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公开(公告)号：CN119081953A
公开(公告)日：2024-12-06
申请号：CN202411308322.2
申请日：2024-09-19
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/20 , C12P7/6409 , C12G3/02 , C12R1/01
Abstract: 本发明公开了一种多元短、中链脂肪酸发酵与菌剂制备方法，属于酿造微生物技术领域。本发明利用解乳酸己小杆菌与嗜硫石单胞菌共发酵制备功能菌液，在提升己酸产量的同时，亦可提升所述两种微生物生物量，同时还可以产戊酸。采用本发明所述的产己酸功能精简菌群筛选方法筛选得到的“精简菌群”进行功能菌液制备时，其己酸产量较高，丁酸产量较低，同时可通过半连续补料操作实现规模化的连续生产运行，生产效能显著优于分批次的发酵方式。本发明技术生产的复合短、中链脂肪酸经酶法酯化后，可通过常规蒸馏提取获得含有多种酯类的复合酯类，可应用于食品和饮料酒增香。此外，在短、中链脂肪酸发酵过程中获得的菌剂可以应用于窖泥制作和窖池养护。
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公开(公告)号：CN116804191A
公开(公告)日：2023-09-26
申请号：CN202310708848.9
申请日：2023-06-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了热稳定性改善的多聚半乳糖醛酸酶突变体，属于基因工程技术领域。本发明通过对内切多聚半乳糖醛酸酶pePGB进行定点突变，获得的内切多聚半乳糖醛酸酶突变体E257C/N286C的比酶活相对于野生型酶有显著的提高，由6661U/mg提高至9649U/mg；同时，热稳定性也得到了显著的提高，粗酶液在50℃下孵育10min的残余酶活是野生型的5.6倍，纯酶在55℃下处理20min，残余酶活为野生型酶的1.5倍，在55℃处理60min后，残余酶活可达野生型的2.2倍。
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公开(公告)号：CN112961788B
公开(公告)日：2023-06-13
申请号：CN202110206889.9
申请日：2021-02-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种在里氏木霉中高产木聚糖酶的方法及其应用，属于生物工程技术领域。本发明通过表达转录激活因子XYR1增强木聚糖降解酶表达能力，并设计启动子Pcbh1上的转录因子结合位点，使得组成型表达XYR1能够对人工Pcbh1启动子形成进一步的激活作用，并用其表达同源木聚糖酶XYNII，获得重组里氏木霉。在纤维素诱导条件下，重组菌木聚糖酶的表达量达到6410U/mL，木糖苷酶活力达到9.08U/mL；重组菌株可以解除碳代谢阻遏，以可溶性廉价碳源葡萄糖和乳糖为发酵碳源，同样可以获得2514U/mL和3446U/mL的胞外木聚糖酶活，同时木糖苷酶产量较亲本提高了9.3倍和2.3倍。
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公开(公告)号：CN108220270B
公开(公告)日：2020-07-07
申请号：CN201810096248.0
申请日：2018-01-31
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种催化活性提高的酸性脂肪酶突变体，属于基因工程技术领域。本发明的突变酶ATLLid与将218的Val替换成Trp的突变酶ATLV218W的水解活性显著提高。ATLLid和ATLV218W对对硝基苯酚月桂酸酯p‑nitrophenyl laurate(p‑NPL)的水解活性分别为2.26和3.86倍，对p‑NPL的催化效率kcat/Km值较ATL分别提高了3.85倍和9.46倍。与ATL相比，ATLLid和ATLV218W的最适pH也为5.0，并在pH 2.0‑10.0具有较好的稳定性。
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公开(公告)号：CN111363739A
公开(公告)日：2020-07-03
申请号：CN202010240243.8
申请日：2020-03-31
Applicant: 江南大学
IPC: C12N11/14 , C12N11/10 , C12N11/089 , C08B37/00
Abstract: 本发明公开了一种利用醛基阿拉伯胶修饰的介孔氧化硅固定化酶的方法，属于检测技术领域。本发明提供了一种固定化酶载体，此固定化酶载体可用于固定化脂肪酶等具有非水相催化性能的酶；与游离脂肪酶和采用戊二醛为偶联剂制备得到的固定化脂肪酶相比，使用本发明的固定化酶载体固定化的脂肪酶的酯合成活性、热稳定性、有机溶剂耐受性均都得到显著提高。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN108018272B
