公开(公告)号：CN105219777A

公开(公告)日：2016-01-06

申请号：CN201510762262.6

申请日：2015-11-09

Applicant: 暨南大学

Inventor： 齐绪峰 ,  夏景波 ,  徐炯耀 ,  陈卓莹 ,  蔡冬青 ,  刘光辉 ,  毛承舟

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开一种成纤维细胞特异性启动子及其应用。本发明以来源于小鼠胚胎成纤维细胞的基因组DNA为模板，以基因FSP1为靶基因，克隆其5′端的启动子区域，其DNA序列如SEQ ID NO：1所示。并将其克隆到pMSC-GDLuc载体中，进而构建pmFSP1-GDLuc荧光报告基因载体。细胞功能研究表明，本发明所构建报告基因载体pmFSP1-GDLuc能够特异性地在成纤维细胞中高效表达，而在非成纤维细胞中仅有极少量的表达。因此，本发明成功克隆到成纤维细胞特异性启动子mFSP1，并成功构建了该启动子的荧光报告基因载体，为细胞重编程、细胞谱系追踪及条件性基因表达调控研究提供了有效的材料及研究工具。

公开(公告)号：CN104372027A

公开(公告)日：2015-02-25

申请号：CN201410559278.2

申请日：2014-10-20

Applicant: 暨南大学

Inventor： 齐绪峰 ,  夏景波 ,  陈卓莹 ,  蔡冬青 ,  吴彩红 ,  王健欢 ,  毛承舟 ,  刘光辉

IPC: C12N15/867 ,  C12N15/66

Abstract: 本发明公开一种慢病毒表达载体pLOX-CMV-E/P及其构建与应用。所述载体在CMV启动子下游插入多克隆位点，能够被SpeI、BclI、EcoRI、PacI、XhoI、SalI及BamHI共7个限制性内切酶所识别。所述载体的应用包括：将目的基因插入到多克隆位点，实现目的基因的稳定表达；利用EF1α启动子驱动的EGFP及Puromycin抗性基因进行荧光示踪及抗药性筛选；利用已在3′LTR区域插入的LoxP位点及慢病毒的转录与反转录特性，在Cre重组酶表达的情况下实现外源基因及报告基因的有效删除。本发明的载体可通过与pCMVR8.74及pMD2.G载体共同转染293T细胞，实现慢病毒颗粒的包装。