公开(公告)号：CN118547009A

公开(公告)日：2024-08-27

申请号：CN202410695195.X

申请日：2024-05-31

Applicant: 扬州大学

Inventor： 李向东 ,  叶正琴 ,  朱振邦 ,  王文强 ,  文威

IPC: C12N15/867 ,  C12N7/01 ,  C12N15/40 ,  C12N5/10 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种猪繁殖与呼吸综合征病毒生产用细胞系。所述重组载体包括重组基因片段，重组基因片段具体包括PRRSV JS2021NADC34毒株的Nsp4基因、Nsp6基因、Nsp12基因，以及IRES基因和P2A基因；分别包括Nsp4、IRES‑Nsp6和P2A‑Nsp123段基因片段，所述的Nsp4基因片段的核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示，IRES‑Nsp6基因片段的核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示，P2A‑Nsp12基因片段的核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示。本发明公开的细胞株解决了PRRSV在Marc145细胞上增殖滴度低的问题，并通过慢病毒感染的的方式获得了稳定表达Nsp4基因、Nsp6基因和Nsp12基因的细胞株，该细胞株具有与亲本一致的增殖特性。本发明公开的重组细胞株作为疫苗生产用细胞株使用时，表现出较好的安全性，对与毒株的传代表现出较高的遗传稳定性，可以有效避免毒力返强的潜在风险。

公开(公告)号：CN117070561A

公开(公告)日：2023-11-17

申请号：CN202310990340.2

申请日：2023-08-08

Applicant: 扬州大学

Inventor： 李向东 ,  叶正琴 ,  朱振邦 ,  刘金彪

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/64 ,  C12N15/40 ,  C12N7/00 ,  C12N7/04 ,  A61K39/12 ,  A61P31/14 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种猪繁殖与呼吸综合征重组毒株、其构建方法及应用。所述重组病毒基因片段具体包括PRRSV JS2021NADC34毒株的5’UTR基因、编码非结构蛋白基因、3’UTR‑polyA基因和根据PRRSV CH‑1R毒株的编码结构蛋白的基因设计的核苷酸序列如SEQ ID NO:16所示的基因，所述PRRSV JS2021NADC34毒株的编码非结构蛋白基因包括ORF1a和ORF1b基因；PRRSV CH‑1R毒株编码结构蛋白的基因包括ORF2a、ORF2b、ORF3、ORF4、ORF5、ORF5a、ORF6和ORF7基因。本发明公开的重组猪繁殖与呼吸综合征重组毒株解决了NADC34无法在Marc145细胞上增殖的问题，该病毒能够高效稳定增殖、具有较高的滴度和免疫原性、并可区别于野生毒株。本发明公开的重组毒株作为疫苗株使用时，表现出较好的安全性和免疫攻毒保护效果，具有广泛的交叉保护效果，保护率为100％。