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公开(公告)号:CN101738481A
公开(公告)日:2010-06-16
申请号:CN200910193662.4
申请日:2009-11-05
Applicant: 广州医学院第二附属医院 , 中山大学
IPC: G01N33/68 , G01N1/28 , G01N21/76 , G01N33/543 , G01N33/53
Abstract: 本发明公开用于人B型钠尿肽BNP快速检测的试剂及制备方法和临床应用,其特征在于:1)包括抗人B型钠尿肽BNP特异性多肽,其DNA序列如序列表SEQ ID№:1所示;2)所述抗人B型钠尿肽BNP特异性多肽与载体蛋白KLH连接,并将所述抗人B型钠尿肽BNP特异性多肽固定在硝酸纤维素膜上。本发明采用噬菌体展示New England Biolabs公司的噬菌体随机12肽库比杂交瘤技术,缩短了制备单抗从取脾细胞到稳定的克隆株过程的时间;淘洗出来的特异性12肽,分子量小、结构简单,制成试剂盒后提高检测的特异性和敏感性;直接用于噬菌体随机多肽库进行实验,具有降低成本、节约时间、提高工作效率的效果。
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公开(公告)号:CN1343789A
公开(公告)日:2002-04-10
申请号:CN00124832.4
申请日:2000-09-18
Applicant: 中山大学
Abstract: 本发明利用大肠杆菌分子伴侣Thioredoxin(TRX,硫氧还蛋白)作为融合伴体,构建了一种高效原核融合表达载体。它含有T7强启动子、TRX伴体蛋白、连接区(包括柔韧区、6组氨酸纯化位点、肠激酶切割位点和多克隆位点)。该载体能以融合蛋白的形式高效表达外源基因,表达产物溶解性好,纯化简易,且多具有外源蛋白的天然生物活性。故此表达载体不仅适用于重组蛋白的大量生产,而且也适用于对基因功能与构象关系的研究。
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公开(公告)号:CN1343772A
公开(公告)日:2002-04-10
申请号:CN00124830.8
申请日:2000-09-18
Applicant: 中山大学
CPC classification number: C12N9/18
Abstract: 本发明通过构建平颏海蛇(Lapemis hardwicki)毒腺cDNA文库和DNA测序,分离出一个新的磷脂酶A2(简称PLA2)基因,命名为PLA2-9,由此推倒其编码146个氨基酸,其中含27个氨基酸的信号肽。该蛋白等电点为8.5,分子量约为14,280道尔顿。该蛋白在体外具有对多种肿瘤细胞的细胞毒性。本发明不仅为海蛇新基因的基因工程表达及功能研究提供了可借鉴的方法,而且为开发新的抗癌药物奠定了基础。
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公开(公告)号:CN1210306C
公开(公告)日:2005-07-13
申请号:CN00124831.6
申请日:2000-09-18
Applicant: 中山大学
IPC: C07K14/435 , A61K38/17 , A61P25/00
Abstract: 本发明通过构建平颏海蛇(Lapemis hardwicki)毒腺cDNA文库和DNA测序,得到三个编码短链神经毒素的基因,分别称为sn12、sn36和sn160。采用PCR方法改造并扩增该三个cDNA,克隆到表达载体PETTRX上,以BL21-DE3为表达宿主,经IPTG诱导,三种神经毒素基因在大肠杆菌中都得到高效的可溶性融合表达。短链神经毒素镇痛作用实验表明,sn12、sn36和sn160均能明显提高小鼠的痛阈值。
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公开(公告)号:CN1343689A
公开(公告)日:2002-04-10
申请号:CN00124831.6
申请日:2000-09-18
Applicant: 中山大学
IPC: C07K14/435 , A61K38/17 , A61P25/00
Abstract: 本发明通过构建平颏海蛇(Lapemis hardwicki)毒腺cDNA文库和DNA测序,得到三个编码短链神经毒素的基因,分别称为sn12、sn36和sn160。采用PCR方法改造并扩增该三个cDNA,克隆到表达载体PETTRX上,以BL21-DE3为表达宿主,经IPTG诱导,三种神经毒素基因在大肠杆菌中都得到高效的可溶性融合表达。短链神经毒素镇痛作用实验表明,sn12、sn36和sn160均能明显提高小鼠的痛阈值。
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公开(公告)号:CN1306030C
公开(公告)日:2007-03-21
申请号:CN01129706.9
申请日:2001-09-28
Applicant: 中山大学
Abstract: 本发明涉及一种人白细胞介素-10基因序列的人工合成及含该序列的大肠杆菌,其主要特征在于:在Human interleukin-10的35个位点进行密码子替换,替换成大肠杆菌偏爱密码子;并在以上基础上进行pTRX-hIL-10表达质粒的构建,在大肠杆菌中获得稳定高效表达,经分离纯化,制备高纯度、高活性的hIL-10重组蛋白。本发明实现了人白细胞介素-10的体外表达,为该物质的药品化生产奠定了基础。
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公开(公告)号:CN1534094A
公开(公告)日:2004-10-06
申请号:CN03114009.2
申请日:2003-03-28
Applicant: 中山大学
Abstract: 本发明涉及一种应用基因工程方法改造尿激酶原,生产溶解血栓的重组蛋白及其工程菌。如右式该重组蛋白选择性地保留了尿激酶原分子活性部位的氨基酸序列,使之由原来的12对二硫键减少为6对,但同样保持空间结构的稳定性和溶栓能力。
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公开(公告)号:CN1432647A
公开(公告)日:2003-07-30
申请号:CN02114746.9
申请日:2002-01-15
Applicant: 中山大学
Abstract: 本发明公开了一种平颏海蛇长链神经毒素基因Ln87,其来源于平颏海蛇毒腺cDNA文库。本发明的平颏海蛇长链神经毒素LN87具有生物活性,并具有明显的镇痛作用。本发明还公开了上述基因的表达及在制备治疗镇痛、戒毒、相关神经疾病药物的应用。
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公开(公告)号:CN1189565C
公开(公告)日:2005-02-16
申请号:CN00124832.4
申请日:2000-09-18
Applicant: 中山大学
Abstract: 本发明利用大肠杆菌分子伴侣Thioredoxin(TRX,硫氧还蛋白)作为融合伴体,构建了一种高效原核融合表达载体.它含有T7强启动子、TRX伴体蛋白、连接区(包括柔韧区、6组氨酸纯化位点、肠激酶切割位点和多克隆位点)。该载体能以融合蛋白的形式高效表达外源基因,表达产物溶解性好,纯化简易,且多具有外源蛋白的天然生物活性。故此表达载体不仅适用于重组蛋白的大量生产,而且也适用于对基因功能与构象关系的研究。
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公开(公告)号:CN1534092A
公开(公告)日:2004-10-06
申请号:CN03114010.6
申请日:2003-03-28
Applicant: 广州医学院 , 中山大学 , 广东省大日生物化学药业有限公司
Abstract: 本发明涉及一种含人源抗D-二聚体的特异性导向溶栓抗体基因的大肠杆菌及其分泌产物。其特征在于通过半套式PCR方法将人抗体的重链基因和轻链基因连入噬菌体质粒pComb3H形成重组噬菌体质粒pComb3H-HL,该重组噬菌体质粒在辅助噬菌体VCSM13的超感染下构建成噬菌体抗体组合文库;经ELISA方法筛选出抗人纤维蛋白降解产物D-二聚体的特异株。因此,该抗体具有对血栓降解物D-二聚体特异的免疫性,能够与溶栓药物组成导向溶栓剂,在治疗血管栓塞性疾病方面具有广泛的临床应用价值。
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