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公开(公告)号：CN117720630A
公开(公告)日：2024-03-19
申请号：CN202211147987.0
申请日：2022-09-19
Applicant: 廊坊梅花生物技术开发有限公司
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域，具体提供一种突变的膜蛋白及其构建与应用。本发明所提供的膜蛋白突变体，由野生型膜蛋白TerC氨基酸序列的第294位突变为赖氨酸，或突变为精氨酸；所述膜蛋白突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示。编码所述的膜蛋白突变体的核苷酸序列如SEQ ID NO.3或SEQ ID NO.4所示。对携带所述膜蛋白突变体的模式菌进行摇瓶发酵，其氨基酸产量及产率均有提升效果。携带有膜蛋白突变体的谷氨酸棒杆菌的培养液中的氨基酸浓度更高，其中赖氨酸产量和产率的提高程度显著。
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公开(公告)号：CN116790568A
公开(公告)日：2023-09-22
申请号：CN202210255870.8
申请日：2022-03-15
Applicant: 廊坊梅花生物技术开发有限公司
IPC: C12N9/88 , C12N15/60 , C12N15/54 , C12N15/52 , C12N15/75 , C12N1/21 , C12P17/16 , C12P19/32 , C12P19/40 , C12P25/00 , C12R1/125 , C12R1/07
Abstract: 本发明提供磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶突变体及其应用。将芽孢杆菌属微生物中磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶第147位氨基酸由赖氨酸(K)突变为精氨酸(R)或组氨酸(H)后，腺苷、肌苷产量均有提升，突变体pckAK147H工程菌株与出发菌株A1相比，腺苷产量由1.3g/L提高到1.8g/L，肌苷产量由0.6g/L提高到1.3g/L。本发明为大规模生产核苷提供有效手段，应用前景广阔。
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公开(公告)号：CN116790546A
公开(公告)日：2023-09-22
申请号：CN202210255860.4
申请日：2022-03-15
Applicant: 廊坊梅花生物技术开发有限公司
Abstract: 本发明公开了丙酮酸激酶突变体及其应用。将芽孢杆菌属微生物中的丙酮酸激酶第101位氨基酸由苏氨酸(T)突变为赖氨酸(K)、精氨酸(R)或脯氨酸(P)后，腺苷产量均有提升，尤其以苏氨酸突变为赖氨酸后效果最好。丙酮酸激酶突变菌株pykT101K与出发菌株A1相比，腺苷产量由1.3g/L提高到2.1g/L最高；丙酮酸激酶突变菌株pykT101R与出发菌株A1相比，肌苷产量由0.6g/L提高到1.1g/L最好。本发明为大规模生产核苷提供有效手段，应用前景广阔。
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公开(公告)号：CN116656754A
公开(公告)日：2023-08-29
申请号：CN202210157056.2
申请日：2022-02-21
Applicant: 廊坊梅花生物技术开发有限公司
Abstract: 本发明涉及微生物工程技术领域，具体公开了一种异亮氨酸生产方法、乙酰羟酸合酶突变体及重组微生物与应用。本发明的异亮氨酸生产方法，包括以重组微生物进行发酵培养的步骤，所述重组微生物相比于出发菌株，表达乙酰羟酸合酶ilvIH或乙酰羟酸合酶突变体ilvHF134L、ilvHF134V或ilvHF134A；所述重组微生物的出发菌株为棒杆菌。本发明生产异亮氨酸的方法，生产效率高，副产物少，适于工业化推广。
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公开(公告)号：CN116286809A
公开(公告)日：2023-06-23
申请号：CN202111566403.9
申请日：2021-12-20
Applicant: 廊坊梅花生物技术开发有限公司
IPC: C12N15/113 , C12N15/77 , C12N1/21 , C12P13/08 , C12R1/15
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域，具体涉及一种突变的gluB启动子及其应用。本发明发现强化gluB基因的表达能够显著提高菌株生产赖氨酸等天冬氨酸族氨基酸的能力。本发明提供的突变的gluB启动子相比于野生型gluB启动子具有明显更高的启动转录的活性，利用该启动子替换gluB基因的天然启动子，可使得gluB基因的表达明显增强，构建得到的重组微生物的赖氨酸产量和转化率显著提高。本发明提供的突变的gluB启动子可用于调控gluB基因等氨基酸合成相关基因的表达，为基因表达调控提供了新的分子工具和方法。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116262916A
公开(公告)日：2023-06-16
申请号：CN202111530574.6
申请日：2021-12-14
