一种翘嘴鳜鱼物种鉴定用标准质粒及其应用

    公开(公告)号:CN113061660A

    公开(公告)日:2021-07-02

    申请号:CN202011559566.X

    申请日:2020-12-25

    Abstract: 本发明公开了一种翘嘴鳜鱼物种鉴定用标准质粒及其应用,涉及分子生物学技术领域。标准质粒采用线粒体细胞色素氧化酶I亚基COI基因,应用包含一种嘴鳜鱼物种鉴定用实时荧光PCR检测试剂盒,所述检测试剂盒包含翘嘴鳜鱼特异性质粒分子pUC57‑SC及特异性检测引物和探针,所述检测试剂盒还包含PCR反应液、阳性对照和阴性对照。本发明首次构建了含有翘嘴鳜鱼特异基因序列的标准质粒分子pUC57‑SC,并且本发明构建的质粒分子pUC57‑SC可用于TaqMan探针实时荧光PCR检测翘嘴鳜成鱼、苗种、鱼卵、鱼肉及其加工产品,适用性强,稳定性好,对实际样品的检测结果准确,很好的解决了翘嘴鳜鱼测过程中阳性标准物质缺乏的问题,具有极高的应用价值与市场前景。

    一种基于化学增强的CE-RAA-CRISPR快速检测副溶血弧菌的方法

    公开(公告)号:CN114752656B

    公开(公告)日:2022-12-23

    申请号:CN202210401694.4

    申请日:2022-04-18

    Applicant: 暨南大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于化学增强的CE‑RAA‑CRISPR快速检测副溶血弧菌的方法。本发明将RAA扩增技术与CRISPR系统相结合,优化相关检测条件,筛选最优检测方法,实现痕量食源副溶血弧菌残留的检测。并通过化学试剂的添加进一步增强检测灵敏度。本研究与传统的培养检测方法相比,克服了培养技术周期长,过程繁冗,安全时效性差的难题,与以往的分子检测技术相比,提高了灵敏度和准确性,缩短致病菌检测的时间,以及提升了对多种细菌高通量的检测能力和隐性细菌的鉴定能力。

    基于数字PCR技术检测PRRSV欧洲型病毒的引物和探针及其试剂盒与方法

    公开(公告)号:CN108977577A

    公开(公告)日:2018-12-11

    申请号:CN201810695600.2

    申请日:2018-06-28

    Applicant: 暨南大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于数字PCR技术检测PRRSV欧洲型病毒的引物和探针及其试剂盒与方法。引物和探针,包括上游引物FP、下游引物BP、探针Probe;检测试剂盒包括引物组、2×RT-ddPCR Supermix、无RNA酶的蒸馏水、病毒总RNA提取试剂、阴性对照和阳性对照。其检测方法是通过提取待检样品RNA,利用微滴数字PCR技术对待检样品RNA进行定量检测,通过扩增分析得到的拷贝数判断待检样品是否含有猪繁殖与呼吸综合症欧洲型病毒,并测定其含量。本发明具有精准、灵敏、适用性广,无需依赖标准曲线,可实现绝对定量等优点,可实现猪繁殖与呼吸综合症诊断的早发现、早预防,能有效控制疫情爆发。目前尚未有将数字PCR技术应用于定量检测PRRSV欧洲型病毒的试剂盒。

    基于荧光定量PCR检测翘嘴鳜的引物和探针及其试剂盒与方法

    公开(公告)号:CN108085397A

    公开(公告)日:2018-05-29

    申请号:CN201711230576.7

    申请日:2017-11-29

    Applicant: 暨南大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于定量PCR技术快速鉴别翘嘴鳜的检测引物和探针,以及采用了该引物和探针的检测试剂盒和检测方法。检测引物组包括上游引物FP、下游引物BP和探针;检测试剂盒包括引物液、PCR MIX反应液、去离子水、阴性对照和阳性对照。其检测方法是通过提取待检样品DNA,利用荧光定量PCR技术对待检样品DNA进行快速检测,通过实时扩增曲线判断待检样品是否为翘嘴鳜。本发明具有快速、灵敏、特异、易操作等优点,适于推广应用等优点。

    基于智能恒温扩增技术检测副溶血弧菌的引物组、试剂盒及方法

    公开(公告)号:CN107641659A

    公开(公告)日:2018-01-30

    申请号:CN201710853352.5

    申请日:2017-09-20

    Applicant: 暨南大学

    Abstract: 一种基于智能恒温扩增技术检测副溶血弧菌的引物组、试剂盒和方法。检测引物组包括TP引物、FP引物、BP引物、OP1引物和OP2引物;检测试剂盒包括引物液、反应液、Bst DNA聚合酶、错配结合蛋白、显色剂和对照。其检测方法是通过提取待检DNA,利用具有链置换活性的DNA聚合酶活性,采用四条特异性引物及一种错配结合蛋白,在60~65℃对样品DNA模板进行扩增,可检测到DNA的pg级,其鉴定方式是采用在反应体系中加入 并在ESE-tube scanner仪器检测判断扩增与否,确定待检样品是否含有副溶血弧菌DNA。本发明具有快速高效、操作简便、高特异性、高灵敏度、鉴定简便、适合现场检测等优点,适于推广应用。

    福氏志贺氏菌的特异性分子靶标及其检测方法

    公开(公告)号:CN119351587A

    公开(公告)日:2025-01-24

    申请号:CN202411596470.9

    申请日:2024-11-11

    Applicant: 暨南大学

    Abstract: 本发明公开了福氏志贺氏菌的特异性分子靶标及其检测方法。特异性分子靶标的核苷酸序列如SEQ ID NO.1。特异性分子靶标SEQ ID NO.1的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.5,下游引物其核苷酸序列如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.6。TaqMan探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.4和SEQ ID NO.7所示。本发明对福氏志贺氏菌的检测灵敏度可达到3.9×102CFU/mL,同时具有较好的特异性及重复性,为福氏志贺氏菌的检测提供了一种简便、快捷、高效和低成本的方法。

    利用双水相法制备鱼类肌动蛋白的方法及其应用

    公开(公告)号:CN112390870B

    公开(公告)日:2022-11-11

    申请号:CN201910763301.2

    申请日:2019-08-19

    Applicant: 暨南大学

    Abstract: 本发明公开了一种利用双水相法制备鱼类肌动蛋白的方法及其应用。本发明通过将短链醇、盐和水混合得到双水相体系;然后在双水相体系中加入鱼肉肌原纤维蛋白或是鱼肉肌原纤维蛋白溶液,混匀,得到双水相分离提取体系,当双水相分离提取体系再次出现分层后,取上相,得到鱼类肌动蛋白溶液。本发明还包括用毛细管定量鱼类肌动蛋白的步骤。本发明提取率高,纯度高,从而可用于鱼类肌动蛋白生产或是鱼类肌动蛋白标准品制备。

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