公开(公告)号：CN109810965B

公开(公告)日：2022-03-25

申请号：CN201910216451.1

申请日：2019-03-20

Applicant: 广州中医药大学(广州中医药研究院)

Inventor： 段礼新 ,  刘中秋 ,  王丽君 ,  梁锦才 ,  季爱加

IPC: C12N9/42 ,  C12N15/56 ,  C12N15/11 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P33/20 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种能够特异催化呋甾皂苷转化为螺甾皂苷的蛋白，AaF26G1，为β‑葡萄糖苷酶的一种。通过设计特定的引物，可从中药知母植物中克隆得到该蛋白的编码基因；利用生物工程的方法，可进一步制备得到含有该蛋白表达基因的表达载体、重组细胞系。通过将上述重组细胞进行扩大培养及诱导表达，可裂解得到该蛋白的粗酶，进一步纯化可得到精酶，所得到的酶可在体外将具有一定结构特征的呋甾皂苷转化为螺甾皂苷。本发明提供的方法能在体外高效转化呋甾皂苷为螺甾皂苷，相比传统的转化方法可控性更好，效率更高，对制备改善老年痴呆症状、抗衰老、抗抑郁、抗肿瘤等多种含螺甾皂苷的药物具有重要的应用价值。

公开(公告)号：CN109810965A

公开(公告)日：2019-05-28

申请号：CN201910216451.1

申请日：2019-03-20

Applicant: 广州中医药大学(广州中医药研究院)

Inventor： 段礼新 ,  刘中秋 ,  王丽君 ,  梁锦才 ,  季爱加

IPC: C12N9/42 ,  C12N15/56 ,  C12N15/11 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P33/20 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种能够特异催化呋甾皂苷转化为螺甾皂苷的蛋白，AaF26G1，为β-葡萄糖苷酶的一种。通过设计特定的引物，可从中药知母植物中克隆得到该蛋白的编码基因；利用生物工程的方法，可进一步制备得到含有该蛋白表达基因的表达载体、重组细胞系。通过将上述重组细胞进行扩大培养及诱导表达，可裂解得到该蛋白的粗酶，进一步纯化可得到精酶，所得到的酶可在体外将具有一定结构特征的呋甾皂苷转化为螺甾皂苷。本发明提供的方法能在体外高效转化呋甾皂苷为螺甾皂苷，相比传统的转化方法可控性更好，效率更高，对制备改善老年痴呆症状、抗衰老、抗抑郁、抗肿瘤等多种含螺甾皂苷的药物具有重要的应用价值。