公开(公告)号：CN109971735A

公开(公告)日：2019-07-05

申请号：CN201910266195.7

申请日：2019-04-03

Applicant: 江南大学

Inventor： 张玲 ,  杨海麟 ,  孙柳青 ,  辛瑜 ,  王武

IPC: C12N9/18 ,  C12Q1/60 ,  C12Q1/44 ,  C02F3/34 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一种胆固醇酯酶的制备方法，属于酶工程技术领域。本发明中的胆固醇酯酶是利用保藏编号为CCTCC NO:M2017661的洋葱伯克霍尔德菌(Burkholderia cepacia)ZWS15进行制备得到。该酶具有良好的酸碱稳定性和温度稳定性，70℃下2小时酶活残留量还有70％，且能够耐受5％的高浓度的表面活性剂，和50％高浓度的有机溶剂。本发明制备得到的胆固醇酯酶对胆固醇苯甲酸酯、胆固醇油酸酯、胆固醇亚油酸酯、胆固醇辛酸酯的胆固醇酯酶活力分别高达415U/L、1038U/L、996U/L、294U/L。且能够降解三酰基甘油酯及对硝基苯酯类底物。

公开(公告)号：CN110004083A

公开(公告)日：2019-07-12

申请号：CN201910266228.8

申请日：2019-04-03

Applicant: 江南大学

Inventor： 张玲 ,  王武 ,  武迪 ,  杨海麟 ,  辛瑜 ,  孙柳青

IPC: C12N1/20 ,  C12N9/04 ,  C12P33/02 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一株洋葱伯克霍尔德菌及其应用，属于微生物领域。所述洋葱伯克霍尔德菌(Burkholderia cepacia)ZWS15已于2017年11月6日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M2017661，保藏地址为中国武汉武汉大学。该菌能够以胆固醇为唯一碳源，并能在50℃生长，耐受10％的有机溶剂，利用其发酵获得的粗酶液中胆固醇氧化酶酶活高达200U/L。利用洋葱伯克霍尔德菌ZWS15发酵粗酶液在有机溶剂存在的两相系统中催化胆固醇，最终收集到胆甾-4-烯-3-酮的量约为底物添加量的5～11％，胆甾-4-烯-3,6-二酮的量约为底物添加量的10～15％。

公开(公告)号：CN109971735B

公开(公告)日：2021-09-28

申请号：CN201910266195.7

申请日：2019-04-03

Applicant: 江南大学

Inventor： 张玲 ,  杨海麟 ,  孙柳青 ,  辛瑜 ,  王武

IPC: C12N9/18 ,  C12Q1/60 ,  C12Q1/44 ,  C02F3/34 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一种胆固醇酯酶的制备方法，属于酶工程技术领域。本发明中的胆固醇酯酶是利用保藏编号为CCTCC NO:M2017661的洋葱伯克霍尔德菌(Burkholderia cepacia)ZWS15进行制备得到。该酶具有良好的酸碱稳定性和温度稳定性，70℃下2小时酶活残留量还有70％，且能够耐受5％的高浓度的表面活性剂，和50％高浓度的有机溶剂。本发明制备得到的胆固醇酯酶对胆固醇苯甲酸酯、胆固醇油酸酯、胆固醇亚油酸酯、胆固醇辛酸酯的胆固醇酯酶活力分别高达415U/L、1038U/L、996U/L、294U/L。且能够降解三酰基甘油酯及对硝基苯酯类底物。

公开(公告)号：CN110004083B

公开(公告)日：2021-03-30

申请号：CN201910266228.8

申请日：2019-04-03

Applicant: 江南大学

Inventor： 张玲 ,  王武 ,  武迪 ,  杨海麟 ,  辛瑜 ,  孙柳青

IPC: C12N1/20 ,  C12N9/04 ,  C12P33/02 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一株洋葱伯克霍尔德菌及其应用，属于微生物领域。所述洋葱伯克霍尔德菌(Burkholderia cepacia)ZWS15已于2017年11月6日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M2017661，保藏地址为中国武汉武汉大学。该菌能够以胆固醇为唯一碳源，并能在50℃生长，耐受10％的有机溶剂，利用其发酵获得的粗酶液中胆固醇氧化酶酶活高达200U/L。利用洋葱伯克霍尔德菌ZWS15发酵粗酶液在有机溶剂存在的两相系统中催化胆固醇，最终收集到胆甾‑4‑烯‑3‑酮的量约为底物添加量的5～11％，胆甾‑4‑烯‑3,6‑二酮的量约为底物添加量的10～15％。