一种基于尺寸排阻层析与超滤结合的细胞外囊泡分离方法

    公开(公告)号:CN111961637A

    公开(公告)日:2020-11-20

    申请号:CN202010649797.3

    申请日:2020-07-08

    Applicant: 暨南大学

    Abstract: 本发明公开了一种小细胞外囊泡分离方法,优化了尺寸排阻层析使用的固定相填料,并与超滤法结合作为sEVs的分离方法,克服了现有小细胞外囊泡分离方法中分离过程耗时长、需要专有设备、存在高丰度蛋白质污染、引入其他杂质、产物(sEVs)浓度较低的技术不足。本发明方法不需要采用复杂的仪器设备,大大降低了实验成本,具有更好的普及推广的意义。

    慢病毒表达载体pLOX-CMV-E/P及其构建与应用

    公开(公告)号:CN104372027A

    公开(公告)日:2015-02-25

    申请号:CN201410559278.2

    申请日:2014-10-20

    Applicant: 暨南大学

    Abstract: 本发明公开一种慢病毒表达载体pLOX-CMV-E/P及其构建与应用。所述载体在CMV启动子下游插入多克隆位点,能够被SpeI、BclI、EcoRI、PacI、XhoI、SalI及BamHI共7个限制性内切酶所识别。所述载体的应用包括:将目的基因插入到多克隆位点,实现目的基因的稳定表达;利用EF1α启动子驱动的EGFP及Puromycin抗性基因进行荧光示踪及抗药性筛选;利用已在3′LTR区域插入的LoxP位点及慢病毒的转录与反转录特性,在Cre重组酶表达的情况下实现外源基因及报告基因的有效删除。本发明的载体可通过与pCMVR8.74及pMD2.G载体共同转染293T细胞,实现慢病毒颗粒的包装。

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