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公开(公告)号:CN108085287B
公开(公告)日:2021-08-24
申请号:CN201711334447.2
申请日:2017-12-14
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/113 , C12N15/63 , C12P21/00 , C12R1/15
Abstract: 本发明提供了一种重组谷氨酸棒状杆菌,其能有效解决现有谷氨酸棒状杆菌外源蛋白表达量低的技术问题。该重组谷氨酸棒状杆菌中的肽聚糖内切酶基因mepA、细胞膜表面阴离子通道蛋白基因porB和胞内蛋白酶基因clpC均被敲除,同时ABC转运体基因Ncgl0909过量表达。此外,本法还提供了该重组谷氨酸棒状杆菌的制备方法及其应用。
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公开(公告)号:CN109694841A
公开(公告)日:2019-04-30
申请号:CN201910107941.8
申请日:2019-02-02
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了一种谷氨酸棒状杆菌重组菌,其能解决传统的谷氨酸棒状杆菌的宿主菌外源蛋白表达量较低,限制了其作为外源蛋白表达宿主的应用程度的技术问题。一种谷氨酸棒状杆菌重组菌,其特征在于:谷氨酸棒状杆菌重组菌的NCgl1689基因不能正确地转录或翻译。本发明改造的谷氨酸棒状杆菌重组菌其通过阻断NCgl1689基因的转录和翻译,实现外源蛋白的高表达。
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公开(公告)号:CN108085287A
公开(公告)日:2018-05-29
申请号:CN201711334447.2
申请日:2017-12-14
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/113 , C12N15/63 , C12P21/00 , C12R1/15
Abstract: 本发明提供了一种重组谷氨酸棒状杆菌,其能有效解决现有谷氨酸棒状杆菌外源蛋白表达量低的技术问题。该重组谷氨酸棒状杆菌中的肽聚糖内切酶基因mepA、细胞膜表面阴离子通道蛋白基因porB和胞内蛋白酶基因clpC均被敲除,同时ABC转运体基因Ncgl0909过量表达。此外,本法还提供了该重组谷氨酸棒状杆菌的制备方法及其应用。
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公开(公告)号:CN107384951A
公开(公告)日:2017-11-24
申请号:CN201710576441.X
申请日:2017-07-14
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N15/77 , C12N9/22 , C12N15/102 , C12N15/66
Abstract: 本发明提供了一种谷氨酸棒状杆菌的基因编辑载体,其具有较高的基因编辑效率。该基因编辑载体包括Cas9表达元件、sgRNA表达元件、复制子元件和同源修复序列插入位点;cas9表达元件包括抗性基因、操纵子、启动子、SD序列、cas9序列和终止子,cas9序列如SEQ ID No.5所示,SD序列如SEQ ID No.6所示;sgRNA表达元件的包含启动子、sgRNA scaffold序列和终止子,sgRNA scaffold序列包括trancrRNA和crRNA插入位点,sgRNA scaffold序列如SEQ ID No.7所示;复制子元件包含谷氨酸棒状杆菌复制子repA。
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公开(公告)号:CN106701810A
公开(公告)日:2017-05-24
申请号:CN201611141549.8
申请日:2016-12-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了一种谷氨酸棒状杆菌的基因编辑系统,其具有较高的基因编辑效率。谷氨酸棒状杆菌中待编辑的目的基因具有5′‑(N20)‑NGG‑3′结构,N为A、T、C或G,该基因编辑系统包括cas9表达载体和sgRNA表达载体;cas9表达载体包括cas9序列和SD序列,cas9序列如SEQ ID No.1所示,SD序列如SEQ ID No.2所示、并连接在cas9序列的始密码子ATG前;sgRNA表达载体的包含sgRNA序列和同源修复序列,sgRNA序列为crRNA与trancrRNA 连接形成的复合体序列,trancrRNA序列如SEQ ID No.3所示,crRNA序列为20bp的引导序列、与目的基因的N20序列相同。
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公开(公告)号:CN111518735A
公开(公告)日:2020-08-11
申请号:CN201910107943.7
申请日:2019-02-02
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了一种谷氨酸棒状杆菌重组菌,其能解决传统的谷氨酸棒状杆菌的宿主菌外源蛋白表达量较低,限制了其作为外源蛋白表达宿主的应用程度的技术问题。一种谷氨酸棒状杆菌重组菌,其特征在于:所述谷氨酸棒状杆菌重组菌的NCgl2429基因不能正确地转录或翻译。本发明改造的谷氨酸棒状杆菌重组菌其通过阻断NCgl2429基因的转录和翻译,实现外源蛋白的高表达。
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公开(公告)号:CN106701810B
公开(公告)日:2020-04-21
申请号:CN201611141549.8
申请日:2016-12-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了一种谷氨酸棒状杆菌的基因编辑系统,其具有较高的基因编辑效率。谷氨酸棒状杆菌中待编辑的目的基因具有5′‑(N20)‑NGG‑3′结构,N为A、T、C或G,该基因编辑系统包括cas9表达载体和sgRNA表达载体;cas9表达载体包括cas9序列和SD序列,cas9序列如SEQ ID No.1所示,SD序列如SEQ ID No.2所示、并连接在cas9序列的始密码子ATG前;sgRNA表达载体的包含sgRNA序列和同源修复序列,sgRNA序列为crRNA与trancrRNA 连接形成的复合体序列,trancrRNA序列如SEQ ID No.3所示,crRNA序列为20bp的引导序列、与目的基因的N20序列相同。
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