一种代谢工程改造大肠杆菌产乙醇酸的方法

    公开(公告)号:CN117887650A

    公开(公告)日:2024-04-16

    申请号:CN202410175295.X

    申请日:2024-02-07

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种代谢工程改造大肠杆菌产乙醇酸的方法,属于生物工程技术领域。本发明构建了一个乙醇酸传感器文库,并将构建好的乙醇酸控制乙醇酸合成路径关键基因的表达,使所述大肠杆菌可以自发生产乙醇酸,生产的乙醇酸又能激活乙醇酸传感器,从而增加乙醇酸合成路径关键基因的表达,将更多的代谢流引入乙醇酸合成路径中,实现了动态放大法生产乙醇酸。本发明通过过表达转氢酶基因pntAB和ED途径关键基因增加了NADPH的供给,通过敲除转氢酶基因减少了NADPH的消耗,最终菌株Mgly8‑245乙醇酸产量达到了5.64g/L,理论转化率达到了83.5%,比对照组Mgly7‑24提高了36.2%。

    Paracoccus denitrificans内源性铵盐诱导启动子

    公开(公告)号:CN117025601A

    公开(公告)日:2023-11-10

    申请号:CN202310944518.X

    申请日:2021-10-27

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了Paracoccus denitrificans内源性铵盐诱导启动子,属于合成生物学领域。本发明脱氮副球菌基因组中筛选出15个受铵盐诱导的可调控不同表达强度的启动子P1849、Prpsu、P2495、Pmdh、P1851、P2068、P4130、P2486、P2480、P1869、Pcs、Prpst、P4462、Pnir和P1690,将上述启动子用于脱氮副球菌中调控荧光蛋白的表达,在铵盐存在的情况下单位OD的荧光响应值是无铵盐时的9~32倍,可作为基因表达调控元件,用于精细调控基因表达、精细调控代谢通路,具有广泛的应用前景。

    受铵盐诱导的脱氮副球菌启动子P1690

    公开(公告)号:CN116751783A

    公开(公告)日:2023-09-15

    申请号:CN202310956583.4

    申请日:2021-10-27

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了受铵盐诱导的脱氮副球菌启动子P1690,属于合成生物学领域。本发明脱氮副球菌基因组中筛选出15个受铵盐诱导的可调控不同表达强度的启动子P1849、Prpsu、P2495、Pmdh、P1851、P2068、P4130、P2486、P2480、P1869、Pcs、Prpst、P4462、Pnir和P1690,将上述启动子用于脱氮副球菌中调控荧光蛋白的表达,在铵盐存在的情况下单位OD的荧光响应值是无铵盐时的9~32倍,可作为基因表达调控元件,用于精细调控基因表达、精细调控代谢通路,具有广泛的应用前景。

    脱氮副球菌来源启动子Pcs
    6.
    发明公开

    公开(公告)号:CN116732037A

    公开(公告)日:2023-09-12

    申请号:CN202310922440.1

    申请日:2021-10-27

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了脱氮副球菌来源启动子Pcs,属于合成生物学领域。本发明脱氮副球菌基因组中筛选出15个受铵盐诱导的可调控不同表达强度的启动子P1849、Prpsu、P2495、Pmdh、P1851、P2068、P4130、P2486、P2480、P1869、Pcs、Prpst、P4462、Pnir和P1690,将上述启动子用于脱氮副球菌中调控荧光蛋白的表达,在铵盐存在的情况下单位OD的荧光响应值是无铵盐时的9~32倍,可作为基因表达调控元件,用于精细调控基因表达、精细调控代谢通路,具有广泛的应用前景。

