一种用于直接检测环境雌激素的转基因斑马鱼的构建方法

    公开(公告)号:CN112852872A

    公开(公告)日:2021-05-28

    申请号:CN202110086614.6

    申请日:2021-01-22

    Abstract: 本发明涉及基因工程与环境科学领域,公开了一种用于直接检测环境雌激素的转基因斑马鱼的构建方法,包括:(1)克隆斑马鱼雌激素响应元件ERE的DNA序列;(2)构建质粒Tol2‑5×ERE‑GFF;(3)胚胎显微注射及功能验证;(4)Founder筛选;(5)纯种筛选培养。按本发明方法所得的转基因斑马鱼中,雌激素能刺激5×ERE响应,激活GFF的表达,而GFF蛋白可与UAS结合,进而驱动绿色荧光蛋白(EGFP)的表达,从而达到方便、直观、动态检测环境雌激素是否存在及其浓度的目的。

    一种肝母细胞瘤类器官的体外培养方法

    公开(公告)号:CN119162106A

    公开(公告)日:2024-12-20

    申请号:CN202411332733.5

    申请日:2024-09-24

    Abstract: 本发明涉及类器官构建技术领域,公开了一种肝母细胞瘤类器官的体外培养方法,步骤包括:制备分散有肝母细胞瘤细胞的凝固胶滴;将包括成纤维细胞生长因子、毛喉素和N‑乙酰‑L‑半胱氨酸在内的生长因子加入到基础培养基内,制成构建培养液;采用构建培养液浸没凝固胶滴,培养得到肝母细胞瘤类器官。本发明中,通过先将肝母细胞瘤细胞制备成凝固胶滴,再采用特定的构建培养液进行体外培养,实现了肝母细胞瘤类器官的成功构建以及后续的稳定传代,且操作简单安全,耗时较短,成本较低,为肝母细胞瘤发病机制以及诊断和治疗手段的研究提供了能够更好地模拟人体真实器官的模型。

    一种心脏类器官的构建方法
    7.
    发明公开

    公开(公告)号:CN119552803A

    公开(公告)日:2025-03-04

    申请号:CN202411574358.5

    申请日:2024-11-06

    Abstract: 本发明涉及类器官构建技术领域,公开了一种心脏类器官的构建方法,包括以下步骤:配制含CD lipid、ITS‑X、L‑AA2P、α‑MTG、胰岛素、FGF2和GSK‑3β抑制剂的培养基I;配制含CD lipid、ITS‑X、L‑AA2P、α‑MTG、胰岛素、FGF2和VEGFA的培养基II;将人诱导多能干细胞团消化后,悬浮于培养基I中,再接种至孔底为U形的超低吸附细胞培养板中,培养36~40 h时,去除培养基I,加入培养基II,培养至形成心脏类器官。在本发明的方法中,依次使用2种培养基进行两个阶段分化培养,即可由消化后离散的人诱导多能干细胞构建得到心脏类器官,简化了心脏类器官的构建过程,缩短了构建时间,并降低了操作难度。

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