公开(公告)号：CN103497998B

公开(公告)日：2016-04-13

申请号：CN201310455621.4

申请日：2013-09-30

Applicant: 新疆农业大学

Inventor： 韩剑 ,  罗明 ,  张祥林 ,  何贵伦 ,  殷智婷

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04

Abstract: 本发明公开了一种枣疯病植原体环介导等温扩增快速检测方法，本发明针对枣疯病植原体16S rDNA基因保守序列的6个区域设计4条特异引物，利用一种链置换DNA聚合酶在等温62℃左右，几十分钟即可实现核酸的高效扩增；4条引物对靶序列的6个特异序列区域的识别，保证了LAMP扩增的高度特异性；LAMP不需要模板的热变性，长时间温度循环，在等温条件下扩增，不会因温度改变而造成时间的浪费，使反应速度可提高30-50％；反应结束后，可直接通过肉眼观察反应管颜色变化，或通过凝胶电泳判断检测结果；该技术对枣疯病植原体的检测特异性强，具有快速、高效、仪器要求简易，操作简便，成本低，易于在基层推广使用的特点。

公开(公告)号：CN103497998A

公开(公告)日：2014-01-08

申请号：CN201310455621.4

申请日：2013-09-30

Applicant: 新疆农业大学

Inventor： 韩剑 ,  罗明 ,  张祥林 ,  何贵伦 ,  殷智婷

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04

Abstract: 本发明公开了一种枣疯病植原体环介导等温扩增快速检测方法，本发明针对枣疯病植原体16S rDNA基因保守序列的6个区域设计4条特异引物，利用一种链置换DNA聚合酶在等温62℃左右，几十分钟即可实现核酸的高效扩增；4条引物对靶序列的6个特异序列区域的识别，保证了LAMP扩增的高度特异性；LAMP不需要模板的热变性，长时间温度循环，在等温条件下扩增，不会因温度改变而造成时间的浪费，使反应速度可提高30-50％；反应结束后，可直接通过肉眼观察反应管颜色变化，或通过凝胶电泳判断检测结果；该技术对枣疯病植原体的检测特异性强，具有快速、高效、仪器要求简易，操作简便，成本低，易于在基层推广使用的特点。