Applicant: 廊坊梅花生物技术开发有限公司
IPC: C12N9/88 , C12N9/10 , C12N15/60 , C12N15/54 , C12P13/08 , C12N15/77 , C12N1/21 , C12R1/15 , C12R1/13
Abstract: 本发明涉及一种重组微生物及其构建方法与应用，本发明所提供的重组微生物涉及磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶、二氢硫辛酰胺乙酰转移酶的突变体。具体地，本发明所提供的重组微生物中含有编码基因ppc和/或aceF的突变体；更具体地，重组微生物中ppc基因编码的磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶的第186位氨基酸和/或aceF基因编码的二氢硫辛酰胺乙酰转移酶的第77位氨基酸发生突变。本发明通过对磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶，和/或二氢硫辛酰胺乙酰转移酶进行修饰，使得微生物能够高效地生成缬氨酸等支链氨基酸或其衍生物。
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公开(公告)号：CN116262913A
公开(公告)日：2023-06-16
申请号：CN202111532134.4
申请日：2021-12-14
Applicant: 廊坊梅花生物技术开发有限公司
IPC: C12N9/04 , C12N9/00 , C12N15/53 , C12N15/52 , C12N15/75 , C12N1/21 , C12P19/40 , C12R1/125 , C12R1/07 , C12R1/01
Abstract: 本发明提供L‑苏氨酸3‑脱氢酶和尿嘧啶透过酶突变体及其应用。本发明通过对tdh基因修饰，将L‑苏氨酸3‑脱氢酶的第282位氨基酸由V突变为其他氨基酸(如E、A或G)，实现对L‑苏氨酸3‑脱氢酶的突变；和/或，通过对pyrP基因修饰，将尿嘧啶透过酶的第283位氨基酸由V突变为其他氨基酸(如M、A或L)，实现对尿嘧啶透过酶的突变，使得微生物产核苷的能力提高。本发明提供的L‑苏氨酸3‑脱氢酶突变菌种和/或尿嘧啶透过酶突变菌株对目标产物腺苷、肌苷产量的提升具有显著的促进作用。该L‑苏氨酸3‑脱氢酶突变体和/或尿嘧啶透过酶突变体及其重组微生物为产腺苷、肌苷及以其为前体的衍生物的生产菌株的构建提供借鉴。
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公开(公告)号：CN116262780A
公开(公告)日：2023-06-16
申请号：CN202111532117.0
申请日：2021-12-14
Applicant: 廊坊梅花生物技术开发有限公司
Abstract: 本发明公开了苏氨酸外排蛋白突变体及其应用。本发明通过将苏氨酸外排蛋白第193位氨基酸由异亮氨酸(I)突变为其他氨基酸，如缬氨酸(V)，实现了对苏氨酸外排蛋白的突变，使得微生物产杂氨基酸(如苏氨酸、异亮氨酸)的能力下降，产赖氨酸的能力与改造前的菌株相比增强，最终提高了赖氨酸的产量。
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公开(公告)号：CN112143751B
公开(公告)日：2022-05-06
申请号：CN202011003905.6
申请日：2020-09-22
Applicant: 廊坊梅花生物技术开发有限公司
Abstract: 本发明提供高产核苷的枯草芽孢杆菌工程菌及其构建方法与应用。本发明还提供发酵生产核苷的方法，包括：(1)增强枯草芽孢杆菌染色体上编码NCBI参考序列WP_009967365.1的谷氨酸合酶基因gltA；和/或增强枯草芽孢杆菌染色体上编码NCBI参考序列WP_003231737.1的谷氨酰胺合成酶基因glnA；(2)将步骤(1)获得的基因增强菌株用于核苷的发酵生产。本发明提供的枯草芽孢杆菌工程菌为核苷高产菌株，能有效积累核苷，提高核苷的产量，为核苷的工业化生产奠定了基础。
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公开(公告)号：CN113278596A
公开(公告)日：2021-08-20
申请号：CN202110567676.9
申请日：2021-05-24
Applicant: 廊坊梅花生物技术开发有限公司
IPC: C12N9/00 , C12N9/10 , C12N15/54 , C12N15/52 , C12N15/75 , C12N1/21 , C12P19/40 , C12R1/125 , C12R1/07
Abstract: 本发明涉及生物工程领域，具体涉及可提高芽孢杆菌核苷产量的突变体及其应用。所述突变体包括：1)磷酸核糖基甲酰基甘氨酰胺合酶突变体，其在序列如SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.6所示的磷酸核糖基甲酰基甘氨酰胺合酶的基础上，第444位丝氨酸突变为苯丙氨酸；和/或，2)酰胺基磷酸核糖基转移酶突变体，其在序列如SEQ ID NO.4或SEQ ID NO.8所示的酰胺基磷酸核糖基转移酶的基础上，第312位亮氨酸突变为脯氨酸。本发明的突变体均仅需突变一个氨基酸位点即可在芽孢杆菌获得更高的核苷产量，可有效积累肌苷、腺苷、鸟苷等核苷，实用性更广，有利于降低核苷工业化生产的成本。
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