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公开(公告)号：CN105400711A
公开(公告)日：2016-03-16
申请号：CN201511018190.0
申请日：2015-12-30
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/93 , C07K14/38 , C12N9/0006 , C12P7/46 , C12Y101/01037 , C12Y604/01001
Abstract: 本发明的公开了一株产L-苹果酸的酿酒酵母工程菌的构建及应用，属于发酵工程领域。本发明在高产丙酮酸的菌株S.cerevisiae tTAMΔura3Δtrp1中过量游离表达源于Aspergillus flavus ATCC13697的丙酮酸羧化酶(Afpyc)、苹果酸脱氢酶(Afmdh)和苹果酸转运蛋白(Afmae)基因，构建了苹果酸积累路径，获得菌株W1101。上述菌株用于发酵生产L-苹果酸，发酵84h，其苹果酸产量为27.3g/L，而原始出发菌株不积累苹果酸，这将高产L-苹果酸菌株黄曲霉的代谢路径成功应用于酿酒酵母，为高产L-苹果酸菌株的构建提供了一种新策略。
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公开(公告)号：CN103952382B
公开(公告)日：2016-09-07
申请号：CN201410054752.6
申请日：2014-02-17
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种维生素C磷酸化酶及其应用，包括有a)序列为SEQ ID NO：1酶；b)在a)中的氨基酸序列经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且具有a中所述酶的活性的，由a衍生的酶。本发明提供的维生素C磷酸化酶能特异性作用于维生素C的C2位上进行磷酸化，生成相应的维生素C‑2磷酸酯。因此可以利用维生素C磷酸化酶应用于工业化生产维生素C‑2磷酸酯，具有很大的商业价值。
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公开(公告)号：CN103352058A
公开(公告)日：2013-10-16
申请号：CN201310309738.1
申请日：2013-07-23
Applicant: 江南大学 , 张家港市华天药业有限公司
Abstract: 本发明阐述了一种从L-谷氨酸钠制备α-酮戊二酸的生物催化方法，属于生物技术领域。本发明通过利用产L-氨基酸氧化酶的菌株(Rhodococcus opacus)，在发酵48h后，收集菌体，取12g/L(以干重计算)菌体加入到含有10g/L的L-谷氨酸钠转化液中，在温度为35℃、pH8.4条件下转化10h后，每隔6h向反应体系中加入4.3g/L的L-谷氨酸钠，连续转化24h，最终α-酮戊二酸的产量达到了16.8g/L，转化率高达90％以上。
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公开(公告)号：CN103352058B
公开(公告)日：2019-04-23
申请号：CN201310309738.1
申请日：2013-07-23
Applicant: 江南大学 , 张家港市华天药业有限公司
Abstract: 本发明阐述了一种从L‑谷氨酸钠制备α‑酮戊二酸的生物催化方法，属于生物技术领域。本发明通过利用产L‑氨基酸氧化酶的菌株(Rhodococcus opacus)，在发酵48h后，收集菌体，取12g/L(以干重计算)菌体加入到含有10g/L的L‑谷氨酸钠转化液中，在温度为35℃、pH8.4条件下转化10h后，每隔6h向反应体系中加入4.3g/L的L‑谷氨酸钠，连续转化24h，最终α‑酮戊二酸的产量达到了16.8g/L，转化率高达90％以上。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103388002A
公开(公告)日：2013-11-13
申请号：CN201310309739.6
申请日：2013-07-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明阐述了一种产L-谷氨酸氧化酶重组菌株的构建方法及其应用，属于基因工程与酶学品领域，将重组产生的谷氨酸氧化酶包涵体进行蛋白变性、复性和浓缩，使30％的蛋白包涵体恢复活性，通过对重组酶的酶学性质研究，发现重组酶最适pH8.5，最适温度35℃，Mn2+可以使酶比活力提高20％以上，而外源添加FAD对酶活力没有影响；结合酶学特征，将重组酶添加到含有20g/L的谷氨酸钠pH8.5的缓冲液中，35℃转化12h可以生成8.3g/L的α-酮戊二酸。
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公开(公告)号：CN105400711B
公开(公告)日：2018-10-16
申请号：CN201511018190.0
申请日：2015-12-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明的公开了一株产L‑苹果酸的酿酒酵母工程菌的构建及应用，属于发酵工程领域。本发明在高产丙酮酸的菌株S.cerevisiae tTAMΔura3Δtrp1中过量游离表达源于Aspergillus flavus ATCC13697的丙酮酸羧化酶(Afpyc)、苹果酸脱氢酶(Afmdh)和苹果酸转运蛋白(Afmae)基因，构建了苹果酸积累路径，获得菌株W1101。上述菌株用于发酵生产L‑苹果酸，发酵84h，其苹果酸产量为27.3g/L，而原始出发菌株不积累苹果酸，这将高产L‑苹果酸菌株黄曲霉的代谢路径成功应用于酿酒酵母，为高产L‑苹果酸菌株的构建提供了一种新策略。
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公开(公告)号：CN104762337A
公开(公告)日：2015-07-08
申请号：CN201510203341.3
申请日：2015-04-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高效生产维生素C-2磷酸酯的方法，属于生物技术领域。本发明通过利用产维生素C磷酸化酶的重组菌株E.coli BL21(DE3)/pET20b--asp，在温度为37℃、当OD值达到0.4时添加6g/L的乳糖进行诱导，诱导培养4h后，收集菌体，取10.6g/L(以干重计算)菌体加入到含有200g/L维生素C和224g/L的焦磷酸钠的转化液中，在温度为43℃、pH4.3条件下转化2h后，维生素C-2磷酸酯的产量达到了82.3g/L。
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公开(公告)号：CN103952382A
公开(公告)日：2014-07-30
申请号：CN201410054752.6
申请日：2014-02-17
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种维生素C磷酸化酶及其应用，包括有a)序列为SEQ ID NO：1酶；b)在a)中的氨基酸序列经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且具有a中所述酶的活性的，由a衍生的酶。本发明提供的维生素C磷酸化酶能特异性作用于维生素C的C2位上进行磷酸化，生成相应的维生素C-2磷酸酯。因此可以利用维生素C磷酸化酶应用于工业化生产维生素C-2磷酸酯，具有很大的商业价值。
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公开(公告)号：CN103555642A
公开(公告)日：2014-02-05
申请号：CN201310309931.5
申请日：2013-10-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明阐述了一株产L-氨基酸氧化酶的重组菌株的构建方法及其应用，属于基因工程与酶学品领域，将重组产生的L-氨基酸氧化酶包涵体进行蛋白变性、复性和浓缩，使蛋白包涵体恢复活性;蛋白表达量最佳诱导条件为37℃，IPTG0.5mmol/L诱导5h；通过对重组酶的酶学性质研究，发现重组酶最适pH8.0，最适温度45℃，外源添加FAD对酶活力没有影响；结合酶学特征，将重组酶添加到含有10g/L的谷氨酸钠pH8.0的缓冲液中，45℃转化6h可以生成5.3g/L的α-酮戊二酸，转化率达到50％以上。
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