公开(公告)号：CN102286387A

公开(公告)日：2011-12-21

申请号：CN201110166741.3

申请日：2011-06-21

Applicant: 江南大学

Inventor： 刘立明 ,  陈修来 ,  杨松鑫 ,  陈坚

IPC: C12N1/19 ,  C12N15/53 ,  C12N15/63 ,  C12P7/46 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明公布了一株产富马酸的光滑球拟酵母工程菌的构建方法及应用，属于发酵工程领域。本发明通过游离表达的方式，将来源于米根霉(Rhizopus oryzae)的苹果酸脱氢酶基因(RoMDH)和富马酸酶基因(RoFUM1)过量表达于丙酮酸生产菌T.glabrata的尿嘧啶(Ura)缺陷型T.glabrataΔura3中，获得了重组菌株T.glabrata FMME045。所述菌株用于发酵生产富马酸，发酵60h后，发酵液中富马酸产量比出发菌株增加了6倍，达到35mg/L，这为采用微生物发酵法生产富马酸提供了一条新的途径，具有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN103352068A

公开(公告)日：2013-10-16

申请号：CN201210487755.X

申请日：2012-11-27

Applicant: 江南大学

Inventor： 刘立明 ,  俞晓霞 ,  杨松鑫 ,  陈坚

IPC: C12Q1/02 ,  C12R1/88

Abstract: 本发明阐述了一种采用流式细胞术检测发酵过程中细胞活性的方法，属于生物工程领域。本发明采用Rh123/PI双染所培养的微生物细胞(酵母或者霉菌)，流式细胞术检测摇瓶正常发酵时和高盐胁迫下的细胞活性，得到FCM图谱，调好合适的“十字门”，象限分析得到可靠的死细胞、活细胞和凋亡细胞比例，为工业化生产中细胞活性检测方面提供简便的方法。

公开(公告)号：CN102363757A

公开(公告)日：2012-02-29

申请号：CN201110317435.5

申请日：2011-10-19

Applicant: 江南大学

Inventor： 刘立明 ,  牛盼清 ,  杨爱华 ,  杨松鑫

IPC: C12N1/20 ,  C12P7/58 ,  C12R1/425

Abstract: 本发明阐述了一株高产2-酮基-D-葡萄糖酸沙雷氏菌的筛选方法及应用该菌株生产2-酮基-D-葡萄糖酸，属于生物工程领域。本发明是称取约0.2g土壤于20ml 0.85％无菌生理盐水中，振荡混匀之后将菌悬液涂布至5％盐浓度的牛肉膏蛋白胨培养基上30℃培养36h，将产紫红色素的菌落经发酵培养基培养后，采用内标法经高效液相色谱进行定性分析，并对筛选菌株进行形态学、生理生化及分子生物学鉴定，获得的一株高产2-酮基-D-葡萄糖酸的沙雷氏菌；本发明同时公开一种采用该菌生产2-酮基-D-葡萄糖酸的方法，采用本方法发酵36h2-酮基-D-葡萄糖酸的产量为181.2g/L。

公开(公告)号：CN102286550A

公开(公告)日：2011-12-21

申请号：CN201110166742.8

申请日：2011-06-21

Applicant: 江南大学

Inventor： 刘立明 ,  杨松鑫 ,  陈修来 ,  汪军 ,  陈坚

IPC: C12P7/40 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明公布了一种利用尿素作为氮源提高发酵法生产丙酮酸产量的方法，属于发酵工程技术领域。本发明通过以多重维生素营养缺陷型的光滑球拟酵母(Torulopsis glabrata)CCTCCM202019为生产菌株，利用尿素代替氯化铵作为唯一氮源，初始添加量为7g/L，在实验室规模7L发酵罐分批发酵培养。本发明有效提高丙酮酸的产量(11.9％)及生产强度(30.9％)，大幅缩短发酵周期(20.6％)，上述成果在30L规模发酵罐中成功进行了中试，具有广阔的工业化应用前景。