公开(公告)号：CN104894152A

公开(公告)日：2015-09-09

申请号：CN201510275209.3

申请日：2015-05-26

Applicant: 江南大学

Inventor： 张震宇 ,  王付才 ,  张胜利 ,  王晓姣 ,  夏紫薇

IPC: C12N15/63 ,  C12N15/53 ,  C12P13/24

Abstract: 本发明属于基因工程领域，公开了一种利用重组大肠杆菌生产顺式-4-羟基-L-脯氨酸的方法，该重组大肠杆菌由如下方法构建：对已知的L-脯氨酸-顺式-4-羟化酶基因序列进行优化，再全基因合成优化后的L-脯氨酸-顺式-4-羟化酶基因，然后将该基因连接到含有合适启动子的载体上，构建了可过量表达L-脯氨酸-顺式-4-羟化酶的重组质粒，再将该重组质粒导入大肠杆菌中，得到能够将游离的L-脯氨酸转化为顺式-4-羟基-L-脯氨酸的重组大肠杆菌。本发明还公开了所述重组大肠杆菌在生产顺式-4-羟脯氨酸中的应用，摇瓶发酵结果表明，本发明的重组大肠杆菌的顺式-4-羟基-L-脯氨酸的产量达到47.33mg/L。

公开(公告)号：CN104278047A

公开(公告)日：2015-01-14

申请号：CN201310283918.7

申请日：2013-07-04

Applicant: 江南大学

Inventor： 张震宇 ,  刘合栋 ,  张胜利

IPC: C12N15/70 ,  C12N15/77 ,  C12N15/78 ,  C12N15/75 ,  C12N15/81 ,  C12N1/21 ,  C12N1/19 ,  C12P13/24 ,  C12R1/19

Abstract: 公开了一种使含有重组DNA的反式-4-羟脯氨酸生物合成系统活性增强的方法。其中，含有重组DNA的反式-4-羟脯氨酸生物合成系统是在2-酮戊二酸和亚铁离子存在下，作用于游离的L-脯氨酸并生成反式-4-羟脯氨酸的具有脯氨酸4-羟化酶活性的重组微生物。同时，本发明还提供反式-4-羟脯氨酸的生物合成方法。