公开(公告)号：CN117511943A

公开(公告)日：2024-02-06

申请号：CN202311478667.8

申请日：2023-11-08

Applicant: 扬州大学

Inventor： 刘鹏 ,  张韬

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/82 ,  A01H6/46

Abstract: 本发明公开了一种内含子DNA及其在增强基因表达能力中的应用。内含子DNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。SUI1(LOC_Os07g34589)基因的启动子能启动报告GFP基因表达，当启动子和5’UTR区的内含子共同存在时，GFP表达上升，荧光信号显著增强，说明1049bp内含子能显著促进基因表达。本发明确定了SUI1基因5’UTR区的1049bp内含子序列，并在瞬时转化体系中，验证了该内含子增强基因表达的功能。

公开(公告)号：CN111549026B

公开(公告)日：2023-02-28

申请号：CN202010309791.1

申请日：2020-04-17

Applicant: 扬州大学

Inventor： 张韬 ,  马佳琦 ,  刘鹏

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/65 ,  C12N15/82

Abstract: 本发明公开了一种水稻增强子及鉴定方法。该水稻增强子为622bp的DNA分子，序列如SEQ ID NO.1。构建OsENHANCER1 reporter载体、正对照载体CaMV35S‑GFP reporter(SEQ ID NO.2)和负对照载体Enhancerless reporter(SEQ ID NO.3)，通过水稻原生质体转化进行鉴定。本发明增强子在基因转录过程中发挥重要作用，鉴定方法快速，便捷。

公开(公告)号：CN112522265B

公开(公告)日：2022-06-14

申请号：CN202011333330.4

申请日：2020-11-24

Applicant: 扬州大学

Inventor： 刘鹏 ,  张韬 ,  刘冠卿

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/10 ,  C12N15/82 ,  C12N15/65 ,  C12Q1/6897

Abstract: 本发明公开了一种具有增强子功能的落叶松DNA分子、获取及鉴定方法。增强子DNA序列如SEQ ID NO.1。用特异引物以日本落叶松的基因组DNA为模板，扩增得到574bp的扩增产物，即得。mini35s启动子单独不能启动的报告基因GFP表达，由于增强子可远距离促进转录的特征，当有功能的增强子插入该载体中后，其可以促进荧光蛋白转录，从而观察到荧光。本发明提供的落叶松增强子序列，本质是DNA分子，574bp，能够促进转录。

公开(公告)号：CN112481260B

公开(公告)日：2022-06-14

申请号：CN202011332979.4

申请日：2020-11-24

Applicant: 扬州大学

Inventor： 刘鹏 ,  张韬 ,  刘冠卿

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/10 ,  G01N21/64

Abstract: 本发明公开了一种具有启动子功能的落叶松DNA分子、获取及鉴定方法。启动子DNA序列如SEQ ID NO.1。用特异引物以日本落叶松(Larix kaempferi)的基因组DNA为模板，扩增得到1179bp的扩增产物，即得。将该段DNA分子启动GFP荧光蛋白基因表达，在荧光显微镜下可观察到荧光，证实该序列有功能，反之，则不能。本发明提供的落叶松启动子序列，本质是DNA分子，1179bp，能够启动转录。

公开(公告)号：CN114292845A

公开(公告)日：2022-04-08

申请号：CN202111628276.0

申请日：2021-12-28

Applicant: 扬州大学

Inventor： 刘鹏 ,  张韬

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/82 ,  A01H5/00 ,  A01H6/46

Abstract: 本发明公开了一种强活性的水稻启动子序列及验证方法，基因序列如SEQ ID NO.1。方法包括：(1)OsUBQ启动子序列扩增，构建OsUBQ驱动GFP的表达载体；(2)Ubi1启动子序列扩增，构建由Ubi1驱动的GFP表达载体；(3)使用CaMV35S启动子为正对照；(4)水稻原生质体制备与转化；(5)在瞬时表达系统通过荧光强度评估三个启动子CaMV35S、OsUBQ和Ubi1活性。本发明的水稻启动子序列，本质是DNA分子，1405bp，能够启动基因的表达并且活性更强。

公开(公告)号：CN113736781A

公开(公告)日：2021-12-03

申请号：CN202110853869.0

申请日：2021-07-27

Applicant: 扬州大学

Inventor： 刘鹏 ,  张韬

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/82 ,  C12N15/65 ,  C12Q1/686

