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公开(公告)号：CN111269974A
公开(公告)日：2020-06-12
申请号：CN202010159715.7
申请日：2020-03-09
IPC: C12Q1/6879 , C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一段小叶杨雄株特异的基因组DNA序列及其应用，属于生物技术领域。通过对小叶杨雌株和雄株基因组进行DNA高通量测序和生物信息学分析，筛选出一段小叶杨雄株特异的基因组DNA序列。依据该小叶杨雄株特异的基因组DNA序列设计引物，以小叶杨和美洲黑杨的基因组DNA为模板，通过PCR扩增结果判断所检测杨树的性别，琼脂糖凝胶电泳检测出目标条带的为雄株，缺失该目标条带的为雌株。本发明提供的小叶杨雄株特异的基因组DNA序列及鉴定杨树植株性别的方法可以高效、准确地鉴定小叶杨和美洲黑杨的性别，在杨树性别鉴定及性别决定的分子机制研究中具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN111269974B
公开(公告)日：2020-12-04
申请号：CN202010159715.7
申请日：2020-03-09
IPC: C12Q1/6879 , C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一段小叶杨雄株特异的基因组DNA序列及其应用，属于生物技术领域。通过对小叶杨雌株和雄株基因组进行DNA高通量测序和生物信息学分析，筛选出一段小叶杨雄株特异的基因组DNA序列。依据该小叶杨雄株特异的基因组DNA序列设计引物，以小叶杨和美洲黑杨的基因组DNA为模板，通过PCR扩增结果判断所检测杨树的性别，琼脂糖凝胶电泳检测出目标条带的为雄株，缺失该目标条带的为雌株。本发明提供的小叶杨雄株特异的基因组DNA序列及鉴定杨树植株性别的方法可以高效、准确地鉴定小叶杨和美洲黑杨的性别，在杨树性别鉴定及性别决定的分子机制研究中具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN111304217B
公开(公告)日：2020-11-10
申请号：CN202010179836.8
申请日：2020-03-13
Abstract: 本发明公开一种毛果杨着丝粒特异的LINE型反转录转座子序列及其应用，属于生物信息学和分子细胞遗传学领域。该发明主要包括：通过对毛果杨着丝粒DNA高通量测序数据的生物信息学分析，筛选出一种着丝粒特异的LINE型反转录转座子序列。依据该序列设计引物，以毛果杨基因组DNA为模板，经PCR扩增、切胶回收获得目的片段。通过探针标记、染色体制片、荧光原位杂交验证了该序列位于着丝粒区。本发明提供的着丝粒特异的LINE型反转录转座子序列不仅可以准确标记杨树着丝粒的位置，以构建高质量核型图，也为开展杨树着丝粒的结构、功能及进化研究奠定基础，在杨树分子细胞遗传学及基因组学研究领域具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN111410683A
公开(公告)日：2020-07-14
申请号：CN202010163329.5
申请日：2020-03-10
Applicant: 南京林业大学
IPC: C07K14/415 , C07K16/16 , C07K16/06 , G01N33/68 , G01N33/53
Abstract: 本发明公开杨树功能着丝粒组蛋白CENH3的抗原多肽及其应用，属于生物信息学和分子细胞遗传学领域。该发明主要包括：筛选毛果杨CENH3蛋白特异的一段氨基酸序列并人工合成多肽，用该多肽免疫新西兰兔，制备抗血清，亲和纯化后得到CENH3蛋白抗体；抗体通过免疫荧光检测、ChIP-FISH进行特异性验证，证明了该抗体可以准确识别功能着丝粒。该抗体可以在杨属树种中通用，不仅可以准确标记杨树功能着丝粒的位置，也为开展杨树着丝粒的结构、功能及进化研究奠定基础。本发明在杨树分子细胞遗传学、基因组学及表观组学等研究领域具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN110583489B
公开(公告)日：2020-06-09
申请号：CN201911020465.2
申请日：2019-10-24
Applicant: 南京林业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种大叶杨的组培快繁方法和应用，包括：以大叶杨幼嫩叶柄为外植体，外植体依次进行不定芽诱导培养、增殖培养、生根培养和移栽。利用上述的组培快繁方法得到的组培生根苗培养时间短，培养流程简便，提高了大叶杨繁殖的效率；能快速获得遗传性状一致的大叶杨组培生根苗，组培生根苗移栽成活率高。利用组培快繁技术，进行外植体培养，不受季节气候变化、自然灾害的影响，可进行大规模的工业化育苗，利用上述组培快繁方法，可以保持优良基因型的特性不变，从而为大叶杨优良种质资源的保存和利用提供技术保障。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111218499A
