公开(公告)号：CN113122486B

公开(公告)日：2023-06-13

申请号：CN201911420851.0

申请日：2019-12-31

Applicant: 江南大学

Inventor： 邓禹 ,  赵运英 ,  李诗韵 ,  李国辉 ,  毛银 ,  周胜虎

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12P7/44 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种丙二酸的全生物合成的方法，属于生物工程技术领域。本发明是以大肠杆菌BL21(DE3)为宿主，模块过量表达来自大肠杆菌的磷酸烯醇丙酮酸羧化酶基因(ppc)，琥珀酸脱氢酶基因(sdhC)，琥珀酸半醛脱氢酶基因(yne1)，天门冬氨酸酶基因(aspa)，来自谷氨酸棒杆菌的异源基因天冬氨酸‑α‑脱氢酶基因(panD)，来自铜绿假单胞菌的异源基因β‑丙氨酸丙酮酸转氨酶基因(pa0123)，构建了丙二酸的全生物合成途径，使工程菌成功积累丙二酸。本发明丙二酸及其前体物的生物制造具有污染少、产品质量高等优点，极具发展前景。

公开(公告)号：CN116103172A

公开(公告)日：2023-05-12

申请号：CN202111333071.X

申请日：2021-11-11

Applicant: 江南大学

Inventor： 邓禹 ,  赵运英 ,  李诗韵 ,  李国辉 ,  周胜虎 ,  毛银

IPC: C12N1/19 ,  C12P7/44 ,  C12R1/865

Abstract: 本发明涉及一种酿酒酵母通过丙氨酸途径生产丙二酸的方法，属于生物工程领域。本发明是以酿酒酵母为出发菌株，将来自角豆(Tribolium castaneum)的天冬氨酸脱羧酶基因(PAND)和来自蜡样芽孢杆菌的β丙氨酸丙酮酸转氨酶基因(BAPAT)整合到酿酒酵母BY4741基因组的delta位点上，在酿酒酵母中构建丙二酸合成途径，并替换该途径的上下游的细胞质天冬氨酸氨基转移酶和琥珀酸半醛脱氢酶的启动子为强组成型启动子，来进一步提高丙二酸产量本申请为酿酒酵母宿主中丙二酸的合成提供了新路线。重组酿酒酵母经摇瓶发酵后，丙二酸产量为4.4mg/L，5‑L发酵罐中，丙二酸最高产量为44.31mg/L。

公开(公告)号：CN113122486A

公开(公告)日：2021-07-16

申请号：CN201911420851.0

申请日：2019-12-31

Applicant: 江南大学

Inventor： 邓禹 ,  赵运英 ,  李诗韵 ,  李国辉 ,  毛银 ,  周胜虎

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12P7/44 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种丙二酸的全生物合成的方法，属于生物工程技术领域。本发明是以大肠杆菌BL21(DE3)为宿主，模块过量表达来自大肠杆菌的磷酸烯醇丙酮酸羧化酶基因(ppc)，琥珀酸脱氢酶基因(sdhC)，琥珀酸半醛脱氢酶基因(yne1)，天门冬氨酸酶基因(aspa)，来自谷氨酸棒杆菌的异源基因天冬氨酸‑α‑脱氢酶基因(panD)，来自铜绿假单胞菌的异源基因β‑丙氨酸丙酮酸转氨酶基因(pa0123)，构建了丙二酸的全生物合成途径，使工程菌成功积累丙二酸。本发明丙二酸及其前体物的生物制造具有污染少、产品质量高等优点，极具发展前景。

公开(公告)号：CN116103173A

公开(公告)日：2023-05-12

申请号：CN202111333376.0

申请日：2021-11-11

Applicant: 江南大学

Inventor： 邓禹 ,  赵运英 ,  李诗韵 ,  周胜虎 ,  李国辉 ,  毛银

IPC: C12N1/19 ,  C12N9/00 ,  C12N9/16 ,  C12N15/113 ,  C12P7/46 ,  C12R1/865

Abstract: 本发明公开了一种提高酿酒酵母生产丙二酸的方法，属于生物工程技术领域。本发明以酿酒酵母BY4741为出发菌株，通过将酿酒酵母来源的乙酰辅酶A脱羧酶突变基因和3‑羟基异丁酰辅酶A水解酶突变基因整合至酿酒酵母基因组的Delta位点。并将酿酒酵母的3‑羟基异丁酰辅酶A水解酶的第121位的Phe和第124位的Glu进行突变，然后将酿酒酵母的乙酰辅酶A脱羧酶的第659位和第1157位的Ser突变为Ala，最终获得丙二酸产量较高的酿酒酵母工程菌株，摇瓶发酵培养7d后，丙二酸的产量可以达到80mg/L。