一种高通量的总RNA提取试剂盒及提取方法

    公开(公告)号:CN116286800A

    公开(公告)日:2023-06-23

    申请号:CN202310473060.4

    申请日:2023-04-26

    Abstract: 本发明公开了一种高通量的总RNA提取试剂盒,包括研磨材料、裂解液、绑定液、漂洗液1、漂洗液2和洗脱液;其中,所述研磨材料为钢珠;所述裂解液包括异硫氰酸胍,甘油,十二烷基硫酸钠,醋酸钠以及水饱和酚;所述绑定液包括氯化钠和乙醇;所述漂洗液1包括盐酸胍和乙醇;所述漂洗液2包括三羟甲基氨基甲烷盐酸盐和乙醇;所述洗脱液为无核酸酶水。该试剂及方法适配各类磁棒法全自动化核酸提取设备,具有高通量、高性价比等特点,能够大幅减少人工操作步骤,对于材质坚韧坚硬、RNA含量较低的组织、数量较少的分选细胞等类型复杂的样本,该方法体系RNA提取得率高、完整性好。

    一种检测植物内生菌的引物组、试剂盒和方法

    公开(公告)号:CN115927750A

    公开(公告)日:2023-04-07

    申请号:CN202211116948.4

    申请日:2022-09-14

    Abstract: 本发明涉及锁核苷酸扩增技术(LNA‑PCR)快速检测植物内生细菌的方法和试剂盒,该方法包括以下步骤:(1)以待检植物样品的DNA为模板,采用若干个特异引物对和至少一个通用引物对甲进行第一轮PCR扩增;(2)以第一轮PCR扩增产物为模板,采用至少一个通用引物对乙进行第二轮PCR扩增;(3)取步骤(2)得到的PCR扩增产物,纯化,上机测序,进行植物内生菌的检测;每个特异引物对为根据植物细胞器基因设计的特异性锁核苷酸(LNA)引物;各个特异引物的3’端为磷酸化修饰;通用引物对甲和/或通用引物对乙为细菌16S rDNA的通用引物。本发明提供的方法方便快捷、价格低廉,适于推广应用。

    一种用于靶向杂交捕获的修饰性DNA杂交探针的制备方法

    公开(公告)号:CN105647907B

    公开(公告)日:2019-03-08

    申请号:CN201610124516.6

    申请日:2016-03-04

    Abstract: 本发明公开了一种用于靶向杂交捕获的修饰性DNA杂交探针的制备方法主要方法为:制备DNA模板,PCR扩增,纯化PCR产物;对纯化后的PCR产物进行USER酶切割以及T4 DNA聚合酶末端平滑化,Lambda核酸外切酶水解产物的双链DNA中一条带有5′端磷酸化的单链,从而获得带有生物素标记的单链DNA;磁珠富集法纯化带有生物素标记的单链DNA,得修饰性DNA杂交探针。本发明极大了降低了生产成本、使用范围广,包括任意物种基因组的外显子区域、内含子区域、线粒体区域以及内含子区域等。所获得的DNA杂交探针可以应用于二代测序靶向文库的构建以及测序。

    一种常温保存粪便的保存液、配制方法及应用

    公开(公告)号:CN115323033A

    公开(公告)日:2022-11-11

    申请号:CN202210964020.5

    申请日:2022-08-11

    Abstract: 本发明公开了一种常温保存粪便的保存液包括:乙醇、氯化钠、乙二胺四乙酸二钠、柠檬酸钠、三羟甲基氨基甲烷盐酸盐和去离子水。本发明的保存液采用的无水乙醇可以抑制微生物的活性,使细胞代谢活动暂停;所用的氯化钠可以使核蛋白与核酸分离,游离出核酸;所用的乙二胺四乙酸二钠能够螯合金属离子,从而抑制核酸酶对核酸的破坏;所用的柠檬酸钠缓冲液和三羟甲基氨基甲烷盐酸盐可以提供稳定的pH环境,防止核酸讲解。

