公开(公告)号：CN116286701A

公开(公告)日：2023-06-23

申请号：CN202310078769.4

申请日：2023-02-03

Applicant: 江南大学

Inventor： 吴静 ,  武耀运 ,  何志震 ,  陶金阳 ,  李春旺 ,  马腾飞 ,  闫昕 ,  苗登路 ,  刘立明 ,  宋伟 ,  魏婉清 ,  周怡雯 ,  陈修来 ,  刘佳 ,  高聪

IPC: C12N9/06 ,  C12N15/53 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P11/00 ,  C12P7/40 ,  C12P7/52 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种不透明红球菌L‑氨基酸氧化酶突变体及其应用，属于生物工程技术领域。本发明克服了野生型RoLAAO催化性能差的局限，通过麦芽糖蛋白工程及组合突变设计出突变体RoLAAOY226H/D227H/Y371L/A466C/W467A，其对五种选定底物催化效率为野生型的9.2‑82.8倍，能够以L‑氨基酸(L‑Leu、L‑Ile、L‑Met、L‑Val及L‑Phe)为底物规模化制备系列α‑酮酸(α‑酮亮氨酸、α‑酮异亮氨酸、α‑酮蛋氨酸、α‑酮缬氨酸及α‑苯丙酮酸)，对应产量>101g/L，转化率>95％，单位菌体生产α‑酮酸的能力在5.1‑5.5g/g，为多种α‑酮酸的工业化生产奠定了基础。