    一种利用大肠杆菌全生物合成丙二酸的方法

    公开(公告)号:CN113832087B

    公开(公告)日:2023-09-12

    申请号:CN202010577670.5

    申请日:2020-06-23

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种利用大肠杆菌全生物合成丙二酸的方法,属于生物工程领域。本发明是以大肠杆菌BL21(DE3)为宿主,将大肠杆菌自身的磷酸烯醇丙酮酸羧化酶基因和天冬氨酸转氨酶共表达,将来自谷氨酸棒杆菌的天冬氨酸‑α‑脱氢酶基因单独进行表达,将大肠杆菌自身的琥珀酸半醛脱氢酶基因和来自铜绿假单胞菌的异源基因β‑丙氨酸丙酮酸转氨酶基因共表达,构建了经由草酰乙酸‑天冬氨酸的丙二酸全生物合成途径,使工程菌积累丙二酸的能力进一步提高,发酵36小时丙二酸产量可达0.74g/L,较前期构建菌株丙二酸最高产量0.23g/L提高了3倍,发酵时间提前了12小时。

    一种霍氏肠杆菌发酵生产庚二酸的方法

    公开(公告)号:CN114717272B

    公开(公告)日:2023-08-25

    申请号:CN202210304773.3

    申请日:2022-03-23

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种霍氏肠杆菌发酵生产庚二酸的方法,属于微生物发酵技术领域。本发明从保存的菌株中筛选到一株可生产庚二酸的霍氏肠杆菌,该菌株为天然菌株,在发酵过程中无需添加抗生素及诱导剂,在降低工业生产成本的同时还有利于环境的保护。利用所述霍氏肠杆菌在摇瓶条件下发酵72h,庚二酸的产量为115.4mg/L;并通过对发酵工艺如碳源种类、氮源种类、碳氮源组合、接种量、外加无机盐种类及浓度等的优化,进一步提升了庚二酸的产量,庚二酸的产量达到217.3mg/L。利于庚二酸是规模化生产且,同时为庚二酸的生物法合成提供了新宿主,也为后续研究奠定了生物学基础。

    一种酿酒酵母通过丙氨酸途径生产丙二酸的方法

    公开(公告)号:CN116103172A

    公开(公告)日:2023-05-12

    申请号:CN202111333071.X

    申请日:2021-11-11

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明涉及一种酿酒酵母通过丙氨酸途径生产丙二酸的方法,属于生物工程领域。本发明是以酿酒酵母为出发菌株,将来自角豆(Tribolium castaneum)的天冬氨酸脱羧酶基因(PAND)和来自蜡样芽孢杆菌的β丙氨酸丙酮酸转氨酶基因(BAPAT)整合到酿酒酵母BY4741基因组的delta位点上,在酿酒酵母中构建丙二酸合成途径,并替换该途径的上下游的细胞质天冬氨酸氨基转移酶和琥珀酸半醛脱氢酶的启动子为强组成型启动子,来进一步提高丙二酸产量本申请为酿酒酵母宿主中丙二酸的合成提供了新路线。重组酿酒酵母经摇瓶发酵后,丙二酸产量为4.4mg/L,5‑L发酵罐中,丙二酸最高产量为44.31mg/L。

    一种提高酿酒酵母工程菌生产葡萄糖二酸的发酵方法

    公开(公告)号:CN110951794B

    公开(公告)日:2022-03-25

    申请号:CN201911412864.3

    申请日:2019-12-31

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种提高酿酒酵母工程菌生产葡萄糖二酸的发酵方法,属于生物工程技术领域。本发明是以产葡萄糖二酸酿酒酵母工程菌Bga‑001为出发菌株,优化了其发酵培养条件,发现发酵培养基初始葡萄糖浓度为20g/L,添加10g/L的肌醇,添加100mM MgCl2时葡萄糖二酸的产量最高,摇瓶发酵条件下葡萄糖二酸的产量为6g/L,5L发酵罐中葡萄糖二酸的产量可达12g/L。本发明中葡萄糖二酸的生物制造具有污染少、产品质量高等优点,极具发展前景,这对于葡萄糖二酸的工业化生产具有重要的应用意义。

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