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公开(公告)号：CN109810965A
公开(公告)日：2019-05-28
申请号：CN201910216451.1
申请日：2019-03-20
Applicant: 广州中医药大学(广州中医药研究院)
Abstract: 本发明公开了一种能够特异催化呋甾皂苷转化为螺甾皂苷的蛋白，AaF26G1，为β-葡萄糖苷酶的一种。通过设计特定的引物，可从中药知母植物中克隆得到该蛋白的编码基因；利用生物工程的方法，可进一步制备得到含有该蛋白表达基因的表达载体、重组细胞系。通过将上述重组细胞进行扩大培养及诱导表达，可裂解得到该蛋白的粗酶，进一步纯化可得到精酶，所得到的酶可在体外将具有一定结构特征的呋甾皂苷转化为螺甾皂苷。本发明提供的方法能在体外高效转化呋甾皂苷为螺甾皂苷，相比传统的转化方法可控性更好，效率更高，对制备改善老年痴呆症状、抗衰老、抗抑郁、抗肿瘤等多种含螺甾皂苷的药物具有重要的应用价值。
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公开(公告)号：CN112646834A
公开(公告)日：2021-04-13
申请号：CN202110012588.2
申请日：2021-01-06
Applicant: 广州中医药大学(广州中医药研究院)
IPC: C12N15/81 , C12N15/61 , C12N15/53 , C12P33/00 , C07J63/00 , A61P35/00 , A61P29/00 , A61P31/12 , C12R1/865
Abstract: 本发明公开了一种羽扇豆醇衍生物及其合成方法和应用，涉及生物合成技术领域，该合成方法采用新的合成通路，采用不同植物来源的CYP450酶用于修饰羽扇豆醇，通过将编码羽扇豆醇合成酶的基因、编码CYP450酶的基因以及编码CPR还原酶的基因在能够产生2,3‑氧化鲨烯外源微生物中表达，可获得多种新的羽扇豆醇衍生物，为羽扇豆醇的进一步开发奠定基础。
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公开(公告)号：CN112029780A
公开(公告)日：2020-12-04
申请号：CN202011038347.7
申请日：2020-09-28
Applicant: 广州中医药大学(广州中医药研究院)
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/50
Abstract: 本发明公开了一个丹参NAC转录因子SmNAC78基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；以及丹参NAC转录因子SmNAC78蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。本发明通过SmNAC78转录因子克隆及功能验证证明SmNAC78转基因后能够通过促进丹参酮合成途径关键酶基因高表达，进一步提高丹参酮合成的产量。本发明对阐明丹参酮生物合成的调控机制提供了分子基础，为利用代谢工程手段提高丹参酮类化合物产量提供基因资源，具有重大的应用价值。
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公开(公告)号：CN114854727A
公开(公告)日：2022-08-05
申请号：CN202210466358.8
申请日：2022-04-29
Applicant: 广州中医药大学(广州中医药研究院)
Abstract: 本发明公开了一种生产原萜烷三萜的三萜环化酶及其编码序列、表达载体和应用。本发明所述的酶专一性合成protosta‑13(17),24‑dien‑3β‑ol，克服了缺少高效、专一合成这类原萜烷的酶的问题，属国际首例报道合成植物原萜烷的酶，并且明确其727位置关键苏氨酸为其催化活性的必须氨基酸。本发明同时也明确可以通过突变其他类型C‑B‑C四环三萜环化酶如环阿屯醇合酶、葫芦二烯醇合成酶、羊毛甾醇合酶、帕克醇合酶，相应位置的苯丙氨酸突变为苏氨酸或天冬酰胺，均能产生原萜烷三萜。本发明具有普遍意义，可以适用于上述各类型环化酶。
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公开(公告)号：CN109810965B
公开(公告)日：2022-03-25
申请号：CN201910216451.1
申请日：2019-03-20
Applicant: 广州中医药大学(广州中医药研究院)
Abstract: 本发明公开了一种能够特异催化呋甾皂苷转化为螺甾皂苷的蛋白，AaF26G1，为β‑葡萄糖苷酶的一种。通过设计特定的引物，可从中药知母植物中克隆得到该蛋白的编码基因；利用生物工程的方法，可进一步制备得到含有该蛋白表达基因的表达载体、重组细胞系。通过将上述重组细胞进行扩大培养及诱导表达，可裂解得到该蛋白的粗酶，进一步纯化可得到精酶，所得到的酶可在体外将具有一定结构特征的呋甾皂苷转化为螺甾皂苷。本发明提供的方法能在体外高效转化呋甾皂苷为螺甾皂苷，相比传统的转化方法可控性更好，效率更高，对制备改善老年痴呆症状、抗衰老、抗抑郁、抗肿瘤等多种含螺甾皂苷的药物具有重要的应用价值。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112029780B
