公开(公告)号：CN107227302A

公开(公告)日：2017-10-03

申请号：CN201710437791.8

申请日：2017-06-12

Applicant: 江南大学

Inventor： 管政兵 ,  罗权 ,  夏静 ,  王凯强 ,  廖祥儒

IPC: C12N9/02 ,  C12N1/21 ,  C12N15/53 ,  C02F3/34 ,  C12R1/07

CPC classification number: C12N9/0061 ,  C02F3/34 ,  C02F2101/308 ,  C12Y110/03002

Abstract: 本发明公开了一种可溶性表达量提高的短小芽胞杆菌(Bacillus pumilus W3)CotA漆酶突变体，属于生物工程领域。本发明以本实验室前期构建的催化效率(ABTS为底物)大大提高的复合突变体L386W/G417L/G57F(WLF)CotA漆酶基因为模板，进一步将复合突变体的第501位Asp突变为Gly。本发明所述的短小芽胞杆菌CotA漆酶突变体的可溶性表达量是WT‑CotA的3.75倍，是WLF的4.48倍，催化效率为WT‑CotA的4.4倍，为WLF的0.993倍，并保持良好的pH、温度稳定性。本发明所得CotA漆酶突变体将更适合工业化应用，具有更广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN105200021A

公开(公告)日：2015-12-30

申请号：CN201510718946.6

申请日：2015-10-29

Applicant: 江南大学

Inventor： 管政兵 ,  陈宇 ,  廖祥儒 ,  罗权 ,  张宁

IPC: C12N9/02 ,  C12N15/53 ,  C12N15/70

CPC classification number: C12N9/0061 ,  C12Y110/03002

Abstract: 本发明公开了一种催化性能提高的短小芽胞杆菌CotA漆酶突变体，属于基因工程和酶工程领域。本发明以本实验室前期构建的复合突变体L386W/G417L CotA漆酶基因为模板，进一步将复合突变体的第195位Asp分别突变为Trp、Phe、Try、Ile，随后以野生型CotA漆酶为对照，发现复合突变体L386W/G417L/D195Y对底物2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)具有更高的催化活性和专一性，提升了短小芽胞杆菌CotA漆酶的工业应用前景。

公开(公告)号：CN107034200A

公开(公告)日：2017-08-11

申请号：CN201710438493.0

申请日：2017-06-12

Applicant: 江南大学

Inventor： 管政兵 ,  罗权 ,  夏静 ,  王凯强 ,  廖祥儒

IPC: C12N9/02 ,  C12N1/21 ,  C12N15/53 ,  C02F3/34 ,  C12R1/07

CPC classification number: C12N9/0061 ,  C02F3/34 ,  C12Y110/03002

Abstract: 本发明公开了一种可溶性表达量提高的短小芽胞杆菌(Bacillus pumilus W3)CotA漆酶突变体，属于生物工程领域。本发明以本实验室前期构建的催化效率(ABTS为底物)大大提高的复合突变体L386W/G417L/G57F(WLF)CotA漆酶基因为模板，进一步将复合突变体的第501位Asp突变为Gly，第317位Lys突变为Asn。本发明所述的短小芽胞杆菌CotA漆酶突变体的可溶性表达量是WT‑CotA的3.04倍，是WLF的3.63倍，催化效率为WT‑CotA的4.6倍，为WLF的1.03倍，并保持良好的pH、温度稳定性。本发明所得CotA漆酶突变体将更适合工业化应用，具有更广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN105219744B

公开(公告)日：2019-04-02

申请号：CN201510716645.X

申请日：2015-10-29

Applicant: 江南大学

Inventor： 管政兵 ,  陈宇 ,  廖祥儒 ,  罗权 ,  陈康

IPC: C12N9/02 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21

Abstract: 本发明公开了一种催化活性提高的短小芽胞杆菌CotA漆酶突变体及其制备方法，属于基因工程和酶工程领域。本发明以本实验室前期构建的双突变体L386W/G417L CotA漆酶基因为模板，进一步将双突变体的第57位Gly分别突变为Leu、Phe、Try、Trp，随后以野生型CotA漆酶为对照，发现复合突变体L386W/G417L/G57F对底物2,2‑联氮‑二(3‑乙基‑苯并噻唑‑6‑磺酸)二铵盐(ABTS)具有更高的催化活性和专一性，提升了短小芽胞杆菌CotA漆酶的工业应用前景。

公开(公告)号：CN107034199A

公开(公告)日：2017-08-11

申请号：CN201710437792.2

申请日：2017-06-12

Applicant: 江南大学

Inventor： 管政兵 ,  罗权 ,  夏静 ,  孙海健 ,  廖祥儒

IPC: C12N9/02 ,  C12N1/21 ,  C12N15/53 ,  C12N15/70 ,  C02F3/34 ,  C12R1/19

CPC classification number: C12N9/0061 ,  C02F3/34 ,  C12N15/70 ,  C12Y110/03002

Abstract: 本发明公开了一种底物特异性提高的短小芽胞杆菌CotA漆酶突变体，属于基因工程和酶工程领域。本发明以本实验室前期构建的单突变体L386W CotA漆酶基因为模板，进一步将单突变体的第417位Gly突变为Leu，随后以野生型CotA漆酶为对照，发现复合突变体L386W/G417L对底物2,2‑联氮‑二(3‑乙基‑苯并噻唑‑6‑磺酸)二铵盐(ABTS)具有更高的专一性，提升了短小芽胞杆菌CotA漆酶的工业应用前景。

公开(公告)号：CN105219744A

公开(公告)日：2016-01-06

申请号：CN201510716645.X

申请日：2015-10-29

Applicant: 江南大学

Inventor： 管政兵 ,  陈宇 ,  廖祥儒 ,  罗权 ,  陈康

IPC: C12N9/02 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21

CPC classification number: C12N9/0061 ,  C12Y110/03002

Abstract: 本发明公开了一种催化活性提高的短小芽胞杆菌CotA漆酶突变体及其制备方法，属于基因工程和酶工程领域。本发明以本实验室前期构建的双突变体L386W/G417L CotA漆酶基因为模板，进一步将双突变体的第57位Gly分别突变为Leu、Phe、Try、Trp，随后以野生型CotA漆酶为对照，发现复合突变体L386W/G417L/G57F对底物2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)具有更高的催化活性和专一性，提升了短小芽胞杆菌CotA漆酶的工业应用前景。