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公开(公告)号:CN104372027A
公开(公告)日:2015-02-25
申请号:CN201410559278.2
申请日:2014-10-20
Applicant: 暨南大学
IPC: C12N15/867 , C12N15/66
Abstract: 本发明公开一种慢病毒表达载体pLOX-CMV-E/P及其构建与应用。所述载体在CMV启动子下游插入多克隆位点,能够被SpeI、BclI、EcoRI、PacI、XhoI、SalI及BamHI共7个限制性内切酶所识别。所述载体的应用包括:将目的基因插入到多克隆位点,实现目的基因的稳定表达;利用EF1α启动子驱动的EGFP及Puromycin抗性基因进行荧光示踪及抗药性筛选;利用已在3′LTR区域插入的LoxP位点及慢病毒的转录与反转录特性,在Cre重组酶表达的情况下实现外源基因及报告基因的有效删除。本发明的载体可通过与pCMVR8.74及pMD2.G载体共同转染293T细胞,实现慢病毒颗粒的包装。
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公开(公告)号:CN103952410B
公开(公告)日:2016-02-10
申请号:CN201410178685.9
申请日:2014-04-29
Applicant: 暨南大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/867 , C12N15/66 , C12Q1/68
Abstract: 本发明涉及一种shRNA,特别涉及一种有效抑制大鼠FoxO3a基因表达的shRNA及其应用。编码所述shRNA的DNA序列,如下所示:5’-GGAACTTCACTGGTGCTAAGCGCAAGAGGCTTAGCACCAGTGAAGTTC C-3’,所述的GCAAGAG为loop序列。所述的有效抑制大鼠FoxO3a基因表达的shRNA的应用包括将所述的shRNA构建于慢病毒载体上,得到含有所述shRNA的重组载体;将含有所述shRNA的重组载体作用于大鼠细胞,达到抑制大鼠FoxO3a基因表达的目的。该shRNA能有效抑制大鼠FoxO3a基因在mRNA及蛋白水平的表达。
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公开(公告)号:CN103965345A
公开(公告)日:2014-08-06
申请号:CN201410178820.X
申请日:2014-04-29
Applicant: 暨南大学
CPC classification number: C07K14/4702
Abstract: 本发明公开了一种核转录因子突变体rFoxO3a-MTSS及其重组载体与应用。所述核转录因子突变体rFoxO3a-MTSS是通过将野生型大鼠FoxO3a肽链中第32位苏氨酸、252位丝氨酸、314位丝氨酸同时替换为丙氨酸。其中,所述突变体rFoxO3a-MTSS的氨基酸序列SEQ IDNO.1所示;编码该突变体的核苷酸序列如SEQ IDNO.2所示。本发明公开的突变体rFoxO3a-MTSS相对野生型rFoxO3a而言,具有能够避免被其上游调控因子Akt磷酸化的特点,能够在体内保持持续活化状态,对研究FoxO3a基因的功能及FoxO3a基因有关疾病的靶向治疗均具有重要的科学意义与潜在应用价值。
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公开(公告)号:CN103952410A
公开(公告)日:2014-07-30
申请号:CN201410178685.9
申请日:2014-04-29
Applicant: 暨南大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/867 , C12N15/66 , C12Q1/68
Abstract: 本发明涉及一种shRNA,特别涉及一种有效抑制大鼠FoxO3a基因表达的shRNA及其应用。编码所述shRNA的DNA序列,如下所示:5’-GGAACTTCACTGGTGCTAAGCGCAAGAGGCTTAGCACCAGTGAAGTTC C-3’,所述的GCAAGAG为loop序列。所述的有效抑制大鼠FoxO3a基因表达的shRNA的应用包括将所述的shRNA构建于慢病毒载体上,得到含有所述shRNA的重组载体;将含有所述shRNA的重组载体作用于大鼠细胞,达到抑制大鼠FoxO3a基因表达的目的。该shRNA能有效抑制大鼠FoxO3a基因在mRNA及蛋白水平的表达。
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