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公开(公告)号：CN103555642A
公开(公告)日：2014-02-05
申请号：CN201310309931.5
申请日：2013-10-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明阐述了一株产L-氨基酸氧化酶的重组菌株的构建方法及其应用，属于基因工程与酶学品领域，将重组产生的L-氨基酸氧化酶包涵体进行蛋白变性、复性和浓缩，使蛋白包涵体恢复活性;蛋白表达量最佳诱导条件为37℃，IPTG0.5mmol/L诱导5h；通过对重组酶的酶学性质研究，发现重组酶最适pH8.0，最适温度45℃，外源添加FAD对酶活力没有影响；结合酶学特征，将重组酶添加到含有10g/L的谷氨酸钠pH8.0的缓冲液中，45℃转化6h可以生成5.3g/L的α-酮戊二酸，转化率达到50％以上。
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公开(公告)号：CN102363757A
公开(公告)日：2012-02-29
申请号：CN201110317435.5
申请日：2011-10-19
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明阐述了一株高产2-酮基-D-葡萄糖酸沙雷氏菌的筛选方法及应用该菌株生产2-酮基-D-葡萄糖酸，属于生物工程领域。本发明是称取约0.2g土壤于20ml 0.85％无菌生理盐水中，振荡混匀之后将菌悬液涂布至5％盐浓度的牛肉膏蛋白胨培养基上30℃培养36h，将产紫红色素的菌落经发酵培养基培养后，采用内标法经高效液相色谱进行定性分析，并对筛选菌株进行形态学、生理生化及分子生物学鉴定，获得的一株高产2-酮基-D-葡萄糖酸的沙雷氏菌；本发明同时公开一种采用该菌生产2-酮基-D-葡萄糖酸的方法，采用本方法发酵36h2-酮基-D-葡萄糖酸的产量为181.2g/L。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103352058B
公开(公告)日：2019-04-23
申请号：CN201310309738.1
申请日：2013-07-23
Applicant: 江南大学 , 张家港市华天药业有限公司
Abstract: 本发明阐述了一种从L‑谷氨酸钠制备α‑酮戊二酸的生物催化方法，属于生物技术领域。本发明通过利用产L‑氨基酸氧化酶的菌株(Rhodococcus opacus)，在发酵48h后，收集菌体，取12g/L(以干重计算)菌体加入到含有10g/L的L‑谷氨酸钠转化液中，在温度为35℃、pH8.4条件下转化10h后，每隔6h向反应体系中加入4.3g/L的L‑谷氨酸钠，连续转化24h，最终α‑酮戊二酸的产量达到了16.8g/L，转化率高达90％以上。
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公开(公告)号：CN103388002A
公开(公告)日：2013-11-13
申请号：CN201310309739.6
申请日：2013-07-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明阐述了一种产L-谷氨酸氧化酶重组菌株的构建方法及其应用，属于基因工程与酶学品领域，将重组产生的谷氨酸氧化酶包涵体进行蛋白变性、复性和浓缩，使30％的蛋白包涵体恢复活性，通过对重组酶的酶学性质研究，发现重组酶最适pH8.5，最适温度35℃，Mn2+可以使酶比活力提高20％以上，而外源添加FAD对酶活力没有影响；结合酶学特征，将重组酶添加到含有20g/L的谷氨酸钠pH8.5的缓冲液中，35℃转化12h可以生成8.3g/L的α-酮戊二酸。
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公开(公告)号：CN103352058A
公开(公告)日：2013-10-16
申请号：CN201310309738.1
申请日：2013-07-23
Applicant: 江南大学 , 张家港市华天药业有限公司
Abstract: 本发明阐述了一种从L-谷氨酸钠制备α-酮戊二酸的生物催化方法，属于生物技术领域。本发明通过利用产L-氨基酸氧化酶的菌株(Rhodococcus opacus)，在发酵48h后，收集菌体，取12g/L(以干重计算)菌体加入到含有10g/L的L-谷氨酸钠转化液中，在温度为35℃、pH8.4条件下转化10h后，每隔6h向反应体系中加入4.3g/L的L-谷氨酸钠，连续转化24h，最终α-酮戊二酸的产量达到了16.8g/L，转化率高达90％以上。
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公开(公告)号：CN102994467A
公开(公告)日：2013-03-27
申请号：CN201210563671.X
申请日：2012-12-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明阐述了一种具有底物特异性的L-谷氨酸氧化酶以及该酶催化生产α-酮戊二酸，属于酶法催化生产精细化学品领域。本发明是利用一种只对L-谷氨酸、L-谷氨酸钠及谷氨酰胺具有底物专一性的L-谷氨酸氧化酶，在发酵60h的含L-谷氨酸氧化酶的发酵液中，添加20g/L的L-谷氨酸钠溶液，在通气条件下，30℃，pH8.5，添加5％(v/v)异丙醇条件下转化12h，通过高效液相色谱法测得α-酮戊二酸含量达到14.5g/L。
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公开(公告)号：CN102337240A
公开(公告)日：2012-02-01
申请号：CN201110317460.3
申请日：2011-10-19
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公布了一株新粘质沙雷氏菌发酵产红色素及其鉴定方法，属于发酵工程领域。本发明通过浸提、萃取、旋转蒸发方法获取色素浓缩液，通过硅胶柱色谱分离纯化得色素组分，用UV-Vis分析pH值为3.0与9.0条件下最大吸收峰分别在530nm和465nm，通过LC/MS分析测得其准确相对分子质量，确定该色素为灵菌红素。发酵采用LB液体培养基，500mL三角瓶，内装培养液50mL，115℃灭菌15min在30℃条件200r/min摇培结束后，8000r/min离心10min去杂，经酸性甲醇抽提，产生灵菌红素沙雷氏菌株色素产量为150mg/L。灵菌红素在肿瘤治疗、食品和化妆品等领域具有重要的应用前景。
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