-10
Applicant: 江苏创健医疗科技股份有限公司
Abstract: 本发明涉及一种表达重组胶原蛋白的甲醇诱导发酵工艺，属于生物发酵技术领域。本发明的发酵工艺在甲醇诱导阶段，流加半胱氨酸，甲醇和海藻糖混合诱导，在提高重组人源胶原蛋白发酵温度的同时，缩短发酵周期，降低生产成本；同时，本发明的工艺可以提高胶原蛋白产量，通过控制发酵温度32～34℃，调节毕赤酵母菌的生长代谢速度，缩短了发酵周期，提高了重组人源胶原蛋白的表达量，进一步提升重组人源胶原蛋白的生产水平。
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公开(公告)号：CN116926014A
公开(公告)日：2023-10-24
申请号：CN202310863837.8
申请日：2023-07-14
Applicant: 江苏创健医疗科技股份有限公司
IPC: C12N5/10
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种CHO‑K1的驯化方法。常规驯化方法有直接驯化和梯度驯化两种。直接驯化过程中，细胞生长环境短时间内发生突变，容易出现细胞结团、活率低等问题，此外，直接驯化法需要大量初始细胞，对培养场地和设备有较高要求，操作难度高，投入大、失败率高；梯度驯化法需要逐步降低培养基中血清含量，过程繁琐、时间周期长。本发明所采用的“无血清‑血清交替驯化法”无需大量初始细胞，对培养场地和设备要求低，无需梯度降低血清，无需特定条件培养基，细胞不易结团，细胞活率高，有效解决了CHO细胞驯化周期长和成功率低的问题，降低了CHO细胞驯化成本，所获得的悬浮细胞株的分散性好、活率高、生长速度快。
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公开(公告)号：CN119570859A
公开(公告)日：2025-03-07
申请号：CN202411821135.4
申请日：2024-12-11
Applicant: 江苏创健医疗科技股份有限公司
Abstract: 本发明公开了一种CHO细胞表达三螺旋结构III型重组人胶原蛋白的制备方法及其应用，涉及生物技术领域。该制备方法包括利用重组工程细胞发酵纯化得到该三螺旋结构III型重组人胶原蛋白的步骤；该重组工程细胞的构建方法包括将表达α1(Ⅲ)的重组质粒与表达hP4Hα1和hP4HB的重组质粒转化宿主细胞，构建得到该重组工程细胞的步骤。利用该制备方法可以制备得到脯氨酸羟基化率高的具有三螺旋结构的Ⅲ型重组人胶原蛋白，可以广泛应用于化妆品、医学美容、医疗器械、生物医学材料等领域，具有重要的市场应用价值。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN118440975A
公开(公告)日：2024-08-06
申请号：CN202410685458.9
申请日：2024-05-30
Applicant: 江苏创健医疗科技股份有限公司
Abstract: 本发明公开了一种酵母表达三螺旋结构的重组人源化胶原蛋白的制备方法，属于遗传工程技术领域。本发明通过构建可同时用于体外多拷贝以及体内多拷贝的质粒，然后基于该质粒构建了胶原蛋白表达载体并通过表达量筛选得到高表达菌株，最后向高表达菌株中导入P4H表达质粒获得共表达菌株，经发酵纯化后能够获得酵母表达三螺旋结构的重组人源化胶原蛋白，该重组人源化胶原蛋白含羟脯氨酸，羟脯氨酸占总脯氨酸的30％以上。本发明制备的重组人源化胶原蛋白可广泛应用于化妆品、医学美容、医疗器械、生物医学材料等领域。
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公开(公告)号：CN117491522B
公开(公告)日：2024-05-07
申请号：CN202311456468.7
申请日：2023-11-03
Applicant: 江苏创健医疗科技股份有限公司
Abstract: 本发明属于分析检测技术领域，具体涉及一种N‑羟基琥珀酰亚胺残留量的检测方法；采用色谱柱为Ultimate AQ‑C18，柱温为25‑35℃；流动相为磷酸水溶液；本发明针对小分子NHS极性大，优选了色谱柱，并结合控制柱温，提高了仪器使用效率，缩短了数据采集以及分析时间，提高了检测效率；同时创造性的选择磷酸水溶液为流动相，具备极性大、与NHS结合能力强、稳定性高的优势，而且其配制简单，洗脱更加方便。进一步结合优化流动相pH、流速、进样体积等参数，设计了针对NHS残留量检测的整体化方案，出峰时间合适、稳定，样品峰和溶剂峰分离度好，实现了高效、精准检测，检测精度可达10‑2ng/mL，应用前景广阔。