公开(公告)日：2022-03-08
申请号：CN202011038347.7
申请日：2020-09-28
Applicant: 广州中医药大学(广州中医药研究院)
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/84 , A01H5/00 , A01H6/50
Abstract: 本发明公开了一个丹参NAC转录因子SmNAC78基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；以及丹参NAC转录因子SmNAC78蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。本发明通过SmNAC78转录因子克隆及功能验证证明SmNAC78转基因后能够通过促进丹参酮合成途径关键酶基因高表达，进一步提高丹参酮合成的产量。本发明对阐明丹参酮生物合成的调控机制提供了分子基础，为利用代谢工程手段提高丹参酮类化合物产量提供基因资源，具有重大的应用价值。
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公开(公告)号：CN111718924A
公开(公告)日：2020-09-29
申请号：CN202010622749.5
申请日：2020-06-30
Applicant: 广州中医药大学(广州中医药研究院)
Abstract: 本发明公开了一种用于催化合成香树素的蛋白及其制备方法和应用，涉及生物分子技术领域，该蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，或与SEQ ID No.2具有90％以上序列同源性且具有相同蛋白功能的序列，该蛋白以2,3-氧化鲨烯为底物，能同时催化合成α-amyrin、β-amyrin和δ-amyrin，主要合成α-amyrin，为多功能OSC酶的研究提供了一种新的方向。
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公开(公告)号：CN119372072A
公开(公告)日：2025-01-28
申请号：CN202411524062.2
申请日：2024-10-30
Applicant: 广州中医药大学(广州中医药研究院)
Abstract: 本发明公开了一种高产达玛二烯醇的酿酒酵母工程菌及其构建方法与应用。本研究首次构建达玛二烯醇工程菌株，实现达玛二烯醇的高效合成，解决稀有人参皂苷天然来源不足的难题，促进稀有人参皂苷的“绿色合成”和可持续利用，为后续构建稀有人参皂苷细胞工厂奠定基础。并且实现了多双键类稀有人参皂苷骨架——达玛二烯醇在酿酒酵母中的异源合成，为后续实现达玛二烯醇型稀有人参皂苷生物合成奠定了坚实的基础。为提高稀有人参皂苷产量，实现稀有人参皂苷的“不种而获”，促进中药资源可持续发展奠定了基础。
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公开(公告)号：CN119060994A
公开(公告)日：2024-12-03
申请号：CN202411249130.9
申请日：2024-09-06
Applicant: 广州中医药大学(广州中医药研究院)
IPC: C12N9/88 , C12N1/19 , C12N15/60 , C12N15/53 , C12N15/54 , C12N15/31 , C12N15/62 , C12N15/81 , C12P5/00 , C12R1/865
Abstract: 本发明公开了一种β‑石竹烯合酶及其在制备β‑石竹烯中的应用。本发明以高产前体FPP的SE00底盘菌为基础，通过柔性linker(GGGS)2将ERG20(FPP synthase)与AarTPS88(β‑caryophyllene synthase)进行融合表达，并过表达基因HIF‑1、UPC2‑1和tHMGR来提高MVA途径的代谢通量，从而改善β‑石竹烯的生物合成；成功获得了产β‑石竹烯的工程菌SE17；最终β‑石竹烯的摇瓶产量为828.4mg/L。
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公开(公告)号：CN111718924B
公开(公告)日：2021-12-24
申请号：CN202010622749.5
申请日：2020-06-30
Applicant: 广州中医药大学(广州中医药研究院)
Abstract: 本发明公开了一种用于催化合成香树素的蛋白及其制备方法和应用，涉及生物分子技术领域，该蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，或与SEQ ID No.2具有90％以上序列同源性且具有相同蛋白功能的序列，该蛋白以2,3‑氧化鲨烯为底物，能同时催化合成α‑amyrin、β‑amyrin和δ‑amyrin，主要合成α‑amyrin，为多功能OSC酶的研究提供了一种新的方向。
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