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公开(公告)号:CN118406804A
公开(公告)日:2024-07-30
申请号:CN202410643899.2
申请日:2024-05-23
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了一种鉴别非洲猪瘟病毒自然重组毒株的引物探针组合及其检测试剂盒。所述引物探针组合包括第一引物探针组合及第二引物探针组合,第一引物探针组合的核苷酸序列如SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.3所示,第二引物探针组合的核苷酸序列如SEQ ID NO.4~SEQ ID NO.6所示。本发明的引物探针组合,针对非洲猪瘟病毒自然重组毒株的B602L基因和非洲猪瘟病毒B646L基因设计,同时实现对非洲猪瘟病毒的定性和非洲猪瘟病毒自然重组毒株的鉴别,特异性强,灵敏度高。用于iiPCR检测,可实现现场鉴别非洲猪瘟病毒自然重组毒株,检测时间短,实用价值高,特别适用于养殖场、基层兽医部门等非实验室环境下的现场检测。
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公开(公告)号:CN114164300B
公开(公告)日:2023-10-31
申请号:CN202111556812.0
申请日:2021-12-18
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明提供了一种可快速鉴别ASFV基因I型与基因II型的iiPCR试剂盒及其使用方法,iiPCR试剂盒包括iiPCR扩增液、阳性对照和阴性对照,所述iiPCR扩增液包括引物探针组,所述引物探针组所述包括第一引物对、第一探针、第二引物对和第二探针。本发明针对临床中血清和全血样品,无需核酸提取,血清可直接作为iiPCR模板,全血样品仅需瞬时离心取上清作为模板,即可完成iiPCR检测,且不影响其特异性与敏感性。
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公开(公告)号:CN115838761A
公开(公告)日:2023-03-24
申请号:CN202210898603.2
申请日:2022-07-28
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/85 , C12N15/113 , C12N15/65 , C12N15/66 , C12Q1/66
Abstract: 本发明涉及病毒学技术领域,具体涉及一伪狂犬病毒IE180基因启动子活性报告质粒、检测试剂盒及其检测方法和应用,所述基因启动子活性报告质粒是通过PCR扩增得到伪狂犬病毒IE180基因启动子序列,并克隆至pGL3‑Basic载体构建而成,所述伪狂犬病毒IE180基因启动子活性报告质粒序列如SEQ ID NO.1所示。本发明利用萤火虫荧光素酶报告基因构建伪狂犬病毒IE180基因启动子活性报告质粒,通过双荧光素酶检测系统,检测IE180基因启动子活性;该检测方法可以用于筛选IE180基因转录因子。
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公开(公告)号:CN114934137A
公开(公告)日:2022-08-23
申请号:CN202210646146.8
申请日:2022-06-08
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及动物病毒学技术领域,具体涉及一种可快速鉴别猪群腹泻症候群病原的iiPCR试剂盒及其使用方法,试剂盒包括iiPCR扩增液,所述iiPCR扩增液包括Taq DNA聚合酶、MMLV反转酶和引物探针组,所述引物探针组包括第一引物对及第一探针、第二引物对及第二探针、第三引物对及第三探针、第四引物对及第四探针。本发明针对临床中猪的肠道内容物、粪便、肛门拭子等样品,经核酸提取,可直接将RNA作为模板,即可完成iiPCR检测,特异性良好,且灵敏度与荧光定量PCR相当。
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公开(公告)号:CN113912681A
公开(公告)日:2022-01-11
申请号:CN202111277918.7
申请日:2021-10-30
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/01 , G01N33/569 , G01N33/68
Abstract: 本发明提供了一种猪圆环病毒4型Cap蛋白检测优势肽段及其应用和试剂盒,所述猪圆环病毒4型Cap蛋白检测优势肽段是对圆环病毒4型Cap蛋白氨基酸序列进行分析,进一步与猪圆环病毒1‑3型Cap蛋白序列比对筛选,并通过猪圆环病毒4型阳性血清反应筛选得到,所述猪圆环病毒4型Cap蛋白检测优势肽段的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明通过兼顾特异性及反应灵敏度的筛选手段,得到的猪圆环病毒4型Cap蛋白检测优势肽段具有良好反应原性,可用于临床血清样品中PCV4的抗体检测,能够快速、特异、高通量、高灵敏度地用于PCV4血清学检测,能够实现猪场中PCV4的流行病学监测。
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公开(公告)号:CN118421835A
公开(公告)日:2024-08-02
申请号:CN202410643898.8
申请日:2024-05-23
