公开(公告)号：CN114958888B

公开(公告)日：2024-02-09

申请号：CN202210248471.9

申请日：2022-03-14

Applicant: 廊坊梅花生物技术开发有限公司

Inventor： 蒋宇 ,  钱峰慧 ,  孙兵兵 ,  吴涛

IPC: C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P13/08 ,  C12N15/53 ,  C12N15/54 ,  C12N15/60 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种构建缬氨酸生产菌的方法，包括以下步骤：以产L‑缬氨酸的微生物为底盘菌，敲减或者失活丙氨酸合成相关基因avtA、alaA、alaC；增强缬氨酸合成相关基因ilvBN、ilvC、leuDH、ilvE、ilvD、ygaZH、Lrp表达；敲减或者失活支路代谢醇/醛/酸合成相关基因ackA、ldhA、mgsA、frd、pflB、adhE。本发明构建的菌株CCTCC NO:M2022134能够采用厌氧发酵或者好氧‑厌氧两阶段发酵方式生产L‑缬氨酸，发酵50h后缬氨酸产量达到94.8g/L，糖酸转化率达到57.8％。

公开(公告)号：CN114958888A

公开(公告)日：2022-08-30

申请号：CN202210248471.9

申请日：2022-03-14

Applicant: 廊坊梅花生物技术开发有限公司

Inventor： 蒋宇 ,  钱峰慧 ,  孙兵兵 ,  吴涛

IPC: C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P13/08 ,  C12N15/53 ,  C12N15/54 ,  C12N15/60 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种构建缬氨酸生产菌的方法，包括以下步骤：以产L‑缬氨酸的微生物为底盘菌，敲减或者失活丙氨酸合成相关基因avtA、alaA、alaC；增强缬氨酸合成相关基因ilvBN、ilvC、leuDH、ilvE、ilvD、ygaZH、Lrp表达；敲减或者失活支路代谢醇/醛/酸合成相关基因ackA、ldhA、mgsA、frd、pflB、adhE。本发明构建的菌株CCTCC NO:M2022134能够采用厌氧发酵或者好氧‑厌氧两阶段发酵方式生产L‑缬氨酸，发酵50h后缬氨酸产量达到94.8g/L，糖酸转化率达到57.8％。

公开(公告)号：CN107227283B

公开(公告)日：2021-01-15

申请号：CN201710385500.5

申请日：2017-05-26

Applicant: 廊坊梅花生物技术开发有限公司

Inventor： 杨晟 ,  蒋宇 ,  钱峰慧 ,  杨俊杰 ,  程江红 ,  吴涛 ,  胡丹 ,  刁刘洋

IPC: C12N1/21 ,  C12P13/04 ,  C12R1/15

Abstract: 本发明属于微生物领域，具体涉及一种谷氨酸棒杆菌及其构建方法与应用。本发明所述谷氨酸棒杆菌其细胞内编码6‑磷酸葡糖酸脱氢酶的gnd基因的第361位丝氨酸突变为苯丙氨酸。本发明所述谷氨酸棒杆菌对戊糖磷酸途径中的gnd基因进行点突变，使得6‑磷酸葡糖酸脱氢酶的第361位的丝氨酸被苯丙氨酸替代，而减弱6‑磷酸葡糖酸脱氢酶的变构调节，从而增强NADPH再生能力，为脯氨酸合成提供充足的NADPH，进而提高脯氨酸的产量。实验表明本发明所述谷氨酸棒杆菌为L‑脯氨酸高产菌株，能有效积累L‑脯氨酸，提高L‑脯氨酸的产量，为L‑脯氨酸的工业化生产奠定了基础。

公开(公告)号：CN107227283A

公开(公告)日：2017-10-03

申请号：CN201710385500.5

申请日：2017-05-26

Applicant: 廊坊梅花生物技术开发有限公司

Inventor： 杨晟 ,  蒋宇 ,  钱峰慧 ,  杨俊杰 ,  程江红 ,  吴涛 ,  胡丹 ,  刁刘洋

IPC: C12N1/21 ,  C12P13/04 ,  C12R1/15

Abstract: 本发明属于微生物领域，具体涉及一种谷氨酸棒杆菌及其构建方法与应用。本发明所述谷氨酸棒杆菌其细胞内编码6‑磷酸葡糖酸脱氢酶的gnd基因的第361位丝氨酸突变为苯丙氨酸。本发明所述谷氨酸棒杆菌对戊糖磷酸途径中的gnd基因进行点突变，使得6‑磷酸葡糖酸脱氢酶的第361位的丝氨酸被苯丙氨酸替代，而减弱6‑磷酸葡糖酸脱氢酶的变构调节，从而增强NADPH再生能力，为脯氨酸合成提供充足的NADPH，进而提高脯氨酸的产量。实验表明本发明所述谷氨酸棒杆菌为L‑脯氨酸高产菌株，能有效积累L‑脯氨酸，提高L‑脯氨酸的产量，为L‑脯氨酸的工业化生产奠定了基础。