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公开(公告)号:CN107034199A
公开(公告)日:2017-08-11
申请号:CN201710437792.2
申请日:2017-06-12
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/0061 , C02F3/34 , C12N15/70 , C12Y110/03002
Abstract: 本发明公开了一种底物特异性提高的短小芽胞杆菌CotA漆酶突变体,属于基因工程和酶工程领域。本发明以本实验室前期构建的单突变体L386W CotA漆酶基因为模板,进一步将单突变体的第417位Gly突变为Leu,随后以野生型CotA漆酶为对照,发现复合突变体L386W/G417L对底物2,2‑联氮‑二(3‑乙基‑苯并噻唑‑6‑磺酸)二铵盐(ABTS)具有更高的专一性,提升了短小芽胞杆菌CotA漆酶的工业应用前景。
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公开(公告)号:CN107034200A
公开(公告)日:2017-08-11
申请号:CN201710438493.0
申请日:2017-06-12
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/0061 , C02F3/34 , C12Y110/03002
Abstract: 本发明公开了一种可溶性表达量提高的短小芽胞杆菌(Bacillus pumilus W3)CotA漆酶突变体,属于生物工程领域。本发明以本实验室前期构建的催化效率(ABTS为底物)大大提高的复合突变体L386W/G417L/G57F(WLF)CotA漆酶基因为模板,进一步将复合突变体的第501位Asp突变为Gly,第317位Lys突变为Asn。本发明所述的短小芽胞杆菌CotA漆酶突变体的可溶性表达量是WT‑CotA的3.04倍,是WLF的3.63倍,催化效率为WT‑CotA的4.6倍,为WLF的1.03倍,并保持良好的pH、温度稳定性。本发明所得CotA漆酶突变体将更适合工业化应用,具有更广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN109294936B
公开(公告)日:2021-05-11
申请号:CN201811266756.5
申请日:2018-10-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种异源重组毕赤酵母工程菌GS115‑pPIC9K‑LacGWLF,所述异源重组毕赤酵母工程菌携带来源于短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)CotA漆酶优良突变体GWLF的目的基因;将优化的GWLF漆酶基因重组进毕赤酵母GS115基因组得到的所述工程菌。本发明重组毕赤酵母阳性菌株经过甲醇诱导培养、发酵条件优化和5L发酵罐高密度发酵,可用于制备重组GWLF漆酶。
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公开(公告)号:CN109294936A
公开(公告)日:2019-02-01
申请号:CN201811266756.5
申请日:2018-10-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种异源重组毕赤酵母工程菌GS115-pPIC9K-LacGWLF,所述异源重组毕赤酵母工程菌携带来源于短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)CotA漆酶优良突变体GWLF的目的基因;将优化的GWLF漆酶基因重组进毕赤酵母GS115基因组得到的所述工程菌。本发明重组毕赤酵母阳性菌株经过甲醇诱导培养、发酵条件优化和5L发酵罐高密度发酵,可用于制备重组GWLF漆酶。
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公开(公告)号:CN107227302A
公开(公告)日:2017-10-03
申请号:CN201710437791.8
申请日:2017-06-12
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/0061 , C02F3/34 , C02F2101/308 , C12Y110/03002
Abstract: 本发明公开了一种可溶性表达量提高的短小芽胞杆菌(Bacillus pumilus W3)CotA漆酶突变体,属于生物工程领域。本发明以本实验室前期构建的催化效率(ABTS为底物)大大提高的复合突变体L386W/G417L/G57F(WLF)CotA漆酶基因为模板,进一步将复合突变体的第501位Asp突变为Gly。本发明所述的短小芽胞杆菌CotA漆酶突变体的可溶性表达量是WT‑CotA的3.75倍,是WLF的4.48倍,催化效率为WT‑CotA的4.4倍,为WLF的0.993倍,并保持良好的pH、温度稳定性。本发明所得CotA漆酶突变体将更适合工业化应用,具有更广阔的应用前景。
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