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公开(公告)号：CN117801095A
公开(公告)日：2024-04-02
申请号：CN202311859408.X
申请日：2023-12-30
Applicant: 江苏创健医疗科技股份有限公司
IPC: C07K14/78 , A61K38/39 , A61K8/65 , A61Q19/00 , A61L27/24 , A61L31/04 , C12N15/81 , C12N1/19 , A23L33/17 , C12R1/84
Abstract: 本发明涉及一种重组人IV型胶原蛋白及其制备方法，属于生物工程技术领域；本发明以人IV型胶原蛋白α2链中的部分序列为基础设计重组人IV型胶原蛋白，将蛋白编码DNA连接入表达载体中，构建重组表达载体；然后将其转化感受态大肠杆菌细胞，提取重组表达质粒；质粒线性化后转化工程菌株HCPB‑PPKEX2得到重组工程菌；培养，诱导表达目的蛋白并纯化、鉴定；进一步通过实验证明了本发明的胶原蛋白能够被Kex2、Ste13和CPB酶完全切割并高效分泌表达于胞外，并与理论序列完全一致；还通过实验验证了重组胶原蛋白的细胞黏附活性和促进细胞迁移活性；本发明的方案避免了外源蛋白残留的风险，同时也可以缩短后续纯化工艺流程的时间及成本，具有较高的安全性和应用价值。
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公开(公告)号：CN115919751B
公开(公告)日：2024-03-19
申请号：CN202211621549.3
申请日：2022-12-16
Applicant: 江苏创健医疗科技股份有限公司
IPC: A61K9/06 , C08J3/075 , C08J3/24 , C08L89/00 , C08K5/3415 , C08K5/29 , A61K38/39 , A61K47/42 , A61P15/00
Abstract: 本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种重组胶原蛋白水凝胶的制备方法及其应用；所述重组胶原蛋白水凝胶包括EDC、NHS、重组人Ⅲ型胶原蛋白、水和/或抗菌剂；本发明创造性的引入水溶性EDC和NHS，可促使胶原间发生交联，令重组胶原蛋白长期作用于病灶部位，减少重组胶原蛋白的在递送中的损失、提升了重组胶原蛋白的疗效；有效解决了重组胶原蛋白直接局部应用在宫腔黏连部位重组胶原蛋白流失严重、在病灶作用时间短、治疗效果不理想的问题。并且，所制备的重组胶原蛋白水凝胶生物相容性好，不会对患者病患部位以及衣物造成污染、舒适度高，不仅可以治疗宫腔黏连，同时能够促进子宫内膜快速恢复，具有很高的临床价值。
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公开(公告)号：CN117491522A
公开(公告)日：2024-02-02
申请号：CN202311456468.7
申请日：2023-11-03
Applicant: 江苏创健医疗科技股份有限公司
Abstract: 本发明属于分析检测技术领域，具体涉及一种N‑羟基琥珀酰亚胺残留量的检测方法；采用色谱柱为Ultimate AQ‑C18，柱温为25‑35℃；流动相为磷酸水溶液；本发明针对小分子NHS极性大，优选了色谱柱，并结合控制柱温，提高了仪器使用效率，缩短了数据采集以及分析时间，提高了检测效率；同时创造性的选择磷酸水溶液为流动相，具备极性大、与NHS结合能力强、稳定性高的优势，而且其配制简单，洗脱更加方便。进一步结合优化流动相pH、流速、进样体积等参数，设计了针对NHS残留量检测的整体化方案，出峰时间合适、稳定，样品峰和溶剂峰分离度好，实现了高效、精准检测，检测精度可达10‑2ng/mL，应用前景广阔。
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