公开(公告)号：CN112646834A

公开(公告)日：2021-04-13

申请号：CN202110012588.2

申请日：2021-01-06

Applicant: 广州中医药大学(广州中医药研究院)

Inventor： 段礼新 ,  刘中秋 ,  熊文波 ,  李钰 ,  季爱加 ,  梁锦才

IPC: C12N15/81 ,  C12N15/61 ,  C12N15/53 ,  C12P33/00 ,  C07J63/00 ,  A61P35/00 ,  A61P29/00 ,  A61P31/12 ,  C12R1/865

Abstract: 本发明公开了一种羽扇豆醇衍生物及其合成方法和应用，涉及生物合成技术领域，该合成方法采用新的合成通路，采用不同植物来源的CYP450酶用于修饰羽扇豆醇，通过将编码羽扇豆醇合成酶的基因、编码CYP450酶的基因以及编码CPR还原酶的基因在能够产生2,3‑氧化鲨烯外源微生物中表达，可获得多种新的羽扇豆醇衍生物，为羽扇豆醇的进一步开发奠定基础。

公开(公告)号：CN109810965A

公开(公告)日：2019-05-28

申请号：CN201910216451.1

申请日：2019-03-20

Applicant: 广州中医药大学(广州中医药研究院)

Inventor： 段礼新 ,  刘中秋 ,  王丽君 ,  梁锦才 ,  季爱加

IPC: C12N9/42 ,  C12N15/56 ,  C12N15/11 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P33/20 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种能够特异催化呋甾皂苷转化为螺甾皂苷的蛋白，AaF26G1，为β-葡萄糖苷酶的一种。通过设计特定的引物，可从中药知母植物中克隆得到该蛋白的编码基因；利用生物工程的方法，可进一步制备得到含有该蛋白表达基因的表达载体、重组细胞系。通过将上述重组细胞进行扩大培养及诱导表达，可裂解得到该蛋白的粗酶，进一步纯化可得到精酶，所得到的酶可在体外将具有一定结构特征的呋甾皂苷转化为螺甾皂苷。本发明提供的方法能在体外高效转化呋甾皂苷为螺甾皂苷，相比传统的转化方法可控性更好，效率更高，对制备改善老年痴呆症状、抗衰老、抗抑郁、抗肿瘤等多种含螺甾皂苷的药物具有重要的应用价值。

公开(公告)号：CN111718924B

公开(公告)日：2021-12-24

申请号：CN202010622749.5

申请日：2020-06-30

Applicant: 广州中医药大学(广州中医药研究院)

Inventor： 段礼新 ,  刘中秋 ,  吴世丹 ,  黄柳芳 ,  季爱加 ,  梁锦才

IPC: C12N9/90 ,  C12N15/61 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12N15/84 ,  A01H5/00 ,  A01H6/82 ,  C12P33/00

Abstract: 本发明公开了一种用于催化合成香树素的蛋白及其制备方法和应用，涉及生物分子技术领域，该蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，或与SEQ ID No.2具有90％以上序列同源性且具有相同蛋白功能的序列，该蛋白以2,3‑氧化鲨烯为底物，能同时催化合成α‑amyrin、β‑amyrin和δ‑amyrin，主要合成α‑amyrin，为多功能OSC酶的研究提供了一种新的方向。

公开(公告)号：CN114854727A

公开(公告)日：2022-08-05

申请号：CN202210466358.8

申请日：2022-04-29

Applicant: 广州中医药大学(广州中医药研究院)

Inventor： 段礼新 ,  刘中秋 ,  巫瑞波 ,  王云鹏 ,  季爱加 ,  梁锦才

IPC: C12N9/90 ,  C12N15/61 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12P15/00 ,  C12P17/18 ,  C12R1/865

Abstract: 本发明公开了一种生产原萜烷三萜的三萜环化酶及其编码序列、表达载体和应用。本发明所述的酶专一性合成protosta‑13(17),24‑dien‑3β‑ol，克服了缺少高效、专一合成这类原萜烷的酶的问题，属国际首例报道合成植物原萜烷的酶，并且明确其727位置关键苏氨酸为其催化活性的必须氨基酸。本发明同时也明确可以通过突变其他类型C‑B‑C四环三萜环化酶如环阿屯醇合酶、葫芦二烯醇合成酶、羊毛甾醇合酶、帕克醇合酶，相应位置的苯丙氨酸突变为苏氨酸或天冬酰胺，均能产生原萜烷三萜。本发明具有普遍意义，可以适用于上述各类型环化酶。

公开(公告)号：CN109810965B

公开(公告)日：2022-03-25

申请号：CN201910216451.1

申请日：2019-03-20

Applicant: 广州中医药大学(广州中医药研究院)

Inventor： 段礼新 ,  刘中秋 ,  王丽君 ,  梁锦才 ,  季爱加

IPC: C12N9/42 ,  C12N15/56 ,  C12N15/11 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P33/20 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种能够特异催化呋甾皂苷转化为螺甾皂苷的蛋白，AaF26G1，为β‑葡萄糖苷酶的一种。通过设计特定的引物，可从中药知母植物中克隆得到该蛋白的编码基因；利用生物工程的方法，可进一步制备得到含有该蛋白表达基因的表达载体、重组细胞系。通过将上述重组细胞进行扩大培养及诱导表达，可裂解得到该蛋白的粗酶，进一步纯化可得到精酶，所得到的酶可在体外将具有一定结构特征的呋甾皂苷转化为螺甾皂苷。本发明提供的方法能在体外高效转化呋甾皂苷为螺甾皂苷，相比传统的转化方法可控性更好，效率更高，对制备改善老年痴呆症状、抗衰老、抗抑郁、抗肿瘤等多种含螺甾皂苷的药物具有重要的应用价值。

公开(公告)号：CN111718924A

公开(公告)日：2020-09-29

申请号：CN202010622749.5

申请日：2020-06-30

Applicant: 广州中医药大学(广州中医药研究院)

Inventor： 段礼新 ,  刘中秋 ,  吴世丹 ,  黄柳芳 ,  季爱加 ,  梁锦才

IPC: C12N9/90 ,  C12N15/61 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12N15/84 ,  A01H5/00 ,  A01H6/82 ,  C12P33/00

Abstract: 本发明公开了一种用于催化合成香树素的蛋白及其制备方法和应用，涉及生物分子技术领域，该蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，或与SEQ ID No.2具有90％以上序列同源性且具有相同蛋白功能的序列，该蛋白以2,3-氧化鲨烯为底物，能同时催化合成α-amyrin、β-amyrin和δ-amyrin，主要合成α-amyrin，为多功能OSC酶的研究提供了一种新的方向。