公开(公告)号：CN108998452B

公开(公告)日：2019-11-19

申请号：CN201810756755.2

申请日：2018-07-11

Applicant: 暨南大学

Inventor： 郭祥玉 ,  杨伟莉 ,  李世华 ,  李晓江

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/90 ,  C12N9/22 ,  A01K67/027

Abstract: 本发明提供了一种脑黑质基因敲除快速建立帕金森病动物模型的方法。本发明公开了一种可高效特异敲除PINK1基因的sgRNA；还提供了通过靶向敲除动物中脑黑质的PINK1基因建立帕金森疾病动物模型的方法，具体通过将sgRNA和CRISPR核酸酶注射至动物大脑黒质部位，对PINK1基因造成目标片段缺失；3～4周后可出现明显帕金森疾病典型运动障碍症状，无药物治疗下运动障碍不可恢复。所述方法直接造成黑质部位神经元死亡，无副作用，成模率逾90％，表型稳定，适用性和重复性好，为帕金森病药物筛选、干细胞治疗、基因缺陷修复治疗及PINK1基因缺失的致病机理研究等提供重要模型，具有巨大的经济价值和临床前研究意义。

公开(公告)号：CN116098125A

公开(公告)日：2023-05-12

申请号：CN202310063170.3

申请日：2023-01-17

Applicant: 暨南大学

Inventor： 李邦 ,  杨伟莉 ,  李晓江 ,  罗涯锋 ,  张家玮 ,  涂著池 ,  郭祥玉 ,  殷鹏 ,  李岳锋

IPC: A01K67/027 ,  A61D7/00

Abstract: 本发明公开了一种非人灵长类动物孤独症模型的构建方法，该方法包括以下步骤：在雌性非人灵长类动物妊娠期第55±1天，向其胎儿侧脑室中注射CHD8sgRNA/Cas9病毒，然后正常饲养，待胎儿出生后即获得非人灵长类动物孤独症模型。本发明成功模拟了胚胎期进行CHD8基因突变造成灵长类动物大脑胶质细胞增生的重要病理特征，该方法便于批量建模，而目前并没有利用该建模方法研究CHD8基因突变在灵长类脑中的早期病理特征的相关报道。本发明采用胚胎脑基因编辑造成脑组织中CHD8基因突变,该项研究为深入探究灵长类脑中孤独症脑发育障碍机理、开发孤独症治疗靶点及临床前药物筛选提供了有效模型及重要方法。

公开(公告)号：CN115927186A

公开(公告)日：2023-04-07

申请号：CN202310040346.3

申请日：2023-01-11

Applicant: 暨南大学

Inventor： 何大健 ,  郭祥玉 ,  李晓江 ,  李世华 ,  杨伟莉 ,  殷鹏 ,  潘明天

IPC: C12N5/0797

Abstract: 本发明公开了一种培养基及其在胎猴神经干细胞分离培养中的应用，所述培养基的基底培养基是DMEM/F12，此外还含有1％L‑谷氨酰胺、2％B27无血清添加剂、5‑20ng/mL bFGF、5‑20ng/ml EGF、5‑10μg/mL肝素、0.2mM NEAA、1.5μg/mL CHIR99021、10ng/mL hLIF、0.1mM维C、抗生素适量。本发明培养基中，hLIF可抑制胚胎干细胞分化，促进细胞自我更新，可用于培养胎猴神经干细胞；同时CHIR99021是GSK3抑制剂，起到WNT激活剂的作用。与hLIF结合使用可从人类ES细胞中生成原始神经干细胞并维持神经干细胞自我更新能力和神经原性。

公开(公告)号：CN115927186B

公开(公告)日：2023-07-25

申请号：CN202310040346.3

申请日：2023-01-11

Applicant: 暨南大学

Inventor： 何大健 ,  郭祥玉 ,  李晓江 ,  李世华 ,  杨伟莉 ,  殷鹏 ,  潘明天

IPC: C12N5/0797

Abstract: 本发明公开了一种培养基及其在胎猴神经干细胞分离培养中的应用，所述培养基的基底培养基是DMEM/F12，此外还含有1％L‑谷氨酰胺、2％B27无血清添加剂、5‑20ng/mL bFGF、5‑20ng/ml EGF、5‑10μg/mL肝素、0.2mM NEAA、1.5μg/mL CHIR99021、10ng/mL hLIF、0.1mM维C、抗生素适量。本发明培养基中，hLIF可抑制胚胎干细胞分化，促进细胞自我更新，可用于培养胎猴神经干细胞；同时CHIR99021是GSK3抑制剂，起到WNT激活剂的作用。与hLIF结合使用可从人类ES细胞中生成原始神经干细胞并维持神经干细胞自我更新能力和神经原性。

公开(公告)号：CN108998452A

公开(公告)日：2018-12-14

申请号：CN201810756755.2

申请日：2018-07-11

Applicant: 暨南大学

Inventor： 郭祥玉 ,  杨伟莉 ,  李世华 ,  李晓江

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/90 ,  C12N9/22 ,  A01K67/027

Abstract: 本发明提供了一种脑黑质基因敲除快速建立帕金森病动物模型的方法。本发明公开了一种可高效特异敲除PINK1基因的sgRNA；还提供了通过靶向敲除动物中脑黑质的PINK1基因建立帕金森疾病动物模型的方法，具体通过将sgRNA和CRISPR核酸酶注射至动物大脑黒质部位，对PINK1基因造成目标片段缺失；3～4周后可出现明显帕金森疾病典型运动障碍症状，无药物治疗下运动障碍不可恢复。所述方法直接造成黑质部位神经元死亡，无副作用，成模率逾90％，表型稳定，适用性和重复性好，为帕金森病药物筛选、干细胞治疗、基因缺陷修复治疗及PINK1基因缺失的致病机理研究等提供重要模型，具有巨大的经济价值和临床前研究意义。