    一种制备爬行纲动物单细胞的试剂盒和方法

    公开(公告)号:CN115820535A

    公开(公告)日:2023-03-21

    申请号:CN202211460397.3

    申请日:2022-11-17

    Abstract: 本发明公开了一种制备爬行纲动物单细胞的试剂盒和方法,属于单细胞测序技术领域。所述试剂盒包括CollagenaseⅠ、DNaseⅠ、Dispase和DMEM培养基。本发明的试剂盒和方法填补了爬行纲动物尤其是扬子鳄组织单细胞制备技术的空白。试剂盒成分简单,易于制备,方法有很高的重复性和成功率,能够得到大量高活率、杂质低的单细胞,可用于单细胞测序及更多应用领域。

    一种基于磁珠技术提取真菌/细菌基因组DNA的试剂盒及其方法

    公开(公告)号:CN107964545A

    公开(公告)日:2018-04-27

    申请号:CN201711318096.6

    申请日:2017-12-12

    CPC classification number: C12N15/1013

    Abstract: 本发明公开了一种基于磁珠技术提取真菌/细菌基因组DNA的试剂盒及其方法,属于分子生物学领域。该试剂盒包括裂解液、氯仿、磁珠、磁珠漂洗液及DNA洗脱液五种成分。基因组DNA提取主要步骤包括裂解样本,磁珠吸附,漂洗获得基因组DNA。应用本发明试剂盒的操作方法步骤简单,可以大幅提升对真菌/细菌中的基因组DNA的提取效率,且提取的DNA产物经PCR扩增后的电泳条带清晰完整,重复性好。此外,该试剂盒所需试剂均为常规试剂,成本低,适用于高通量实验。

    一种胆汁微生物DNA提取试剂盒及提取方法

    公开(公告)号:CN117230058A

    公开(公告)日:2023-12-15

    申请号:CN202311203242.6

    申请日:2023-09-15

    Abstract: 本发明提供了一种胆汁微生物DNA提取试剂盒,包括研磨材料、裂解液、漂洗液和洗脱液,其中:研磨材料包括陶瓷研磨珠和玻璃砂;裂解液包括Tris‑HCl、EDTA、巯基乙醇、NaCl、CTAB、PVP以及无菌水;漂洗液包括盐酸胍、Tris‑HCl、异硫氰酸胍、乙醇以及无菌水;洗脱液包括Tris‑HCl和无菌水。该试剂盒中的研磨材料采用玻璃砂搭配研磨珠,更容易使细胞壁破裂,裂解液可以有效抑制酚类物质转化成醌,进而对DNA起到保护作用,应用该试剂盒的提取方法涉及到的试剂简单,易于配制。

    一种土壤微生物DNA的提取试剂盒及提取方法

    公开(公告)号:CN115369111A

    公开(公告)日:2022-11-22

    申请号:CN202210964023.9

    申请日:2022-08-11

    Abstract: 本发明公开了一种土壤微生物DNA的提取试剂盒,包括研磨材料、裂解缓冲液、绑定液、漂洗液a、漂洗液b和洗脱液;其中,所述研磨材料由研磨珠和钢珠组成;所述裂解缓冲液包括CTAB、SDS、NaCl、Tris‑HCl和EDTA;所述绑定液包括磁珠溶液、PEG6000和NaCl;所述漂洗液a包括异硫氰酸胍、盐酸胍、乙醇和Tris‑HCl;所述漂洗液b包括乙醇和Tris‑HCl;所述洗脱液为Tris‑HCl缓冲液。本发明采用独特的研磨体系,更有助于裂解细胞;并且本发明无需使用氯仿、苯酚等有毒有害的化学试剂,依靠绑定液和漂洗液即可达到较好的除杂效果;再者本发明采用磁珠纯化,与相关设备结合使用,可以有效提高DNA的提取效率。

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