公开(公告)号：CN103497998B

公开(公告)日：2016-04-13

申请号：CN201310455621.4

申请日：2013-09-30

Applicant: 新疆农业大学

Inventor： 韩剑 ,  罗明 ,  张祥林 ,  何贵伦 ,  殷智婷

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04

Abstract: 本发明公开了一种枣疯病植原体环介导等温扩增快速检测方法，本发明针对枣疯病植原体16S rDNA基因保守序列的6个区域设计4条特异引物，利用一种链置换DNA聚合酶在等温62℃左右，几十分钟即可实现核酸的高效扩增；4条引物对靶序列的6个特异序列区域的识别，保证了LAMP扩增的高度特异性；LAMP不需要模板的热变性，长时间温度循环，在等温条件下扩增，不会因温度改变而造成时间的浪费，使反应速度可提高30-50％；反应结束后，可直接通过肉眼观察反应管颜色变化，或通过凝胶电泳判断检测结果；该技术对枣疯病植原体的检测特异性强，具有快速、高效、仪器要求简易，操作简便，成本低，易于在基层推广使用的特点。

公开(公告)号：CN103497998A

公开(公告)日：2014-01-08

申请号：CN201310455621.4

申请日：2013-09-30

Applicant: 新疆农业大学

Inventor： 韩剑 ,  罗明 ,  张祥林 ,  何贵伦 ,  殷智婷

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04

Abstract: 本发明公开了一种枣疯病植原体环介导等温扩增快速检测方法，本发明针对枣疯病植原体16S rDNA基因保守序列的6个区域设计4条特异引物，利用一种链置换DNA聚合酶在等温62℃左右，几十分钟即可实现核酸的高效扩增；4条引物对靶序列的6个特异序列区域的识别，保证了LAMP扩增的高度特异性；LAMP不需要模板的热变性，长时间温度循环，在等温条件下扩增，不会因温度改变而造成时间的浪费，使反应速度可提高30-50％；反应结束后，可直接通过肉眼观察反应管颜色变化，或通过凝胶电泳判断检测结果；该技术对枣疯病植原体的检测特异性强，具有快速、高效、仪器要求简易，操作简便，成本低，易于在基层推广使用的特点。

公开(公告)号：CN102925589B

公开(公告)日：2014-04-16

申请号：CN201210451385.4

申请日：2012-11-13

Applicant: 新疆农业大学

Inventor： 罗明 ,  殷智婷 ,  韩剑 ,  周国辉 ,  张祥林 ,  董代幸

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68

Abstract: 本发明公开了一种建立李属坏死环斑病毒的逆转录环介导等温扩增检测方法，本发明针对目的基因PNRSV的6个区域设计4条特异引物，利用一种链置换DNA聚合酶在等温65℃左右，几十分钟即可实现核酸的高效扩增；4条引物对靶序列的6个特异序列区域的识别，保证了LAMP扩增的高度特异性；LAMP不需要模板的热变性，长时间温度循环，在等温条件下扩增，不会因温度改变而造成时间的浪费，使反应速度可提高30-50％；根据反应管中有无肉眼可见的焦磷酸镁白色沉淀，作为判断核酸是否扩增的简单方法；提供的方法对PNRSV的检测特异性强，具有快速、高效、仪器要求简易，操作简便，成本低，易于在基层推广使用的特点。

公开(公告)号：CN102925589A

公开(公告)日：2013-02-13

申请号：CN201210451385.4

申请日：2012-11-13

Applicant: 新疆农业大学

Inventor： 罗明 ,  殷智婷 ,  韩剑 ,  周国辉 ,  张祥林 ,  董代幸

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68

Abstract: 本发明公开了一种建立李属坏死环斑病毒的逆转录环介导等温扩增检测方法，本发明针对目的基因PNRSV的6个区域设计4条特异引物，利用一种链置换DNA聚合酶在等温65℃左右，几十分钟即可实现核酸的高效扩增；4条引物对靶序列的6个特异序列区域的识别，保证了LAMP扩增的高度特异性；LAMP不需要模板的热变性，长时间温度循环，在等温条件下扩增，不会因温度改变而造成时间的浪费，使反应速度可提高30-50％；根据反应管中有无肉眼可见的焦磷酸镁白色沉淀，作为判断核酸是否扩增的简单方法；提供的方法对PNRSV的检测特异性强，具有快速、高效、仪器要求简易，操作简便，成本低，易于在基层推广使用的特点。