公开(公告)日：2020-06-02
申请号：CN202010106601.6
申请日：2020-02-20
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/6841
Abstract: 本发明公开一种基于冰冻切片的杨树根尖3D荧光原位杂交方法，属于分子细胞遗传学领域。本方法包括：获取杨树根尖，用卡诺固定液固定后水洗，再用包埋剂将其包埋并冷冻后切片，将切片粘附到载玻片上，随后经过烤片、变性、杂交、抗体检测等FISH步骤，最后在激光共聚焦显微镜下观察并捕获3D图像。本发明提供的方法可以获得根尖完整的组织结构且FISH信号清晰，相比传统制片方法获得的2D FISH结果，本发明的方法可以在三维水平直观展示染色体在细胞中的真实空间占位，以及在三维水平准确定位靶序列在细胞中的空间分布，可应用于杨树的染色体空间占位、基因表达及Hi-C测序结果的分析等领域，具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN110583489A
公开(公告)日：2019-12-20
申请号：CN201911020465.2
申请日：2019-10-24
Applicant: 南京林业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种大叶杨的组培快繁方法和应用，包括：以大叶杨幼嫩叶柄为外植体，外植体依次进行不定芽诱导培养、增殖培养、生根培养和移栽。利用上述的组培快繁方法得到的组培生根苗培养时间短，培养流程简便，提高了大叶杨繁殖的效率；能快速获得遗传性状一致的大叶杨组培生根苗，组培生根苗移栽成活率高。利用组培快繁技术，进行外植体培养，不受季节气候变化、自然灾害的影响，可进行大规模的工业化育苗，利用上述组培快繁方法，可以保持优良基因型的特性不变，从而为大叶杨优良种质资源的保存和利用提供技术保障。
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公开(公告)号：CN116334129A
公开(公告)日：2023-06-27
申请号：CN202211679920.1
申请日：2022-12-26
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种杨树良种‘泗杨1号’的高效转基因方法，属于植物基因工程领域。本发明公开的转基因方法浸染和共培养同时进行，浸染、共培养、筛选培养、抗性芽诱导及伸长培养均在液体培养基中完成。这样添加抗生素和更换培养基时操作简便、减少了培养基的用量，节约实验成本，而且植物材料可以完全浸没在培养基中，使筛选和诱导培养更高效，不仅显著缩短了实验周期，而且避免了假阳性的产生。本发明公开的转基因方法可应用于杨树良种‘泗杨1号’的转基因及功能基因组学研究领域，也可为其它杨树或其它植物的转基因相关研究提供技术参考，具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN101849505B
公开(公告)日：2012-07-18
申请号：CN201010109751.9
申请日：2010-02-10
Applicant: 南京林业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 一种诱导马尾松未成熟种子ESM再生植株的方法，利用马尾松未成熟种子ESM所具有的持续裂生能力特征，通过固体和液体培养的交替培养，经过维持、增殖、体胚成熟前期、成熟培养四个阶段，使ESM形成发育完整、结构正常的体胚，经萌发培养获得马尾松植株。采用本发明所提供的方法，可以获得大量遗传基础一致的马尾松体胚的再生植株，为马尾松珍稀遗传资源的保存、优良基因型苗木的大量生产，提供了一种周期短、发生效率高的新技术。
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公开(公告)号：CN101133717B
公开(公告)日：2011-05-04
申请号：CN200710130821.7
申请日：2007-08-22
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 一种西伯利亚百合脱毒试管苗鳞片高效再生鳞茎方法，其特征是选取1～1.5cm直径的试管鳞茎，剥取外侧1～3层鳞片，在无菌条件下用锋利的刀具将鳞片纵向切为厚度1～2mm的薄片，接种于诱导培养基上诱导不定芽的发生。当不定芽长到2～3cm高时再转入养鳞茎培养基培养，当鳞茎直径达到1.5～2.0cm时，分别进行冷库培养、常温炼苗后即可移栽入珍珠岩和草炭土基质中进行常规育苗。
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