公开(公告)号：CN112143754A

公开(公告)日：2020-12-29

申请号：CN202011055355.2

申请日：2020-09-30

Applicant: 扬州大学

Inventor： 陈振海 ,  鹿田原 ,  牟春晓

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/66 ,  C12N7/00 ,  G01N33/569 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明属于分子生物学领域，涉及盖塔病毒的全长基因组感染性克隆及其构建方法和应用，本发明针对HuN1株盖塔病毒全长基因序列设计特异性引物，并在上下游分别插入相应的酶切位点，通过RT‑PCR方法扩增HuN1株GETV基因片段，逐步克隆到质粒载体pACYC‑177上，得到病毒全长基因组感染性克隆pAC‑GETV。将该感染性克隆转染至真核细胞BHK21，成功拯救出病毒rGETV，其与亲本病毒具有相似的生长特性，并且可以在BHK21上连续传代至少6代。本发明所述感染性克隆有利于甲病毒载体疫苗的研究，对于改善甲病毒载体疫苗具有一定的意义。

公开(公告)号：CN112143754B

公开(公告)日：2021-05-18

申请号：CN202011055355.2

申请日：2020-09-30

Applicant: 扬州大学

Inventor： 陈振海 ,  鹿田原 ,  牟春晓

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/66 ,  C12N7/00 ,  G01N33/569 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明属于分子生物学领域，涉及盖塔病毒的全长基因组感染性克隆及其构建方法和应用，本发明针对HuN1株盖塔病毒全长基因序列设计特异性引物，并在上下游分别插入相应的酶切位点，通过RT‑PCR方法扩增HuN1株GETV基因片段，逐步克隆到质粒载体pACYC‑177上，得到病毒全长基因组感染性克隆pAC‑GETV。将该感染性克隆转染至真核细胞BHK21，成功拯救出病毒rGETV，其与亲本病毒具有相似的生长特性，并且可以在BHK21上连续传代至少6代。本发明所述感染性克隆有利于甲病毒载体疫苗的研究，对于改善甲病毒载体疫苗具有一定的意义。