Abstract: 本发明公开了一种水稻内含子及其活性鉴定方法，水稻内含子的序列如SEQ ID NO.1，通过构建Pro::GFP、Pro+Intron+UTR::GFP、Pro+UTR::GFP三个载体来鉴定内含子的活性，结果显示，本发明的内含子DNA分子，104bp，对转录具有较好的增强效果。

公开(公告)号：CN111269974A

公开(公告)日：2020-06-12

申请号：CN202010159715.7

申请日：2020-03-09

Applicant: 南京林业大学 ,  扬州大学

Inventor： 席梦利 ,  张韬 ,  尚大鑫

IPC: C12Q1/6879 ,  C12Q1/6895 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一段小叶杨雄株特异的基因组DNA序列及其应用，属于生物技术领域。通过对小叶杨雌株和雄株基因组进行DNA高通量测序和生物信息学分析，筛选出一段小叶杨雄株特异的基因组DNA序列。依据该小叶杨雄株特异的基因组DNA序列设计引物，以小叶杨和美洲黑杨的基因组DNA为模板，通过PCR扩增结果判断所检测杨树的性别，琼脂糖凝胶电泳检测出目标条带的为雄株，缺失该目标条带的为雌株。本发明提供的小叶杨雄株特异的基因组DNA序列及鉴定杨树植株性别的方法可以高效、准确地鉴定小叶杨和美洲黑杨的性别，在杨树性别鉴定及性别决定的分子机制研究中具有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN119955808A

公开(公告)日：2025-05-09

申请号：CN202510159025.4

申请日：2025-02-13

Applicant: 扬州大学

Inventor： 杨晴晴 ,  叶莹 ,  张韬 ,  吴越超 ,  赵冬生

IPC: C12N15/29 ,  C12N15/82 ,  A01H5/00 ,  A01H6/46

Abstract: 本发明提供了一种水稻OsGIF1或DEP1基因上游的uORF元件及用途，所述调控水稻OsGIF1或DEP1基因表达的uORF元件核苷酸序列如SEQ ID NO.1‑4任意一种或多种所示，其中OsGIF1‑uORF1、OsGIF1‑uORF2可作为OsGIF1基因的表达调控元件，核苷酸序列如SEQ ID NO.1和2所示；DEP1‑uORF1、DEP1‑uORF2可作为DEP1基因的表达调控元件，核苷酸序列如SEQ ID NO.3和4所示。本发明uORF调控元件可分别用于调节水稻OsGIF1或DEP1基因的蛋白表达水平，改良了植株生长发育，将其应用于水稻品种的遗传改良，具有重要的育种价值。

公开(公告)号：CN114774420B

公开(公告)日：2023-09-22

申请号：CN202210454378.3

申请日：2022-04-27

Applicant: 扬州大学

Inventor： 刘鹏 ,  吴怡 ,  庞天添 ,  张韬

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/82

Abstract: 本发明公开了一种水稻增强子及基于CRISPR/Cas9技术评估水稻增强子活性的方法，水稻增强子，序列如SEQ ID NO.1。获取增强子，长度为461 bp；LOC_Os07g34589基因的启动子中，分离得到62 bp mini启动子序列；构建负对照载体，使用LOC_Os07g34589基因的两个mini启动子序列反向连接，分别驱动Cas9蛋白和sgRNA表达；构建增强子检测载体，在上述负对照载体中，两个mini启动子中间插入igENH1增强子序列；水稻原生质体的制备与转化；转化后通过分析增强子活性。所述水稻增强子具有较好的增强转录效果。

公开(公告)号：CN112553197B

公开(公告)日：2022-06-14

申请号：CN202011332993.4

申请日：2020-11-24

Applicant: 扬州大学

Inventor： 张韬 ,  刘鹏 ,  刘冠卿

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/10 ,  C12N15/82 ,  C12N15/65 ,  C12Q1/6897

Abstract: 本发明公开了一种有活性的落叶松启动子、获取及鉴定方法。启动子DNA序列如SEQ ID NO.1。用特异引物以日本落叶松的基因组DNA为模板，扩增得到430bp的扩增产物，即得。将这一段DNA分子驱动GFP荧光蛋白基因表达，可观察到荧光信号，证实该序列为启动子。本发明提供的落叶松启动子序列，本质是DNA分子，430bp，能够启动转录。