公开(公告)日：2020-05-08
申请号：CN201810095370.6
申请日：2018-01-31
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种催化活性提高的酸性脂肪酶突变体及其应用，属于基因工程技术领域。本发明的突变酶ATLLid与将218的Val替换成Trp的突变酶ATLV218W的水解活性显著提高。ATLLid和ATLV218W对对硝基苯酚月桂酸酯p‑nitrophenyl laurate(p‑NPL)的水解活性分别为2.26和3.86倍，对p‑NPL的催化效率kcat/Km值较ATL分别提高了3.85倍和9.46倍。与ATL相比，ATLLid和ATLV218W的最适pH也为5.0，并在pH 2.0‑10.0具有较好的稳定性。
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公开(公告)号：CN108642025A
公开(公告)日：2018-10-12
申请号：CN201810472002.9
申请日：2018-05-17
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种酶活及位置选择性提高的脂肪酶突变体及其应用，属于基因工程技术领域。本发明对野生型脂肪酶进行突变，突变体M8A，L10A，D11A，L12A，P17G的比酶活较野生型酶活提高了1.1-2.4倍，突变体M8A、L10A、T9A的1,3-位置选择性较野生型提高了4.75-5倍。酶活及位置选择性是脂肪酶在结构脂质催化应用中的重要参数，本发明将突变体在人乳脂替代品的催化反应中进行了应用，取得了显著的效果。
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公开(公告)号：CN104087571B
公开(公告)日：2017-11-10
申请号：CN201410263491.9
申请日：2014-06-14
IPC: C12N11/14
Abstract: 本发明公开了一种以含氢硅油疏水改性的二氧化硅为载体的固定化脂肪酶及其制备方法。所述固定化脂肪酶包括以含氢硅油改性的SiO2为载体，以及固定在所述SiO2上的脂肪酶。本发明所述的含氢硅油改性的SiO2载体制备的固定化脂肪酶，与其他方式改性的SiO2载体所制备的固定化脂肪酶相比，在具有较高催化活力及良好稳定性的条件下，其重复使用性得到有效提高，重复使用12次以后，酶活力仍能保持最初的80%以上，具有良好的重复使用性。同时本发明所述的制备方法具有工艺简单，操作成本低。
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公开(公告)号：CN106795520A
公开(公告)日：2017-05-31
申请号：CN201580003335.1
申请日：2015-06-08
Applicant: 江南大学
Abstract: 提供了一种催化活性和比酶活提高的脯氨酰内肽酶突变体，属于酶工程领域。通过将亲本米曲霉脯氨酰内肽酶的催化活性中心附近loop环上的亲水性氨基酸Thr370和/或Thr516用其他小分子量氨基酸或者疏水性氨基酸替换，或者将催化关键位点组氨酸His507附近的Cys508和/或Gln512突变成His508和/或Arg512，得到了一系列突变体。
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公开(公告)号：CN106434512A
公开(公告)日：2017-02-22
申请号：CN201610972819.3
申请日：2016-11-07
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/21 , C12N1/19 , C12N9/18 , C12N15/70 , C12N15/75 , C12N15/81 , C12P7/40 , C12P7/20 , C12R1/21 , C12R1/11 , C12R1/84
Abstract: 本发明公开了一种来源于Aquifex aeolicus菌株的嗜热酯酶及其表达，属于生物工程技术领域。本发明发现了一种新的嗜热酯酶基因，构建3种表达系统，实现高效表达并研究酶学性质。真核表达系统构建：表达载体构建优选载体pPIC9K，并转化毕赤酵母宿主，优选GS115，实现高效表达；原核大肠杆菌表达系统构建：表达载体构建优选载体MBP3，并转化大肠杆菌宿主，优选BL21和Origami2，实现高效表达；原核巨大芽孢杆菌表达系统构建：表达载体构建优选载体pHIS1525，并转化巨大芽孢杆菌宿主，优选YYBm1，实现高效表达。所得重组酶具有酯酶活性以及嗜热性和热稳定性等优点，在高温条件下的工业应用中具有重大潜力。
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