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了一种可鉴别非洲猪瘟病毒基因I型毒株、基因II型毒株以及自然重组毒株的引物探针组合及其应用,所述引物探针组合包括针对非洲猪瘟病毒自然重组毒株B602L基因设计的第一特异性引物对和探针、针对非洲猪瘟病毒基因I型毒株CD2v基因设计的第二特异性引物对和探针、针对非洲猪瘟病毒基因II型毒株MGF360‑9L基因设计的第三特异性引物对和探针。所述引物和探针核苷酸序列如SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.9所示。本发明仅需一次qPCR扩增即可鉴别出待测样品是否为非洲猪瘟病毒基因I型或者基因II型毒株以及是否为非洲猪瘟病毒自然重组毒株。本发明具备检测效率高、时间短、成本低等优势,对于重大动物疫病的防控以及临床样品的快速、精准检测具有较大的意义。
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公开(公告)号:CN117070561A
公开(公告)日:2023-11-17
申请号:CN202310990340.2
申请日:2023-08-08
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了一种猪繁殖与呼吸综合征重组毒株、其构建方法及应用。所述重组病毒基因片段具体包括PRRSV JS2021NADC34毒株的5’UTR基因、编码非结构蛋白基因、3’UTR‑polyA基因和根据PRRSV CH‑1R毒株的编码结构蛋白的基因设计的核苷酸序列如SEQ ID NO:16所示的基因,所述PRRSV JS2021NADC34毒株的编码非结构蛋白基因包括ORF1a和ORF1b基因;PRRSV CH‑1R毒株编码结构蛋白的基因包括ORF2a、ORF2b、ORF3、ORF4、ORF5、ORF5a、ORF6和ORF7基因。本发明公开的重组猪繁殖与呼吸综合征重组毒株解决了NADC34无法在Marc145细胞上增殖的问题,该病毒能够高效稳定增殖、具有较高的滴度和免疫原性、并可区别于野生毒株。本发明公开的重组毒株作为疫苗株使用时,表现出较好的安全性和免疫攻毒保护效果,具有广泛的交叉保护效果,保护率为100%。
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公开(公告)号:CN113912681B
公开(公告)日:2023-03-21
申请号:CN202111277918.7
申请日:2021-10-30
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/01 , G01N33/569 , G01N33/68
Abstract: 本发明提供了一种猪圆环病毒4型Cap蛋白检测优势肽段及其应用和试剂盒,所述猪圆环病毒4型Cap蛋白检测优势肽段是对圆环病毒4型Cap蛋白氨基酸序列进行分析,进一步与猪圆环病毒1‑3型Cap蛋白序列比对筛选,并通过猪圆环病毒4型阳性血清反应筛选得到,所述猪圆环病毒4型Cap蛋白检测优势肽段的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明通过兼顾特异性及反应灵敏度的筛选手段,得到的猪圆环病毒4型Cap蛋白检测优势肽段具有良好反应原性,可用于临床血清样品中PCV4的抗体检测,能够快速、特异、高通量、高灵敏度地用于PCV4血清学检测,能够实现猪场中PCV4的流行病学监测。
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公开(公告)号:CN115725783A
公开(公告)日:2023-03-03
申请号:CN202210892957.6
申请日:2022-07-27
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及猪繁殖与呼吸综合征病毒检测技术领域,具体涉及一种鉴别NADC34PRRSV的TaqMan实时荧光PCR检测试剂盒及其使用方法,检测试剂盒包括PCR扩增液,所述PCR扩增液包括第一引物对和探针,所述第一引物对包括如SEQ ID NO.1所示的上游引物NADC34‑F、如SEQ ID NO.2所示的下游引物NADC34‑R,所述探针为如SEQ ID NO.3所示的NADC34‑P。本发明可有效诊断类NADC34PRRSV毒株,可有效避免临床中将类NADC34PRRSV误诊为类NADC30PRRSV,补充当前PRRSV分型检测的不足,可用于PRRSV的流行病学调查。
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公开(公告)号:CN114058740A
公开(公告)日:2022-02-18
申请号:CN202111556818.8
申请日:2021-12-18
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明提供了一种可鉴别基因I型与基因II型非洲猪瘟病毒的荧光PCR扩增引物探针组及检测试剂盒,所述引物探针组包括第一引物对、第一探针、第二引物对和第二探针,所述第一引物对包括如SEQ ID NO.1所示的基因I型上游引物和如SEQ ID NO.2所示的基因I型下游引物,所述第一探针包括如SEQ ID NO.3所示的基因I型探针。本发明的引物探针组能够有效鉴别基因I型和II型两类非洲猪瘟病毒,其包括两对特异性最强、灵敏度最高的引物组合和两条探针。
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